一、白细胞介素-1β对周围神经损伤后运动神经元的保护作用（论文文献综述）
谭荣镑,魏波,李广盛[1]（2021）在《Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用参与脊髓损伤后的神经修复》文中认为背景:神经血管损伤是脊髓损伤的主要病理生理特点。多年来广泛专注于神经或血管保护的单一治疗策略并未取得有效突破,而Nrf2因具有神经-血管的双重保护作用成为研究热点,但其介导神经-血管间的交互作用的机制还不明确。目的:对Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用在脊髓损伤中的研究进展进行综述。方法:以"Nuclear Factor Erythroid 2-related Factor 2 （Nrf2）,neurovascularunit（NVU）,spinal cord injury（SCI）"为英文关键词,以"核因子E2相关因子2 （Nrf2）,神经血管单元,脊髓损伤"为中文关键词,检索2001至2020年期间收录在PubMed、Medline、中国知网、万方等数据库中的文献,筛选排除与研究目的无关与重复的文献,纳入符合标准的66篇文献进行综述。结果与结论:神经细胞与微血管内皮细胞的相互作用是维持脊髓正常神经功能的基础;Nrf2-ARE信号通路具有抗氧化应激损伤、抑制炎症损伤和抗凋亡的作用,它参与脊髓损伤神经修复的病理生理过程,并可能对神经细胞与血管内皮细胞有双重保护作用。对Nrf2神经血管保护机制的深入研究有助于探索脊髓损伤治疗新策略。
孙建威[2]（2021）在《丙戊酸钠联合甲强龙对大鼠脊髓损伤影响的实验研究》文中研究说明探讨丙戊酸钠（VPA）联合甲强龙（MP）在大鼠脊髓损伤（SCI）后神经功能恢复中的作用及其机制。选取8～10周龄雄性健康SD大鼠60只,按照数字表法随机分为假手术组、SCI组、VPA组、MP组和VPA+MP组,每组12只;各组大鼠再随机分为A、B组2个亚组,每组6只。假手术组仅暴露脊髓、不做SCI造模,其余4组均采用改良Allen法进行大鼠SCI模型制备。假手术组、SCI组术后30 min、6 h、8 h和24 h腹腔注入生理盐水(剂量为30 mg kg-1),24 h后每天腹腔注入相同剂量生理盐水,持续28d;VPA组:分别于术后30 min、6 h和24 h腹腔注入生理盐水(30 mg kg-1),术后8 h腹腔注入VPA(30mg kg-1),24h后每天腹腔注入相同剂量VPA,持续28 d;MP组:分别于术后30 min、6 h和24 h腹腔注入MP(30 mg kg-1),术后8h腹腔注入生理盐水(30 mg kg-1),24 h后每天腹腔注入相同剂量生理盐水,持续28 d。VPA+MP组:术后30 min、6 h和24 h腹腔注入MP(30 mg kg-1),术后8 h腹腔注入VPA(30 mg kg-1),24 h后每天腹腔注入相同剂量VPA,持续28 d。选取各组A亚组大鼠:术后1、3、7、14、28 d,分别采用脊髓损伤行为学运动功能（BBB）评分法和改良Rivlin斜板试验评价SCI后各组大鼠肢体运动功能的恢复情况。选取各组B亚组大鼠:术后7 d手术切取SCI区域脊髓组织,HE染色观察各组大鼠脊髓组织形态变化,Nissl染色观察脊髓运动神经元情况并计算凋亡运动神经元数目,免疫组织化学染色半定量分析肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白的相对表达情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关的X因子（Bax）、Caspase-3的相对表达情况。（1）组内比较:与术前相比,假手术组术后第1、3、7、14、28天BBB评分和Rivlin斜板试验结果差异均无统计学意义（P值均>0.05）;SCI组、VPA组、MP组、VPA+MP组术后不同时间点BBB评分和Rivlin斜板试验结果均明显降低,但随着时间延长,BBB评分和Rivlin斜板试验结果逐渐升高,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。组间比较:SCI组、VPA组、MP组、VPA+MP组SCI后BBB评分和Rivlin斜板试验结果均显着低于假手术组,VPA组、MP组、VPA+MP组的BBB评分和Rivlin斜板试验结果均高于SCI组,VPA+MP组BBB评分和Rivlin斜板试验结果均高于VPA组、MP组,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。（2）假手术组造模术后第7 d,HE染色观察组织学特征:假手术组脊髓组织形态正常;SCI组脊髓组织可见脊髓灰质出现大量的炎性细胞因子浸润,细胞出血、水肿,神经元坏死、凋亡明显;VPA组、MP组、VPA+MP组较SCI组大鼠脊髓组织可见出血水肿显着减轻,炎性因子浸润显着减少,运动神经元溶解、凋亡减轻,其中VPA+MP组的治疗效果更加显着。SCI组、VPA组、MP组、VPA+MP组脊髓空洞面积均明显大于假手术组,VPA组、MP组、VPA+MP组脊髓空洞面积均明显小于SCI组,VPA+MP组脊髓空洞面积均小于VPA组和MP组,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。（3）假手术及造模术后第7 d,Nissl染色观察脊髓正常神经元数目:SCI组、VPA组、MP组、VPA+MP组的正常神经元数目明显少于假手术组,VPA组、MP组、VPA+MP组的正常神经元数目均高于SCI组,VPA+MP组的正常神经元数目均高于VPA组、MP组,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。（4）假手术及造模术后第7 d,免疫组织化学检测TNF-α、IL-1β表达情况:SCI组、VPA组、MP组、VPA+MP组TNF-α、IL-1β表达明显高于假手术组,VPA组、MP组、VPA+MP组TNF-α、IL-1β表达水平显着低于SCI组,VPA+MP组TNF-α、IL-1β表达明显低于VPA组和MP组,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。（5）假手术及造模术后第7 d,Western blot法测试大鼠脊髓组织中凋亡蛋白表达情况:与假手术组相比,SCI组、VPA组、MP组、VPA+MP组凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的相对表达量明显增加;与SCI组相比,VPA组、MP组、VPA+M组Bcl-2的相对表达量明显增加,Bax、Caspase-3的相对表达量明显减少;VPA+MP组Bcl-2的相对表达量明显高于VPA组、MP组,Bax、Caspase-3的相对表达量明显减少低于VPA组、MP组,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。VPA联合MP能够显着改善大鼠SCI后神经运动功能,其机制可能与抑制局部炎性反应、促进抑制凋亡蛋白Bcl-2的产生和减少凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达有关。
宋凯凯,张锴,贾龙[3]（2021）在《周围神经系统损伤的微环境与修复方式》文中研究说明背景:一直以来周围神经损伤在临床工作中十分常见,虽然显微外科技术能很好地恢复损伤神经的连续性,但是由于周围神经组织存在分化程度较高、再生能力较低的特点,使得神经修复效果仍不理想,严重影响患者的生活质量。目前周围神经损伤微环境尚无统一定论,常用的修复方式众多。目的:对周围神经损伤微环境及周围神经损伤修复方式进行综述。方法:第一作者应用计算机检索1964年1月至2019年9月中国知网、PubMed数据库的相关文章,英文检索词为"peripheral nerve injury,microenvironment,microsurgical technique,small gap bridging",中文检索词为"周围神经损伤修复,微环境,显微外科技术,小间隙套接法",最终选择57篇文献进行综述。结果与结论:①经过一系列动物实验和临床研究,神经再生通道的建立、神经营养因子、免疫反应、炎症反应、激素调节等微环境变化已被证实是影响周围神经修复的重要因素;②生物套管小间隙套接法修复周围神经损伤具备替代临床常用的传统神经外、束膜的可行性。
