一、促性腺激素释放激素拟似剂对青春期大鼠生长轴与性腺轴相关基因表达的影响（论文文献综述）
黄艳霞[1]（2021）在《九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究》文中研究说明目的:应用N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA）构建SD雌性大鼠中枢性性早熟（CPP）模型,观察九味楮实颗粒对CPP大鼠体质量、垂体分泌的卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）水平及下丘脑GnRHmRNA及KISS-1表达水平的影响,探讨该方治疗性早熟作用机制,并为进一步申请院内制剂奠定基础.方法:选用SD清洁级未孕成年大鼠,2雌1雄一合笼喂养,交配成功后选出5d内出生的雌仔鼠,点数,分为6笼,每笼8只,由亲母喂养,22日龄断奶,并与母鼠分笼,适应性喂养4天后,选用SPF级体质量在（46.49±8.00）g的26日龄SD雌鼠48只,完全随机分为6组:对照组、性早熟模型组、注射用戈那瑞林组、九味楮实颗粒高剂量组、九味楮实颗粒中剂量组、九味楮实颗粒低剂量组,每组8只,除对照组外,其余五组均采用NMA方法建立中枢性性早熟动物模型,对照组及模型组给予生理盐水1.0 mL/只灌胃,九味楮实颗粒高、中、低剂量组分别予69.48、34.74、17.37 g/kg灌胃,西药组予注射用戈那瑞林100μg/kg肌肉注射,每间隔2d测一次体质量,分别用ELISA（酶联免疫吸附测定法）检测血清FSH、LH、E2水平,用实时荧光定量PCR的方法检测各组大鼠下丘脑KISS-1、GnRHmRNA表达水平。结果:1.阴门开启时间比较:与对照组比较,模型组阴门开启时间明显提前,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,中药组及西药组阴门开启时间均延迟,差异有统计学意义（P<0.05）;2.体质量的变化:与对照组比较,各组在生后26d、29d、32d体质量差异无统计学意义（P>0.05）;出生后35d、38d,对照组及模型组的体质量明显高于中药高剂量组,差异有统计学意义（P<0.05）;3.脏器系数:与对照组比较,模型组子宫系数差异具有统计学意义（P<0.05）;西药组、中药中剂量组子宫系数均大于模型组,差异具有统计学意义（P<0.05）;各组间下丘脑系数、卵巢系数及乳腺系数差异均无统计学意义（P>0.05）;4.性激素水平:与模型组比较,对照组、西药组、九味楮实颗粒高、中剂量组LH、FSH、E2水平比较差异均有统计学意义（P<0.05）,说明九味楮实颗粒可降低CPP大鼠血清LH、FSH、E2的水平;九味楮实颗粒低剂量组与高、中剂量组血清LH、FSH、E2水平比较差异有统计学意义（P<0.05）,说明九味楮实颗调节CPP大鼠性激素LH、FSH、E2水平存在量效关系;5.子宫壁内膜厚度及卵巢黄体数:模型组子宫内膜厚度为（444.17±62.75）μm,较模型组（229.39±90.56）μm显着增加（P<0.05）,中药高、中剂量组子宫壁内膜厚度较模型组显着降低（P<0.05）;模型组卵巢黄体个数较对照组明显增多（P<0.05）;中药高、中剂量组及西药组的卵巢黄体个数较模型组显着减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;6.各组下丘脑GnRHmRNA、KISS-1相对表达量:各组造模组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量均高于对照组（P<0.05）;九味楮实颗粒高中低剂量组及戈那瑞林组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量均低于模型组（P<0.05）;九味楮实颗粒中、低剂量组组间GnRHmRNA、KISS-1相对表达量两两比较存在差异,有统计学意义（P<0.05）;九味楮实颗粒高、中、低剂量组与西药组GnRHmRNA、KISS-1相对表达量比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:九味楮实颗粒可抑制NMA诱发雌鼠中枢性性早熟的发生,能降低CPP大鼠的血清LH、FSH、E2的水平,减少子宫壁内膜厚度及卵巢黄体生成个数,降低CPP大鼠下丘脑KISS-1及GnRHmRNA的表达水平,九味楮实颗粒可能通过调节下丘脑-垂体-性腺轴起到抑制中枢性性早熟的作用。