黄超[4]（2020）在《虾青素联合叶酸促进臂丛神经根性撕脱再植后神经再生及功能恢复》文中进行了进一步梳理背景:臂丛神经的损伤,特别是全臂丛神经的根性撕脱伤（brachial plexus avulsion,BPA）,可引起上肢的完全瘫痪,是上肢最严重的损伤,治疗难度大,预后差。其好发于青壮年,给病人及其家属带来身心和财产上巨大的打击。导致损伤的因素很多,包括穿透伤、跌倒、机动车辆所引起的创伤和新生儿产伤等。尽管很难确定世界范围内每年新增BPA的确切数量,但随着极限运动的普及以及机动车事故幸存者数量的增加,其发病率一直呈现上升趋势。在70%的臂丛神经严重牵拉伤中,会发生神经根的撕脱,使脊髓与周围效应器（肌肉）发生永久性分离,导致脊髓灰质前角运动神经元因营养支配的缺失和周围存在的有害物质发生不可逆的死亡,造成运动功能的丧失。BPA是一种节前神经损伤,治疗上一般采取神经移位术或功能性肌肉移植重建术,但存在疗效欠佳,不可避免的代偿正常神经组织,使得损伤范围扩大,同时存在二次手术的风险等。近年来,撕脱神经的原位回植术,越来越多的被研究者关注,其操作简单,损伤副作用小。我们在前期的工作中,已经对该治疗方式进行了研究,证明了该方法的有效性,但单纯的原位回植,无法使其术后功能恢复达到满意。在BPA的损伤机制中,原发性的外伤暴力会引起损伤部位神经组织损伤、出血、组织水肿,诱导损伤部位发生继发性损伤,包括氧化应激、炎性细胞浸润、血-脊髓屏障（bloodspinal cord barrier,BSCB）损伤等,进一步诱导脊髓前角运动神经元的广泛变性和凋亡,造成神经再生和功能恢复困难。其中氧化应激和炎症反应是继发性损伤中造成神经组织大量破坏的最主要进程。原发性的外伤暴力发出机械冲击后,大量的活性氧（reactive oxygen species,ROS）在损伤部位生成,造成氧化应激反应,导致脂质、蛋白质和DNA受到损伤,神经元细胞也出现大量死亡。同时,BPA后小胶质细胞（microgial cell,MG）活化,产生大量白介素-6（interleukin 6,IL-6）,与周围上调表达的肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）和白细胞介素1β（interleukin-1 beta,IL-1β）等促炎细胞因子一起,募集大量的炎症细胞向损伤部位迁徙,相互作用产生一系列级联反应,在伤后24-72小时达到峰值,使得神经组织水肿程度增加,进一步使运动神经元细胞的存活率降低和运动功能的恢复受到阻碍。BPA后,为提高原位回植的治疗满意度,在撕脱神经早期原位回植的同时,进行有效的抗炎抗氧化治疗干预,可以减轻继发性损伤,有效地促进神经再生及功能恢复,具有十分重要的意义。虾青素（astaxanthin,AST）是一种非维生素A源的类胡萝卜素,具有很强的脂溶性,与类胡萝卜素功能相似,具有一定的抗氧化作用,在淬灭单线态氧和捕获自由基方面具有很强的能力,同时在抑制炎症反应和细胞凋亡方面具有不错的性能。叶酸（folic acid,FC）是人生长发育不可或缺的水溶性B族维生素,在抑制炎症反应方面表现出了很好的作用效果。同时,叶酸在体内会经历一系列反应变为四氢叶酸（tetrahydrofolicAcid,THF）,参与嘌呤、嘧啶和氨基酸的合成和转化,参与神经系统的生长和发育,对神经损伤的修复具有良好的前景。材料和方法:以成年雌性SD大鼠为研究对象,构建大鼠BPA损伤、C6神经根原位回植的动物模型。按照随机分配原则将BPA回植模型大鼠分成4组,每组18只:对照组（Control）、虾青素（AST）治疗组、叶酸（FC）治疗组和虾青素联合叶酸（AST+FC）治疗组。AST组给予AST（75mg/kg）灌胃和生理盐水腹腔注射;FC组给予FC（80ug/kg）生理盐水溶液腹腔注射和橄榄油（1mL/kg）灌胃;AST+FC联合治疗组给予AST（75mg/kg）灌胃和FC（80ug/kg）生理盐水溶液腹腔注射。对照组给予橄榄油（1mL/kg）灌胃和生理盐水腹腔注射。评价疗效方法如下:（1）术后24小时,免疫荧光法测定损伤侧脊髓组织内急性期ROS含量,使用分光光度法测定损伤侧C5-C7脊髓前角组织内急性期IL-6含量;（2）术后第2-6周,每周行1次Terzis理毛行为测试（Terzis grooming test,TGT）,评估大鼠患肢的运动功能;（3）术后第6周,荧光金（fluorescent gold,FG）逆行标记伤侧脊髓前角运动神经元细胞,检测该侧脊髓前角运动神经元细胞数量;（4）术后第6周,免疫荧光法测定伤侧C6节段脊髓前角运动神经元细胞的生存率;（5）术后第6周,苏木精-伊红染色法（hematoxylineosin staining,HE）检测损伤侧肱二头肌肌纤维直径;（6）术后第6周,肌电图（electromyogram,EMG）检测损伤侧肱二头肌和肌皮神经复合动作电位。结果:使用AST和FC进行干预后,结果显示,术后24小时,与对照组对比,AST组较FC组有更好的抗氧化疗效,FC组较AST组有更好的抗炎疗效,两者联合在早期抗炎抗氧化作用中具有协同治疗的作用;术后6周,AST和FC能促进患肢运动功能的恢复,增加肱二头肌肌纤维的直径及肱二头肌和肌皮神经复合动作电位的波幅,同时保留更多功能性运动神经元细胞的数量,提高脊髓前角运动神经元细胞的生存率。结论:（1）虾青素和叶酸都具有良好的抗炎抗氧化作用,早期摄入的虾青素表现出较叶酸更好的抗氧化作用,而叶酸则表现出了更好的抗炎作用,两者的协同作用更好的促进了臂丛神经功能恢复;（2）在BPA损伤回植神经根后,早期的抗炎抗氧化治疗,增加了损伤节段脊髓前角运动神经元的生存率,使其具有更多的功能性神经元,促进了神经功能和运动功能的恢复,为临床医治臂丛神经撕脱伤这类疾病提供了新的治疗方法。
吴番娜[5]（2020）在《大鼠脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF的表达变化及调控研究》文中研究表明研究背景与目的脊髓顿挫伤（Spinal Cord Contusion,SCC）是一种严重的中枢神经系统损伤,大部分情况下因中枢神经系统的低再生能力造成病人的永久性瘫痪,给个人、家庭和社会带来了非常严重的危害。由于神经元内部的机制和细胞外环境障碍的影响,脊髓顿挫伤后神经元及神经元轴突几乎无法进行再生修复。在脊髓顿挫伤的过程中,炎症以及神经元有限的再生能力是影响脊髓顿挫伤修复的重要因素。白细胞介素-10（Interleukin-10,IL-10）是一种重要的抗炎症因子,对于减少SCC后的炎症反应、兴奋毒性损伤和神经细胞凋亡具有十分重要的作用,IL-10作为一种基因治疗的靶点是一种潜在的治疗方法。在脊髓顿挫伤后,睫状神经营养因子（Ciliary neurotrophic factor,CNTF）是一种修复SCC的重要的神经生长因子,能够防止受损神经元的变性和死亡,对受损的神经元尤其是运动神经元起保护作用。但是,在SCC后,抑制IL-10的表达是否会影响CNTF的表达,从而进一步影响SCC运动功能的修复仍然还不清楚。因此,本研究的目的是探究脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF的相互关系以及对大鼠SCC修复的影响。材料与方法第一部分将Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分成脊髓顿挫伤（SCC）组和假手术（Sham）组,采用Allen’s打击法制备脊髓顿挫伤动物模型,用Basso Beattie Bresnahan（BBB）运动量表对大鼠的运动功能进行评价。用实时定量聚合酶链反应技术（Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,qPCR）、免疫荧光技术（Immunofluorescence,IF）和免疫组织化学技术（Immunohistochemistry,IHC）等技术对脊髓中的IL-10和CNTF的基因和蛋白定位表达进行检测。第二部分将SD大鼠随机分成慢病毒抑制（IL-10-RNAi-LV）组和空载（Vector）组,在脊髓顿挫伤48 h前,采用慢病毒介导的基因干扰（RNAi）技术抑制IL-10的表达。利用生物信息学方法GeneMANIA分析预测IL-10和CNTF之间的关系。BBB评分评估IL-10抑制后大鼠的运动功能变化。用qPCR和IHC对IL-10抑制后脊髓中的CNTF的基因和蛋白定位表达进行检测。结果一、IL-10和CNTF的表达变化1.实验动物模型评价:脊髓钝挫伤后,大鼠后肢出现瘫痪,BBB评分为0,此后逐渐升高,到第14天明显恢复,但无法恢复到损伤前的评分,提示造模成功。2.IL-10和CNTF的基因表达:qPCR的结果表明,与假手术组相比,IL-10mRNA在SCC 6 h和12 h显着上调（P<0.05）,在第7 d和14 d显着下调（P<0.05）。另外,脊髓顿挫伤后CNTF及其受体（Ciliary neurotrophic factor receptor,CNTFR）mRNA的表达也显着下调（P<0.05）。3.IL-10和CNTF的蛋白定位表达:免疫组化和免疫荧光的结果提示脊髓钝挫伤后IL-10和CNTF均定位于脊髓灰质前角的神经元细胞胞质。二、IL-10和CNTF的调控机制1.生物信息学的结果:GeneMANIA分析提示IL-10与CNTF具有相互作用的蛋白质分子作用结构域,说明IL-10与CNTF在功能上是相似的。2.抑制IL-10后SCC大鼠运动功能的变化结果:在IL-10抑制组（RNAi-IL-10）,大鼠的BBB评分与空载组（Vector）相比,在第5 d和7 d显着下降（P<0.05）。因此,IL-10抑制后,SCC大鼠的运动功能减弱。3.抑制IL-10后CNTF的基因表达:qPCR的结果提示,与空载组相比,在IL-10抑制后病毒组的CNTF mRNA表达明显上调（P<0.05）。4.抑制IL-10后CNTF的蛋白定位表达:免疫组化的结果提示,IL-10表达抑制后CNTF定位于脊髓前角灰质的神经元胞质中。结论1.在SCC早期IL-10的表达增加,此后,IL-10的表达逐渐降低;同时,脊髓顿挫伤后CNTF、CNTFR的表达也下降,实验结果提示脊髓顿挫伤影响IL-10和CNTF的表达,IL-10和CNTF参与脊髓顿挫伤后大鼠后肢运动功能的恢复。2.慢病毒介导的RNAi技术抑制IL-10表达后,CNTF表达明显上升,实验结果提示IL-10降低导致CNTF的表达增加,CNTF通过偿性增高而影响SCC的修复,为脊髓顿挫伤的基因靶向治疗提供了新的视角。
叶诗洋[6]（2019）在《敲除小胶质细胞VPS35的中枢神经效应以及在缺血性脑损伤中的作用研究》文中研究指明逆运复合物是一种多聚体的蛋白复合物,其主要功能是促进多种跨膜蛋白的细胞内转运过程。空泡蛋白分选相关蛋白35（Vacuolar protein sorting-associated protein 35,VPS35）是逆运复合物中货物识别亚单元中的关键组成部分,与包括阿尔茨海默病在内的神经退行性相关疾病的病理生理变化息息相关。当VPS35发生功能紊乱时（通过耗尽/突变）,逆运复合物的功能活性受损而产生多种病理后果,其中参与神经退行性病变相关级联反应的蛋白分子以及特异的逆运复合物货物蛋白也将受到损害,同时将会影响下游信号分子的传递。VPS35的表达无处不在,在整个中枢神经系统中都能检测到VPS35的表达,其中VPS35在神经元中的作用受到了大量的关注和研究。神经元中的VPS35参与了多种关键细胞过程的调节,如淀粉样前体蛋白（APP）转运和蛋白水解过程的调节、神经递质受体的转运、线粒体融合/分裂动力学,以及神经递质受体的建立和调节等关键细胞过程。但对于小胶质细胞VPS35的功能却尚不十分明确。近年来的研究发现在阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）病人的小胶质细胞中检测到VPS35的表达水平降低。小胶质细胞VPS35缺乏可减少细胞膜上小胶质细胞吞噬受体的表达,损害小胶质细胞的吞噬能力。虽然这些观察结果提示小胶质细胞VPS35参与AD的发病机制,但小胶质细胞的细胞功能究竟是如何受到VPS35缺陷的影响,以及VPS35缺陷的小胶质细胞是如何影响其周围神经组织的,尚不清楚。此外,缺血性脑损伤作为神经退行性疾病的环境致病因素之一,同时也是临床上最为常见的颅脑疾病,约占脑血管疾病发病率的70%,其高死亡率以及高致残率近年来受到了广泛的关注。当发生缺血性脑损伤时,首先血流受阻,阻碍氧气和葡萄糖的输送,形成缺血状态,导致能量损耗、谷氨酸受体过度活化、谷氨酸兴奋性毒性作用以及神经炎症反应,最终导致神经细胞大量死亡。而小胶质细胞是缺血性脑损伤的第一道防线,伴随转录调控和形态学的改变小胶质细胞可在伤后迅速聚集到损伤部位,释放效应分子,参与免疫应答,吞噬已死亡的细胞碎片。我们前期体外实验的结果发现,小胶质细胞系中敲除VPS35,小胶质细胞活化增强而炎症反应加重和白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）表达增加。VPS35功能失调的小胶质细胞在炎症级联反应有何种关系,目前尚不清楚。因此我们试图探讨小胶质细胞VPS35在中枢神经系统功能维持和缺血性脑损伤中发挥何种作用,本研究分为以下两部分进行。第一部分,我们试图探寻小胶质细胞VPS35在中枢神经系统中扮演何种角色。通过RT-PCR技术在E17、P7、P14、P21、P60时间点对VPS35基因表达量的检测中发现,VPS35不仅仅在神经元中表达,同时在小胶质细胞的胞体和细胞突起上广泛表达。VPS35的表达量在小鼠不同年龄阶段各不相同（E17-P60）,在P14天时达到高峰,随后逐渐下降,通过LPS刺激小胶质细胞后VPS35水平明显升高,提示VPS35与LPS刺激的小胶质细胞反应有关。随后我们通过Cre-LoxP基因编辑系统首次培育了VPS35CX3CR1小鼠,一种小胶质细胞上VPS35特异性敲除的基因敲除小鼠模型。经免疫荧光和western blot的检测证实该小鼠模型的原代培养小胶质细胞的VPS35已经成功被清除。VPS35CX3CR1小鼠中的小胶质细胞在AD病最容易受损害的区域-海马和内嗅皮层区域,特别是海马DG（齿状回）和SGZ（颗粒下层）区域密度明显升高,同时我们对该区域的小胶质细胞的形态学进行观察发现,在VPS35CX3CR1小鼠中SGZ区域的小胶质细胞胞体和凸起长度明显增加。小胶质细胞密度和小胶质细胞形态变化往往提示与小胶质细胞活化程度增加有关。此外,多种小胶质细胞活化标志物（IBa-1、CD11b、CD16/32）的荧光染色以及western blot结果表明,小胶质细胞VPS35敲除后与在海马和SGZ区域小胶质细胞活化增加关系密切。为了检测小胶质细胞的增殖,我们使用细胞增殖标记物BrdU（5-Bromo-2-deoxyUridine,5-溴脱氧尿嘧啶核苷）标记,在24h后的脑片染色结果显示敲除组和对照组小胶质细胞增殖情况无显着差异。提示增加的小胶质细胞不是增殖来源。随后我们利用BrdU标记7d后的方法检测小胶质细胞的分化或迁移,结果提示VPS35敲除组BrdU染色标记显着增加。表明增加的小胶质细胞可能来自于分化增加或者迁移。此外BrdU+的细胞明显增加主要集中在VPS35CX3CR1小鼠的SGZ区域,而该区域是成年海马神经发生存在的主要区域,提示有NSC/NPC（neural stem/progenitor cell,神经干细胞/神经前体细胞）增殖和存活率增加。使用Ki67（一种标记分裂期细胞的标记物）与BrdU免疫荧光共定位,结果表明敲除组双阳性的细胞数量显着增加。而BrdU与未成熟神经元标志物DCX免疫荧光共定位结果却相反,敲除组共定位细胞数明显少与对照组。随后,免疫荧光定量分析以及western blot结果显示DCX的表达量显着降低。利用逆转录病毒标记神经元,1月后观察被标记的神经元形态学变化,结果VPS35CX3CR1小鼠的DG区域的神经元树突凸起长度,复杂性和树突棘密度均出现明显减少。