何怡[2]（2021）在《基于天癸理论的滋阴疏肝方对性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用研究》文中提出目的:明确滋阴疏肝方通过抑制下丘脑-垂体-性腺轴（HPGA）的过早激活从而治疗中枢性性早熟（CPP）。方法:本实验主要通过建立雌性CPP大鼠模型,用低、高剂量滋阴疏肝方干预,观察阴道口开放和子宫、卵巢组织学变化情况,ELISA法检测血清黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）水平,qPCR检测下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）mRNA、垂体促性腺激素释放激素受体（GnRH-R）mRNA的表达,以探究滋阴疏肝方对雌性CPP大鼠HPGA的作用。结果:与正常组相比,模型组下丘脑GnRH mRNA表达水平显着升高（P<0.01）,垂体GnRH-R mRNA表达升高,但无统计学差异（P>0.05）;与模型组相比,滋阴疏肝方低剂量组、高剂量组子宫指数、卵巢指数显着降低（P<0.01）,LH和FSH水平显着降低（P<0.05,P<0.01）,滋阴疏肝方低剂量组下丘脑GnRH mRNA表达显着降低（P<0.01）,高剂量组下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA表达显着降低（P<0.01）。结论:基于天癸理论指导下滋阴疏肝方对雌性CPP大鼠有治疗作用,能延缓性器官发育,减少LH、FSH分泌,降低下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA表达。其有效作用机制可能主要是通过抑制HPGA的激活,延迟性早熟大鼠青春期的启动时间来达成。
郝明[3]（2020）在《Kallmann综合征伴ANOS1基因突变患者的特征分析和促性腺激素治疗部分性CHH患者的生精疗效研究》文中研究说明第一部分Kallmann综合征伴ANOS1基因突变患者的特征分析背景ANOS1基因是Kallmann综合征发现的第一个致病基因,其位于X染色体上,属于X连锁的遗传形式,编码蛋白质anosmin-1。ANOS1基因突变引起anosmin-1蛋白功能异常,进而导致GnRH神经元及嗅神经元的迁移受损,引起Kallmann综合征。本研究深入探讨大样本量单中心的Kallmann综合征中国队列中ANOS1基因突变的情况,分析临床表型与基因突变的关系,并完成了新发突变位点的生物功能验证。目的1.筛查212例中国男性Kallmann综合征患者的ANOS1基因突变情况。2.判断新发ANOS1基因突变是否致病,且其与临床表型的关系。对象和方法研究对象:2010年1月至2017年10月共招募就诊于北京协和医院内分泌科的散发性中国Kallmann综合征男性患者,且同意进行致病基因筛查的患者,共入组212例。研究方法:1.基因筛查:采用目标序列捕获结合二代测序的方法筛查入组Kallmann综合征患者相关的31个基因。将检出的ANOS1突变基因进行Sanger测序验证。2.临床研究:收集Kallmann综合征患者临床资料,整理其中ANOS1基因突变患者的临床特点。3.新发突变基因型与表型相关性:利用Polyphen-2、SIFT、MutationTaster、MutationAssessor和Provean等五种生物预测软件对ANOS1的新发错义突变位点进行功能预测;利用 Human splicing finder 和 Splice site score calculation 等两种生物预测软件对ANOS1的新发剪切突变位点进行功能预测。4.体外功能验证实验:Transwell迁移实验验证新发错义突变是否致病。5.总结不同位点的突变导致Kallmann综合征患者的临床特点,探讨表型与基因型的关系。结果1.