以上结果共同提示,小胶质细胞VPS35敲除增加了NSC/NPC的同时减少其向神经元的分化并且阻碍了细胞周期的退出,干扰了成年小鼠海马神经发生,提示在成年小鼠CNS中小胶质细胞VPS35对新生神经元成熟化过程中的调节作用,小胶质细胞VPS35缺陷将导致突触整合前的新生神经元出现神经退行性病变样的形态学变化。为了探索小胶质细胞缺乏VPS35后是如何影响神经元的机制,我们采用原代小胶质细胞与原代神经元细胞共培养技术,观察到缺乏VPS35的小胶质细胞对神经元突触后物质的吞噬作用增强。提示对小胶质细胞出现了对周围神经元的异常修剪。最后,为了探索小鼠神经发生异常是否会影响神经功能,我们通过旷场实验、Y迷宫、强迫游泳、蔗糖偏好等多种行为学实验,证实小胶质细胞VPS35敲除后的小鼠存在长期记忆损害以及类似焦虑的行为学改变。第二部分,由于已经发现小胶质细胞VPS35对小胶质细胞活化产生影响,而小胶质细胞的活化与炎症反应息息相关。因此,我们采用以神经炎症反应为主要病理变化的缺血性脑损伤模型来探索小胶质细胞VPS35的作用。首先,我们使用光血栓脑卒中法（photothrombotic cortical stroke injury）,在受试小鼠的运动皮层区域建立缺血性脑损伤模型。采用TTC（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,2,3,5-氯化三苯基四氮唑）染色、尼氏染色、免疫组化、免疫荧光等技术评估小鼠缺血性脑损伤后损伤部位的大小和神经元细胞死亡数量以及严重程度,结果提示VPS35CX3CR1小鼠在缺血性脑损伤3d后大脑皮层缺血梗死区域明显减小,死亡的神经元数量显着低于对照组。同时利用神经功能评分、步态滑落实验、胶带清除实验来评估损伤后的运动神经功能缺陷,结果表明VPS35敲除组的小鼠的运动功能损害明显较对照组轻微。通过免疫荧光和western blot检测第一阶段DAM（Damage Associated Microglia,损伤相关小胶质细胞）标志物TMEM119、第二阶段DAM标记物LPL在缺血损伤后3d的差异,结果显示在梗死灶周围区域VPS35敲除组中TMEM119阳性小胶质细胞明显增加,而LPL阳性的小胶质细胞显着减少,提示在小胶质VPS35敲除可以干扰两个阶段DAM的产生。使用小胶质细胞活化标志物IBa1、M1型极性标志物iNOS、M2型极性标志物CD206通过免疫荧光、western blot等方法检测损伤后小胶质细胞的活化反应以及小胶质细胞的极性改变,以及趋化因子受体CX3CR1水平的变化,结果显示在损害后3d,VPS35敲除组的小胶质细胞在梗死灶周围区域密度显着增加,形态和分布出现明显差异,M1型促炎反应相关的小胶质细胞比例降低,M2型神经保护效应相关的小胶质细胞比例明显升高。应用RT-PCR技术检测在缺血后6h、1d、3d、7d小鼠的炎症因子和M1型M2型小胶质细胞相关基因Arg1、YM1/2、CD206、CD86、CD32、iNOS的mRNA水平差异,结果显示各时间点VPS35敲除组的小胶质细胞均偏向M2的极性活化,与之前的免疫荧光和western blot结果一致。通过免疫荧光和western blot检测趋化因子的特异性受体-CX3CR1表达变化,结果显示在VPS35敲除组的梗死灶周围区域CX3CR1表达降低,与先前报道的CX3CR1功能缺失后减轻缺血损伤反应一致。综上所述,我们的研究首次揭示了VPS35对维持小胶质细胞内环境稳态至关重要。在CNS中当小胶质细胞VPS35功能受到破坏时,产生的影响不仅是小胶质细胞本身,并且通过干扰其周围的神经干细胞和神经前体细胞的分化和增殖来影响关键的神经发生过程。另外,在皮层缺血性脑损伤模型中我们首次发现了小胶质VPS35的缺失可以起到一种保护作用。该保护作用可能主要是影响了小胶质细胞的活化极性,减轻神经炎症反应发挥神经保护作用。同时初步揭示在缺血性脑损伤反应中CX3CR1可能是小胶质VPS35的潜在货物蛋白,但仍然需要进一步研究来验证。我们的发现为探寻逆运复合物疾病相关货物蛋白以及介质在以小胶质细胞活化为主的神经系统疾病中的作用和作为调控治疗靶点提供了重要的实验证据。
任周梁[7]（2019）在《Gal-3在大鼠急性脊髓损伤炎症反应中的作用及调控机制研究》文中认为目的:阐明半乳糖凝集素3（Gal-3）在大鼠急性脊髓损伤（SCI）炎症反应中的作用及调控机制。方法:第一部分:Gal-3在大鼠急性脊髓损伤模型中的表达及作用研究（体内实验）;（1）12只雄性SD大鼠随机分为对照组和SCI组（每组n=6）。Allen’s法打击脊髓造模,术后24h对大鼠进行眼眶静脉采血。分别于24h、48h和72h对各组大鼠进行BBB评分,然后被处死取损伤处脊髓组织进行含水量测定和苏木精-伊红（HE）染色,采用取血样进行酶联免疫吸附实验（ELISA）,检测p65、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA、SOD、CAT以及GSH-PX的表达水平。使用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）测定Gal-3 mRNA的表达。（2）18只雄性SD大鼠随机分为对照组,SCI组和SCI+GB1107组（每组n=6）,重复上述实验过程。第二部分:Gal-3促进大鼠急性脊髓损伤炎症反应的可能机制研究（体内实验）;（1）12只雄性SD大鼠随机分为对照组和SCI组（每组n=6）,术后24h处死大鼠、脊髓组织取样用于基因芯片技术,筛选Gal-3在SCI模型中的调控靶点。（2）12只雄性SD大鼠建立脊髓损伤模型,随机分为阴性对照组和Gal-3干预组（每组n=6）,蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测Gal-3、TXNIP和NLRP3蛋白的表达。（3）18只雄性SD大鼠随机分为对照组、SCI组和SCI+GB1107组,Western blot检测Gal-3、TXNIP和NLRP3蛋白的表达。第三部分:Gal-3通过ROS/TXNIP/NLRP3信号通路促进脊髓损伤后神经炎症反应的研究（体外实验）;（1）LPS诱导PC12细胞构建体外神经炎症模型,48h后收集PC12细胞,随机分为对照组、LPS组和LPS+si-Gal-3组,使用Western blot法检测Gal-3、硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）和NOD样受体家族蛋白3（NLRP3）的表达,ELISA法检测细胞中ROS、MDA、SOD、CAT、GSH-PX以及IL-1β的水平,免疫荧光染色显示Gal-3的表达。（2）确定活性氧自由基（ROS）抑制剂调控Gal-3对氧化应激的作用,随机分为对照组、LPS组、LPS+si-Gal-3转染组和LPS+si-Gal-3+H2O2组,LPS+ROS抑制剂以及LPS+ROS抑制剂+Gal-3组,ELISA法检测各组细胞中ROS、MDA、SOD、CAT、GSH-PX以及IL-1β的表达水平,Western blot检测TXNIP和NLRP3蛋白的表达。（3）明确TXNIP/NLRP3在Gal-3促神经炎症中的作用:将PC12细胞随机分为6组,分别为对照组、LPS组、LPS+si-TXNIP组、LPS+si-TXNIP+Gal-3组、LPS+si-NLRP3组以及LPS+si-NLRP3+Gal-3组,ELISA法检测各组IL-β的表达水平,Western blot分别检测TXNIP和NLRP3蛋白的表达。