本研究共纳入212例Kallmann综合征患者,其中22例有ANOS1基因突变,在这些患者中隐睾患病率高达36.4%（8/22）,肾发育不全的概率达到18.2%（4/22）,一例出现双手的镜像运动,嗅神经MRI异常的患者100%出现嗅觉异常2.本研究共发现ANOS1的19个突变,包括8个错义、5个无义、3个剪接位点和3个移码突变,其中8个突变既往已报道过（p.R257X、p.W258X、p.R262X、p.R423X、p.R424X、p.Y579fs、p.V5601、c.1843-1G>A）。新发现 2 个移码突变（p.P135fs、K512fs）,7 个错义突变（p.A140G、p.C147Y、p.C157R、p.C164F、p.C164S、p.A264P、p.P504L）,2 个剪接位点突变（c.1207+1G>c、c.1449+1G>A）。所有新的错义突变经五种生物软件计算后都被认为是致病的。两个新发的剪切位点突变其突变位点位于人类最经典的剪切位点（GT-AG序列）上,经两个剪切预测软件（Human splicing finder 和 Splice site score calculation）预测均考虑致病可能性高。3.体外Transwell实验验证ANOS1基因突变功能对NLT细胞迁移的影响。七种ANOS1新发错义突变的迁移能力均明显少于ANOS1野生组。结论1.Kallmann综合征患者伴有ANOS1基因突变者更易出现累及其它非生殖系统的临床表型。2.本研究中共发现ANOS1的19个突变,再次确认了其中8个已报道位点的突变,新发现了 11个ANOS1突变位点,并对其中的错义突变进行功能验证,明确其致病性,这些突变扩大了ANOS1突变谱,为产前诊断和遗传咨询提供了基础。第二部分促性腺激素治疗部分性CHH患者的生精疗效研究背景先天性低促性腺激素性性腺功能减退症（Congenital hypogonadotropic hypogonadism,CHH）发生主要原因与下丘脑分泌的GnRH相关（分泌不足或作用障碍）,从而导致的一组在临床表型和遗传方式上罕见的异质性生殖障碍疾病。根据青春期发育程度,CHH患者可分为部分性CHH（Partial congenital hypogonadotropic hypogonadism,PCHH）和完全性 CHH（Complete congenital hypogonadotropic hypogonadism,CCHH）,以往对部分性CHH的研究主要局限于症状描述和突变基因的鉴定。目前还没有关于双促性腺激素（绒促性腺激素联合尿促性腺激素）治疗中国人部分性CHH治疗预后和部分性CHH突变基因的综合研究分析的报道。本研究通过对促性腺激素生精治疗部分性CHH患者预后及相关突变基因的研究,为临床开展治疗提供依据。目的1.分析应用双促性腺激素生精治疗下部分性CHH患者与完全性CHH患者精子生成的区别及相关差异原因2.部分性CHH患者与完全性CHH患者进行致病基因突变的筛查,以明确不同突变对患者临床表现的影响。对象和方法研究对象:2008年1月至2016年9月就诊于北京协和医院内分泌门诊后确诊为CHH的男性患者,并接受规律促性腺激素治疗两年且无隐睾史者（122例）研究方案:回顾性分析治疗及随诊方案:所有患者均按照指南给予绒促性腺激素联合尿促性腺激素肌肉注射治疗。每3-6个月进行一次随诊,每次随诊记录患者身高、体重、睾丸体积、性腺激素水平、精子生成等情况。致病基因筛查:87名患者接受二代测序筛查31种CHH相关基因突变。结果1.CHH患者按睾丸体积是否≥4ml分为部分性CHH（n=39）组（睾丸体积≥4ml）和完全性CHH（n=83）组（睾丸体积<4ml）。经规律两年双促性腺激素治疗后,与完全性CHH组（74.7%）相比,部分性CHH组生精率高达92.3%（P=0.023）;部分性CHH组首次精子出现时间11.7±6.8个月,较完全性CHH组首次精子出现时间提前了半年（17.8±6.2个月）（P<0.001）,每半年随访时部分性CHH组精子浓度均明显高于完全性CHH组,且在6、12、24个月时这种差异是有统计学意义的。2.共有87名患者接受31种CHH相关致病基因的筛查,其中28例CHH患者通过二代测序筛查出CHH相关致病基因变异,其检出率约为32.2%（28/87）。共检出9种致病基因的28处位点突变,其中7个突变位点为已知致病突变,有21处为新发突变。在部分性CHH组和完全性CHH组中均发现FGFR1、ANOS1、PROKR2和CHD7突变,说明相同基因的突变可导致不同程度的表型,导致不同的预后。LHB和NELF突变仅见于部分性CHH组,在完全性CHH组中没有检测到这些突变。GNRHR、FGF8和PROK2突变仅存在于完全性CHH组存在,在部分性CHH组中没有检测到这些突变。结论1.部分性CHH定义为初诊时基础睾丸体积≥4ml的CHH患者;完全性CHH定义为基础睾丸体积<4ml的CHH患者。2.在两年规律的促性腺激素治疗的过程中,部分性CHH患者组较完全性CHH患者组精子生成率更高,且精子初现的时间更短,在相同治疗时间下,部分性CHH患者产生精子的平均密度要远高于完全性CHH患者,成功生成精子的患者比率也高于完全性CHH组。3.FGFR1、PROKR2、CHD7、ANOS1等基因突变即可导致部分性CHH也可导致完全性CHH,根据目前的研究尚未发现仅可导致部分性CHH的基因突变,基因检测的结果说明:部分性CHH与完全性CHH患者检测出的基因突变的概率一样,对于已经明确有致病基因突变的患者,两组之间生精治疗不能成功的比率均较高,因此应该重视基因检测的结果,以期寻找到对症治疗方法。
张丹丹[4]（2019）在《血清IGF-1、DHEAS、AMH及BMP-6在快进展型青春期女童中的早期预警价值》文中认为目的:研究血清IGF-1、DHEAS、AMH及BMP-6水平对快进展型青春期女童的早期预警价值。方法:1、选取2017年8月～2018年10月因乳房发育至苏州大学附属儿童医院内分泌遗传代谢科门诊就诊的750例女童作为研究对象,随访6月～1年,剔除失访、早期治疗、不满足各组入组标准的病例,将剩余的138例女童按照入组标准分为CPP32例、EP65例及RPP41例。同时选择同期我院健康体检、年龄为8-9岁的未发育女童33例作为健康对照组;2、将入组女童分为五组:快进展型青春期早期（early puberty with rapidly progressive group,EP-RPP）组、慢进展型青春期早期（early puberty with slowly progressive group,EP-SPP）组、快进展型青春期（rapidly progressive puberty,RPP）组、中枢性性早熟（central precocious puberty,CPP）组和健康对照组,签署知情同意书后,留取早晨空腹血清,收集所有女童出生史、父母身高数据和病例组的病史、骨龄、子宫B超和性激素结果;3、采用化学发光法（Chemical Luminescence,CL）测定血清胰岛素生长因子-1（Insulin-like Growth Factor-1,IGF-1）、硫酸脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone sulphate,DHEAS）水平,采用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定血清抗苗勒管激素（Anti-Mullerianhormone,AMH）、骨形态发生蛋白6（Bone morphogenetic protein 6,BMP-6）水平;4、应用SPSS22.0软件进行统计学分析。结果:1、RPP组女童就诊时平均身高为139.58±4.09cm,按骨龄预测终身高为152.19±4.63cm,按父母身高计算遗传靶身高为158.79±3.64cm,预测终身高和遗传靶身高之间差异有统计学意义（F=0.801,P<0.05）,平均减损身高为6.6±4.19cm;2、血清 FSH 峰值在 EP-SPP 组、EP-RPP 组、和 RPP 组分别为 15.10（13.86-19.80）mIU/ml、11.99（9.18-16.16）mIU/ml、和 11.43（9.37-15.63）mIU/ml;血清 FSH/LH 峰值比在 EP-SPP 组、EP-RPP 组和 RPP 组分别为 3.20（2.44-4.58）、1.86（1.05-3.16）和0.76（0.49-0.99）;EP-SPP组血清FSH峰值、血清FSH/LH峰值比均高于EP-RPP组,两组之间差异有统计学意义（P<0.05）;EP-RPP组与RPP组对比,在FSH峰值上无明显统计学意义（P>0.05）;3、血清IGF-1水平在健康对照组、EP-SPP组、EP-RPP组、CPP组和RPP组分别为 