结果:第一部分（1）SCI组各时间点的BBB评分明显低于对照组（P<0.05）,SCI+GB1107组各时间点的BBB评分明显高于SCI组（P<0.05）;（2）SCI组组织含水量明显高于对照组,SCI+GB1107组明显高于SCI组（P<0.05）;（3）对照组脊髓组织完整,细胞形态正常,胞核和胞质染色清晰,而SCI组打击部位出现组织坏死、细胞变性、水肿、结构紊乱,伴有不同程度的出血及中性粒细胞浸润为主要表现,SCI+GB1107组脊髓损伤情况明显缓解,组织坏死、细胞变性、水肿、出血及等情况均有改善;（4）与对照组相比,SCI组大鼠血清p65、TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平明显增加,SOD,CAT、GSH-PX活性明显降低;与SCI组相比,SCI+GB1107组大鼠血清p65、TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平明显降低,SOD,CAT、GSH-PX活性明显增加（P<0.05）;（5）与对照组相比,SCI组大鼠脊髓组织中Gal-3 mRNA表达水平明显增加;与SCI组相比,SCI+GB1107组大鼠脊髓组织中Gal-3 mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。第二部分:（1）与对照组相比,SCI组中差异最大的有8个基因上调,7个基因下调;GO分析生物学过程共涉及8种。PPI分析差异表达基因总共23个节点,共有七种配对关系,信号通路主要集中在NLRP3和TXNIP蛋白。（2）与对照组相比,Gal-3干预组Gal-3、TXNIP以及NLPR3蛋白明显高于阴性对照组;与SCI组相比,SCI+GB1107组中Gal-3、TXNIP以及NLPR3蛋白表达明显降低（P<0.05）。第三部分:（1）与LPS组相比,LPS+si-Gal-3转染组IL-1β、MDA、ROS表达水平明显降低,SOD、CAT以及GSH-PX的水平明显升高（P<0.05）;（2）LPS+ROS抑制剂+Gal-3组表达水平明显高于LPS+ROS抑制剂组（P<0.05）;（3）Gal-3的过表达诱导TXNIP/NLRP3蛋白表达,并增加IL-1β水平。结论:体内SCI模型中,Gal-3表达上调,抑制Gal-3表达可减弱脊髓损伤后神经炎症反应。体外诱导PC12模型中,抑制Gal-3的表达可减弱损伤后神经炎症和ROS的产生;ROS可调控Gal-3对氧化应激的作用。总之,Gal-3通过激活ROS/TXNIP/NLRP3信号通路促进SCI后的神经炎症反应;Gal-3可能是SCI的一种潜在治疗策略。
任登鹏[8]（2018）在《干细胞活性因子保护大鼠损伤神经干细胞及改善神经功能的研究》文中研究说明目的:研究骨髓间充质干细胞（BMSCs）源性的干细胞活性生长因子对体外培养的神经干细胞增殖、分化及低氧耐受的影响,以及对大鼠脑创伤模型的体内损伤修复效果,为未来脑创伤神经功能恢复提供理论指导和实验依据。方法:（1）原代分离培养SD大鼠BMSCs,流式细胞术测定特异性的表面标志蛋白的表达。（2）酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测培养48 h的BMSCs条件培养液中BDNF、IGF-1、VEGF和NGF的蛋白质水平,了解BMSCs条件培养液中的主要干细胞活性因子的表达水平。（3）原代分离培养大鼠的神经干细胞（NSCs）,将其培养于含间充质干细胞活性因子的培养环境中,观察细胞克隆球的生长情况,以及其向神经元和神经胶质细胞分化潜能;建立氧糖剥夺模型,检测上清液中的乳酸脱氢酶（LDH）含量,观察干细胞活性因子对低氧应激环境下的NSCs的保护作用。（4）制作冲击性脑损伤大鼠模型,给予干细胞活性因子治疗,观察脑损伤大鼠术后一般情况,水迷宫实验检测实验动物的神经功能恢复情况。（5）行HE染色进行大体病理组织学观察;干/湿重法检测脑水肿程度。（6）荧光定量PCR方法检测实验大鼠脑组织中目标基因IL-1β、Gap43、Jun、和TNF的表达;免疫组织荧光方法检测目标蛋白BrdU+NeuN、BrdU+GFAP的表达;Western Blot方法检测目的蛋白NF-κBp65在脑组织中的表达情况。结果:（1）流式细胞术检测结果显示,本实验所培养的第四代骨髓源性的细胞表达间充质干细胞的标记蛋白CD90和CD105的阳性表达率均高于95%;同时表达造血干细胞标记物CD34的阳性表达率和成熟造血细胞的标志蛋白CD45的阳性表达率均低于5%。证实所培养的细胞为高纯度的BMSCs,符合实验要求。（2）酶联免疫吸附测定实验结果显示,第4代至第14代BMSCs表达VEGF水平始终维持在400 pg/ml浓度以上,IGF-1的水平一直维持在100pg/ml-150 pg/ml浓度之间,NGF维持在380 pg/ml-430 pg/ml浓度之间,BDNF的水平维持在310 pg/ml-330 pg/ml浓度之间。（3）原代分离培养的大鼠神经干细胞（NSCs）培养于含BMSCs细胞活性因子的培养环境中,细胞克隆球较单纯NSCs培养基培养具有更快的生长速度;并且BMSCs细胞活性因子能够诱导NSCs更容易向神经元分化;氧糖剥夺模型实验结果显示,BMSCs细胞活性因子能够增强NSCs对低氧应激的耐受能力。（4）冲击性脑损伤大鼠模型结果显示,假手术组实验大鼠在麻醉清醒后精神状态迅速好转,大鼠体重较术前无明显变化;脑损伤模型（TBI）组实验动物能够出现明显偏瘫,主要表现为创伤对侧肢体不活动或活动明显减少,体重于手术初期下降明显,后稍有回升;TBI+干细胞活性因子治疗组实验动物亦出现明显偏瘫现象,体重于手术初期亦下降明显,但在5天之后回升较快,最终体重优于TBI组。水迷宫实验检测结果显示干细胞活性因子治疗组实验动物具有更佳的神经功能恢复能力。（5）HE染色实验结果显示,假手术组脑组织完整,结构正常,细胞形态符合正常大鼠脑组织组织与解剖结构特点;TBI组创伤侧大鼠脑组织可见明显创伤灶,脑组织结构紊乱;活性因子治疗组创伤侧大鼠脑组织同样可见细胞排列较TBI组相对更为规整。干/湿重法检测结果显示TBI组脑组织水肿程度最高,活性因子治疗组的脑水肿程度明显低于TBI组。（6）荧光定量PCR方法检测结果显示,TBI组实验大鼠脑组织中IL-1β、Jun和TNF的表达水平明显高于假手术组,干细胞活性因子治疗能降低TBI后上述因子的mRNA表达水平;实验大鼠脑组织中GAP43的表达水平于TBI后第3天时处于较低水平,随后逐渐升高,干细胞活性因子治疗后能增加GAP43的表达水平;免疫组织荧光方法检测结果显示,脑创伤大鼠创伤侧海马BrdU、NeuN和GFAP的表达水平均明显高于假手术组,活性因子治疗组则可进一步提高BrdU/NeuN的蛋白质表达水平;Western Blot方法检测结果显示NF-κBp65在TBI组实验大鼠脑组织中的蛋白表达水平明显高于假手术组,活性因子治疗组则可降低该蛋白的表达水平。结论:（1）培养第4代至第14代的BMSCs始终维持表达较高水平的VEGF、IGF-1、NGF和BDNF,对周围细胞具有持续的细胞营养作用。（2）BMSCs细胞活性因子能够促进NSCs克隆球的增殖,诱导NSCs更容易向神经元分化,此外BMSCs细胞营养因子能够增强NSCs对低氧应激的耐受能力。（3）BMSCs细胞活性因子能够促进内源性的NSCs动员,并诱导NSCs易于向神经元分化。（4）BMSCs细胞活性因子能够帮助脑创伤大鼠增进学习和记忆功能的恢复,改善运动能力,降低炎症水平,抑制细胞凋亡。
徐春归,张积森,许新忠,荆珏华[9]（2017）在《改良兔防御素1对周围神经损伤修复后神经再生的作用》文中指出背景:周围神经损伤是临床常见的一类疾病,严重影响患者的生活质量。如何促进周围神经损伤后神经的再生修复是临床重要的课题。目的:探讨改良兔防御素1对周围神经损伤修复后神经再生的作用及功能恢复的影响。方法:18只SD大鼠随机分为3组:神经生长因子神经营养因子组、改良兔防御素1组以及生理盐水对照组。将所有大鼠坐骨神经离断后使用可降解甲壳质生物套管套接修复神经断端,术后连续7 d以神经营养因子、改良兔防御素1以及生理盐水注射到臀肌中。结果与结论:术后6周,神经营养因子组和改良兔防御素1组大鼠的坐骨神经指数较生理盐水组高,但3组大鼠的运动神经传导速度:神经营养因子组>兔防御素1组>生理盐水组,且改良兔防御素1组大鼠的再生神经纤维直径、轴突直径和髓鞘厚度较神经营养因子组大鼠小,但相对于生理盐水组大。提示改良兔防御素1对于周围神经损伤后神经再生具有促进作用。改良兔防御素1促进神经再生的作用机制可能与巨噬细胞清理髓鞘残留、改善神经再生环境有关。