166.00（126.50-188.00）ng/ml、199.00（170.50-262.50）ng/ml、252.00（233.00-291.50）ng/ml、288.00（252.00-376.00）ng/ml 和 382.00（264.00-499.50）ng/ml;EP-SPP 组、EP-RPP组、CPP组和RPP组均高于健康对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;EP-RPP组高于EP-SPP组,差异有统计学意义（P<0.05）,随着青春期的快速进展,血清IGF-1水平进一步升高,在RPP组最高,RPP组与EP-RPP组之间差异具有统计学意义（P<0.05）;CPP组高于EP-RPP组,差异具有统计学意义（P<0.05）;RPP组高于CPP组差异具有统计学意义（P<0.05）;4、血清DHEAS水平在健康对照组、EP-SPP组、CPP组、EP-RPP组及RPP组分别为 41.65（14.80-59.88）ng/ml、42.50（30.15-79.83）ng/ml、52.32（43.08-98.54）ng/ml、63.30（34.00-81.55）ng/ml 和 70.89（51.85-100.02）ng/ml;其中健康对照组、EP-RPP 组和RPP组的血清DHEAS水平呈逐渐升高趋势,在RPP组最高,三组之间差异具有统计学意义（P<0.05）;健康对照组与EP-SPP组血清DHEAS水平之间差异无明显统计学意义（P>0.05）;EP-SPP组、CPP组和EP-RPP组血清DHEAS之间差异无明显统计学意义（P>0.05）;5、血清AMH、BMP-6水平在EP-RPP组、EP-SPP组、RPP组、CPP组及健康对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）;6、ROC曲线分析示:血清IGF-1 水平曲线下面积为0.765,Cut-off值为232.5ng/ml,该界值的特异性为83.30%,灵敏度为75.00%;血清FSH峰值曲线下面积为0.703,Cut-off值为13.81mIU/ml,该界值的特异性为74.20%,灵敏度为69.70%;血清FSH/LH峰值曲线下面积为0.732,Cut-off值为2.33,该界值的特异性为77.40%,灵敏度为63.60%;血清FSH峰值与血清FSH/LH峰值比联合曲线下面积为0.795;7、RPP组与SPP组女童在出生时胎龄、娩出方式、喂养方式、母孕期疾病史及父母矮身材情况上均无明显统计学意义（P均>0.05）,该样本中均无小青春病史,亦未统计到患儿出生后有无追赶生长情况;8、病例组与健康对照组女童在出生时胎龄、娩出方式、喂养方式、母孕期疾病史及父母矮身材情况上均无明显统计学意义（P均>0.05）;9、CPP组相比EP-RPP组的BA/CA 比值、子宫长度、子宫体积、血清LH水平、血清LH/FSH峰值比及血清IGF-1水平更大,CPP组相比EP-RPP组的血清FSH/LH峰值比更低,两组之间差异具有统计学意义（P<0.05）;RPP组相比CPP组的BA/CA比值、子宫长度、子宫体积、E2、血清LH基础值、血清LH/FSH峰值比及血清IGF-1水平更大,CPP组相比RPP组的血清FSH/LH峰值比更低,两组之间差异有统计学意义（P<0.05）;10、双侧卵巢体积大小在EP-RPP组、EP-SPP组、RPP组和CPP组之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1、血清FSH峰值、血清FSH/LH峰值比在EP-SPP组明显高于EP-RPP组,血清FSH峰值在EP-RPP组和RPP组无明显差别,提示较高的血清FSH峰值和较高的血清FSH/LH峰值比联合可能可以作为早期预测早青春期女童青春期进展快慢的有效指标之一;2、血清IGF-1水平在EP-RPP组明显高于EP-SPP组,随着青春期进程的快速进展,血清IGF-1水平进一步升高,在RPP组达到最高,提示IGF-1参与