王天仪[10]（2015）在《坐骨神经预损伤后miR-124-3p调节GAP-43表达并促进轴突生长的实验研究》文中指出目的本研究通过观察脊髓后索损伤后大鼠背根神经节中microRNA表达水平的变化,探讨坐骨神经预损伤对脊髓后索损伤大鼠背根神经节microRNA表达的影响,以揭示坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤修复的机制并寻找关键microRNA,同时在细胞水平调控其表达,观察该关键microRNA对背根神经节神经元产生的影响,以期进一步找到坐骨神经预损伤的替代疗法。方法1.应用microarray 3.0芯片检测脊髓后索损伤及用坐骨神经预损伤干预后索损伤过程中发生改变的microRNA,运用生物信息学方法分析发挥调控作用的关键microRNA。2.在m RNA水平上验证目标microRNA的功能:应用查询Target Scan数据库、miRBase数据库及查阅文献的方法预测目标microRNA的靶基因,进而运用RT-q PCR技术检测坐骨神经预损伤组在各个时间点该靶基因m RNA的表达。3.在蛋白水平上验证目标microRNA的功能:本实验应用Western blot技术检测了坐骨神经预损伤组,单纯脊髓后索损伤组靶蛋白的表达量。检测坐骨神经预损伤组靶蛋白表达趋势与目标microRNA的表达趋势。4.运用免疫组化、HE染色的方法观察坐骨神经预损伤后后索损伤白质的组织形态结构、NF200、IL-1、GFAP及背根神经节中NF200指标的变化。5.运用反义microRNA寡核苷酸抑制剂在体外培养的背根神经节神经元中抑制目标microRNA,并用免疫细胞化学技术观察与空白背根神经节神经元相比其靶蛋白表达和轴突生长情况。6.在抑制目标microRNA的同时抑制其靶蛋白的活化,用于判断是否存在目标microRNA的其它靶基因能促进轴突生长。7.应用SPSS 18.0软件对所得数据进行分析。计量资料以均数±标准差（（?）±s）表示。组间比较采用方差分析（ANOVA）和SNK检验。两样本比较采用student t检验。P<0.05为有统计学意义。结果1.脊髓后索损伤及用坐骨神经预损伤干预后,共有681个microRNA在损伤后4小时、3天、7天、14天发生至少1次表达变化。全部发生变化的microRNA中miR-124-3p在单纯脊髓后索损伤后第7天、14天分别上调了5.12倍与4.17倍。这两个上升倍数在其各自所属时间点所有上调的microRNA中均位于第5位。而在坐骨神经预损伤干预组,脊髓后索损伤后第7天、14天miR-124-3p下调,分别为-3.55倍和-6.18倍,这使miR-124-3p初步纳入研究者视线。后经过RNA质检、RT-q PCR生物学与技术重复、PCA检验,芯片数据可靠（一级验证）。2.miR-124-3p在坐骨神经预损伤组的表达情况是由坐骨神经预损伤和脊髓后索损伤两个条件共同存在来实现的,单独损伤脊髓后索或单独损伤坐骨神经该microRNA无类似表达改变出现。3.生物信息学分析说明miR-124-3p在单纯脊髓后索损伤后的第7天、14天上调并执行了相似聚类的分子生物学功能,在经过坐骨神经预损伤干预后,在脊髓后索损伤后的第7天、14天下调,执行了与单纯脊髓后索损伤组不同聚类的生物学功能。4.坐骨神经预损伤使脊髓后索损伤局部及背根神经节中NF200表达增加,损伤局部神经纤维形态更加规整。而坐骨神经预损伤的存在与否对脊髓组织样本中IL-1及GFAP指标无明显影响。5.抑制miR-124-3p表达后,背根神经节神经细胞中GAP-43表达上调,轴突延长。6.应用Target Scan数据库查询及文献查阅预测miR-124-3p的靶基因为STAT3。7.miR-124-3p对STAT3蛋白表达的调控是翻译抑制。坐骨神经预损伤后背根神经节组织中STAT3及p-STAT3蛋白在后索损伤后7天和14天表达上调。单纯脊髓后索损伤后7天和14天背根神经节组织中STAT3及p-STAT3蛋白表达下调,miR-124-3p与STAT3及p-STAT3的表达趋势相反（二级验证）。8.背根神经节神经元中抑制miR-124-3p后STAT3上调免疫荧光变强、轴突增长,STAT3,p-STAT3及GAP-43上调（三级验证）。9.STAT3蛋白是miR-124-3p/STAT3/GAP-43通路不可或缺的组成部分。结论1.脊髓后索损伤及用坐骨神经预损伤干预后,共有681个microRNA在后索损伤后4小时、3天、7天和14天发生至少1次表达变化。2.miR-124-3p在单纯脊髓后索损伤后第7天、14天明显上调,而在坐骨神经预损伤干预后7天、14天表达趋势变为明显下调。3.miR-124-3p的效用靶基因是STAT3,其对STAT3蛋白表达的调控是翻译抑制。4.miR-124-3p在坐骨神经预损伤组的表达情况是由坐骨神经预损伤和脊髓后索损伤两个条件共同存在来实现的,单独损伤脊髓后索或单独损伤坐骨神经该microRNA无类似表达改变出现。5.坐骨神经预损伤使miR-124-3p在7天、14天表达下调导致背根神经节神经元中STAT3上调,通过GAP-43使背根神经节神经元轴突延长。6.miR-124-3p是坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤修复的关键microRNA之一,miR-124-3p/STAT3/GAP-43通路是坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤修复的关键通路之一。
二、白细胞介素-1β对周围神经损伤后运动神经元的保护作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、白细胞介素-1β对周围神经损伤后运动神经元的保护作用（论文提纲范文）
（1）Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用参与脊髓损伤后的神经修复（论文提纲范文）
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 文献的筛选标准 |
| 1.3 资料提取与文献质量评价 |
| 2 结果Results |
| 2.1 Nrf2-ARE的分子基础及调控机制 |
| 2.1.1 Nrf2-ARE的分子基础 |
| 2.1.2 Nrf2-ARE的调控机制 |
| 2.2 神经-血管的交互作用 |
| 2.2.1 神经元-星形胶质细胞 |
| 2.2.2 内皮细胞-神经元 |
| 2.2.3 星形胶质细胞-内皮细胞 |
| 2.3 Nrf2-ARE对神经血管的作用 |
| 2.3.1 Nrf2-神经元 |
| 2.3.2 Nrf2-星形胶质细胞 |
| 2.3.3 Nrf2-内皮细胞 |
| 2.4 Nrf2-ARE的神经血管保护机制 |
| 3 结语与展望Conclusions and prospects |
（2）丙戊酸钠联合甲强龙对大鼠脊髓损伤影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 多种方法提高骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）周围神经系统损伤的微环境与修复方式（论文提纲范文）
| 文题释义： |
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 资料筛选 |
| 1.2.1 纳入标准 |
| 1.2.2 排除标准 |
| 1.3 资料的获取及文献质量评价 |
| 2 结果Results |
| 2.1 微环境 |
| 2.1.1 神经再生通道的建立 |
| 2.1.2 神经营养因子调节 |
| 2.1.3 免疫反应 |
| 2.1.4 炎症反应 |
| 2.1.5 激素调节 |
| 2.2 显微外科技术 |
| 2.2.1 传统的神经束膜、外膜、神经束+外膜缝合术 |
| 2.2.2 神经移植 |
| 2.2.3 自体生物材料小间隙套接法 |
| 2.2.4合成导管小间隙套接法 |
| 3 总结Conclusions |
（4）虾青素联合叶酸促进臂丛神经根性撕脱再植后神经再生及功能恢复（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一篇 实验研究 |
| 第一章 背景介绍 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 所用动物及具体分组 |
| 2.3 BPA动物模型制备 |
| 2.4 免疫荧光法测定损伤侧脊髓组织内急性期ROS含量 |
| 2.5 分光光度法测定损伤侧脊髓组织内急性期IL-6 相对含量 |
| 2.6 行为学测试 |
| 2.7 免疫荧光法测定损伤侧C6节段脊髓前角运动神经元存活率 |
| 2.8 肌皮神经荧光金(FG)逆行标记法检测损伤侧脊髓前角运动神经元数量 |
| 2.9 损伤侧肱二头肌肌纤维苏木精-伊红染色 |
| 2.10 损伤侧肱二头肌和肌皮神经复合动作电位检测 |
| 2.11 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 AST和 FC能有效降低大鼠BPA后急性期脊髓组织内氧化应激和炎症反应 |
| 3.2 AST和 FC促进BPA后大鼠患侧前肢肱二头肌运动功能恢复 |
| 3.3 AST和 FC显着增加了损伤侧脊髓前角运动神经元的存活率 |
| 3.4 AST和 FC显着增加了损伤侧FG标记的功能性运动神经元的数量 |
| 3.5 AST和 FC治疗可促进损伤侧肱二头肌肌纤维的生长 |
| 3.6 AST和 FC可增加BPA后大鼠患侧肌皮神经-肱二头肌复合运动电位的波幅 |
| 第四章 实验讨论 |
| 第五章 实验总结 |
| 第二篇 文献综述 |
| 第一章 臂丛神经损伤的治疗进展和研究 |
| 第二章 虾青素在神经损伤中的保护作用 |
| 第三章 叶酸在神经系统中的保护作用 |
| 参考文献 |
| 作者简介及攻读学位期间科研成果 |
| 致谢 |
（5）大鼠脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF的表达变化及调控研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 大鼠脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF的表达变化 |
| 1 引言 |
| 2 设备与试剂 |
| 2.1 主要设备 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 试剂配制 |
| 3 材料和方法 |
| 3.1 实验动物与分组 |
| 3.2 Allen's法制备大鼠脊髓顿挫伤模型 |
| 3.3 BBB评分评价大鼠后肢运动功能 |
| 3.4 制作石蜡切片 |
| 3.5 制作冰冻切片 |
| 3.6 免疫组化 |
| 3.7 免疫荧光 |
| 3.8 qRT-PCR |
| 3.9 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 脊髓顿挫伤后大鼠运动功能(BBB)评分结果 |
| 4.2 脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF基因的表达 |
| 4.3 脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF蛋白的定位表达 |
| 5 讨论 |
| 5.1 IL-10在SCC后的表达变化及意义 |
| 5.2 CNTF在SCC后的表达变化及意义 |
| 6 结论 |
| 第二部分 大鼠脊髓顿挫伤后慢病毒介导的IL-10抑制后CNTF的表达 |
| 1 引言 |
| 2 设备与试剂 |
| 2.1 主要设备 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 试剂配制 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 生物信息学预测 |
| 3.2 实验动物与分组 |
| 3.3 慢病毒转染 |
| 3.4 大鼠脊髓顿挫伤模型制备 |
| 3.5 qRT-PCR |
| 3.6 免疫组化 |
| 3.7 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 生物信息学分析结果 |
| 4.2 慢病毒介导IL-10抑制后对大鼠运动功能(BBB)的影响 |
| 4.3 慢病毒介导IL-10抑制后CNTF的表达 |
| 5 讨论 |
| 5.1 慢病毒抑制IL-10后,IL-10与CNTF的相互关系 |
| 5.2 慢病毒抑制IL-10后,CNTF的表达特点 |
| 5.3 IL-10-RNAi后,IL-10对SCC大鼠运动功能的影响 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（6）敲除小胶质细胞VPS35的中枢神经效应以及在缺血性脑损伤中的作用研究（论文提纲范文）
| 文缩写一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 小胶质细胞VPS35 敲除在中枢神经系统中的作用 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 小胶质细胞VPS35 敲除在缺血性脑损伤中的作用 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 小胶质细胞在神经炎症以及神经发生中作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
（7）Gal-3在大鼠急性脊髓损伤炎症反应中的作用及调控机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 Gal-3 在大鼠急性脊髓损伤模型中的表达及作用研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 1.5 技术路线图 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 Gal-3 促进大鼠急性脊髓损伤炎症反应的可能机制研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 技术路线图 |
| 1.4 质量控制 |
| 1.5 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 Gal-3 通过ROS/TXNIP/NLRP3 通路促进脊髓损伤后神经炎症反应 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 1.5 技术路线图 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（8）干细胞活性因子保护大鼠损伤神经干细胞及改善神经功能的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、干细胞活性因子改善大鼠受损神经干细胞 |
| 1.1 对象与方法 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 方法 |
| 1.1.2.1 大鼠BMSCs的原代分离、培养、传代及保存 |
| 1.1.2.2 流式细胞术鉴定BMSCs细胞膜标记蛋白的表达情况 |
| 1.1.2.3 双抗体夹心法酶联免疫吸附实验（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA）测定BMSCs培养基中BDNF、IGF-1、VEGF和NGF细胞活性因子的水平 |
| 1.1.2.4 大鼠NSCs的原代分离、培养与传代 |
| 1.1.2.5 BMSCs细胞活性因子对大鼠NSCs增殖的影响 |
| 1.1.2.6 BMSCs细胞活性因子对大鼠NSCs分化的影响 |
| 1.1.2.7 BMSCs细胞活性因子对大鼠NSCs乏氧耐受能力的影响 |
| 1.1.2.8 活性因子对细胞损伤模型中大鼠NSCs耐受能力的影响 |
| 1.1.2.9 统计学方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 大鼠BMSCs初期克隆形成、细胞形态及传代特点 |
| 1.2.2 大鼠BMSCs细胞膜表面标记蛋白的表达特点 |
| 1.2.3 大鼠BMSCs培养基中BDNF、IGF-1、VEGF和NGF细胞活性因子的表达水平 |
| 1.2.4 BMSCs细胞活性因子对大鼠NSCs增殖的影响 |
| 1.2.5 BMSCs细胞活性因子对大鼠NSCs分化的影响 |
| 1.2.6 BMSCs细胞活性因子对大鼠NSCs乏氧耐受能力及牵张损伤耐受力的影响 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 脑创伤救治的国内外研究现状 |
| 1.3.2 脑创伤靶向治疗药物的研发现状 |
| 1.3.3 干细胞治疗脑创伤的研究进展 |
| 1.3.4 本研究的主要发现与分析 |
| 1.4 小结 |
| 二、BMSCs源性细胞活性因子改善TBI大鼠神经功能的体内实验研究 |
| 2.1 对象与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 |
| 2.1.3 SD实验大鼠的购置与日常饲养 |
| 2.1.4 脑损伤大鼠模型的制作与实验分组 |
| 2.1.5 脑损伤大鼠模型术后观察及行为学检测 |
| 2.1.6 脑损伤大鼠模型术后解剖及组织病理学检查 |
| 2.1.6.1 组织解剖及一般组织观察 |
| 2.1.6.2 干/湿重法检测脑水肿程度 |
| 2.1.6.3 mRNA提取及荧光定量PCR检测组织中目标基因的表达 |
| 2.1.6.4 免疫组织荧光方法检测目标蛋白的表达 |
| 2.1.6.5 Western Blot方法检测目的蛋白在脑组织中的表达情况 |
| 2.1.7 统计学方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 实验动物一般状况观察 |
| 2.2.2 实验动物活体实验结果 |
| 2.2.2.1 水迷宫训练结果 |
| 2.2.2.2 Morris水迷宫定位航行实验结果 |
| 2.2.3 实验动物离体实验结果 |
| 2.2.3.1 HE染色实验结果分析 |
| 2.2.3.2 实验大鼠脑水肿检测结果 |
| 2.2.3.3 荧光定量PCR检测目标基因在脑组织中的mRNA表达结果 |
| 2.2.3.4 免疫组织荧光方法检测目标蛋白在脑组织中的表达结果 |
| 2.2.3.5 Western Blot方法检测目的蛋白在脑组织中的表达结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 细胞组织工程与TBI治疗概述 |
| 2.3.2 内源性修复对神经损伤的反应及其媒介因子 |
| 2.3.3 细胞因子通过调节损伤微环境影响神经干细胞行为 |
| 2.3.4 生物活性因子调节内源性神经干细胞活性 |
| 2.3.5 本研究的主要发现与分析 |
| 2.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 干细胞治疗中枢神经损伤的可行性和潜在价值 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）改良兔防御素1对周围神经损伤修复后神经再生的作用（论文提纲范文）
| 文章快速阅读: |
| 文题释义: |
| 0引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.4 方法 |
| 1.4.1 实验动物分组 |
| 1.4.2 坐骨神经损伤模型的建立 |
| 1.4.3 防御素干预 |
| 1.4.4 坐骨神经功能评价 |
| 1.4.5 神经电生理测试 |
| 1.4.6 有髓神经纤维形态观察 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 实验动物数量分析 |
| 2.2 坐骨神经指数 |
| 2.3 神经传导速度 |
| 2.4 有髓神经纤维数量及形态 |
| 3 讨论Discussion |
（10）坐骨神经预损伤后miR-124-3p调节GAP-43表达并促进轴突生长的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、坐骨神经预损伤后脊髓后索损伤大鼠的miRNA表达谱分析 |
| 1.1 实验分组及各组大鼠背根神经节的miRNA表达谱分析 |
| 1.1.1 对象和方法 |
| 1.1.2 结果 |
| 1.2 microarray结果验证及miR-124-3p表达模式分析 |
| 1.2.1 对象与方法 |
| 1.2.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 二、坐骨神经预损伤及miR-124-3p对初级感觉神经元轴突生长的影响 |
| 2.1 SNCL对初级感觉神经元轴突生长的影响 |
| 2.1.1 对象和方法 |
| 2.1.2 结果 |
| 2.2 miR-124-3p对初级感觉神经元轴突生长的影响 |
| 2.2.1 对象和方法 |
| 2.2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、DRG神经元中miR-124-3p/STAT3/GAP-43 信号通路的组成及作用 |
| 3.1 DRG神经元中miR-124-3p与 STAT3、GAP-43 及轴突生长的关系 |
| 3.1.1 对象和方法 |
| 3.1.2 结果 |
| 3.2 STAT3是miR-124-3p/STAT3/GAP-43 通路的关键组成部分 |
| 3.2.1 对象和方法 |
| 3.2.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 附录 |
| 综述 JAK-STAT通路在脊髓损伤后的神经干细胞、神经祖细胞和活化的星形胶质细胞中的作用 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
四、白细胞介素-1β对周围神经损伤后运动神经元的保护作用（论文参考文献）
- [1]Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用参与脊髓损伤后的神经修复[J]. 谭荣镑,魏波,李广盛. 中国组织工程研究, 2021(35)
- [2]丙戊酸钠联合甲强龙对大鼠脊髓损伤影响的实验研究[D]. 孙建威. 河北北方学院, 2021(01)
- [3]周围神经系统损伤的微环境与修复方式[J]. 宋凯凯,张锴,贾龙. 中国组织工程研究, 2021(04)
- [4]虾青素联合叶酸促进臂丛神经根性撕脱再植后神经再生及功能恢复[D]. 黄超. 吉林大学, 2020(08)
- [5]大鼠脊髓顿挫伤后IL-10和CNTF的表达变化及调控研究[D]. 吴番娜. 成都医学院, 2020(08)
- [6]敲除小胶质细胞VPS35的中枢神经效应以及在缺血性脑损伤中的作用研究[D]. 叶诗洋. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [7]Gal-3在大鼠急性脊髓损伤炎症反应中的作用及调控机制研究[D]. 任周梁. 新疆医科大学, 2019(07)
- [8]干细胞活性因子保护大鼠损伤神经干细胞及改善神经功能的研究[D]. 任登鹏. 天津医科大学, 2018(12)
- [9]改良兔防御素1对周围神经损伤修复后神经再生的作用[J]. 徐春归,张积森,许新忠,荆珏华. 中国组织工程研究, 2017(24)
- [10]坐骨神经预损伤后miR-124-3p调节GAP-43表达并促进轴突生长的实验研究[D]. 王天仪. 天津医科大学, 2015(05)