了青春期进程快慢的调控,可以作为预测RPP的早期预警指标之一;同时血清IGF-1水平在EP-RPP组、EP-SPP组和CPP组均高于健康对照组,提示IGF-1还与青春期启动的调控有关;3、血清DHEAS水平在病例组高于健康对照组,在EP-RPP组、EP-SPP组和CPP组之间差异无统计学意义,随着青春期的快速进展,血清DHEAS水平也明显升高,提示DHEAS对青春期启动和进程的调控有重要意义,虽然DHEAS不能作为预测RPP的早期预警指标,但是其水平高低可能与Tanner分期有关;4、双侧卵巢体积在EP-RPP组、EP-SPP组、RPP组和CPP组之间差异无统计学意义,提示卵巢体积不能作为评估青春期进程及进展快慢的指标;5、女童出生时的胎龄、分娩方式、出生体重、喂养方式、母孕期疾病史及父母矮身材情况与青春期启动时间和进程快慢无关,关于小青春期和生后追赶生长对青春期进程快慢的影响仍需进一步研究;6、CPP组与EP-RPP组相比,虽然有更大的BA/CA 比值、子宫长度、子宫体积及IGF-1水平,但是在青春期快速进展的状态下,RPP组同样出现骨龄超前、子宫增大、性激素水平及IGF-1水平升高等表现,提示快进展型青春期和性早熟女童一样,也会有早初潮和终身高的减损,需监测青春期进程,及时干预。
孟凡顺[5]（2019）在《深圳市性早熟女童的特征及其与PAEs暴露的关联性分析》文中指出研究目的分析深圳市性早熟女童基本情况、家庭情况、环境暴露及膳食特点等特征;分析PAEs暴露与性早熟的关联性,探讨性早熟的危险因素及病因,为性早熟的早期预防控制提供指导性的建议。研究内容病例样本来自于深圳市某医院内分泌科诊断为中枢性性早熟和青春期发育过早的女童,对照样本来自深圳市目标体检学校,对病例进行年龄（年龄相差不超过3个月）,性别1:1对照匹配,共纳入病例对照样本284对。病例对照均收集了问卷和尿液。使用高效液相色谱串联质谱仪测定尿液样本五种邻苯二甲酸酯代谢产物的水平。采用R软件（版本:3.5.2）应用t检验,符号秩检验、秩和检验、卡方检验、因子分析、协方差分析。logistic回归分析等方法对数据处理和统计分析。探讨深圳市性早熟女童的特征及其与性早熟的关联性。结果一般情况:本次研究共纳入研究对象568人,病例组284人,对照组284人。其中8岁组年龄人数最多,占比44%。其次为7岁组（33%）,9岁组（18%）。6岁组（4%）和10岁组（1%）人数较少。病例组和对照组实足年龄的中位数相同,均为8.0岁。病例组的身高、体重和BMI的中位数均分别为135.0cm、30.2kg、16.6kg/m2,均高于对照组的身高（129.2cm）、体重（25.0kg）和BMI（15.3 kg/m2）。病例对照单因素分析:基本情况方面:在身高、体重、BMI、超重肥胖率、抗生素使用方面病例组高于对照组,差异均有统计学意义(z=11.07,z=8.98,z=4.85,z=1.96,z=1.96,χ2CΜΗ=18.21,χ2=0.46,P值均<0.05)。在营养不良率、出生体重、断乳时间方面对照组高于病例组,差异均有统计学意义(χ2CΜΗ=18.21,z=1.96,z=4.22,P值均<0.05)。家庭情况方面:病例组独生子女的比例（42.9%）、母亲超重肥胖的比例（21.1%）要高于对照组（26.7%,12.2%）;对照组睡眠时间（9h）、母亲初潮年龄（14岁）高于病例组（8h,13岁）。暴露情况方面:在家庭装修时间,使用塑料器皿频率,使用塑料器皿时间方面,差异有统计学意义（χ2值依次为104.29,30.41,20.79,P值均<0.05）;而护肤品的使用频率两组差别无统计学意义（χ2值=0.46,P值>0.05）。饮食模式:问卷的膳食部分共涉及14类食物的摄入频率,将每种食物的食用频率标准化为:次/天。经t检验:在粮谷类,洋快餐,补品和营养品方面病例组高于对照组（t值分别为5.55,3.83,4.77）;在畜肉,坚果,新鲜蔬菜,新鲜水果,奶及奶制品,碳酸饮料方面对照组高于病例组（t值分别为6.29,1.69,3.51,4.88,2.87,3.95）,差异均有显着性（P值均<0.05）。尿液mPAEs测定:利用LC-MS/MS测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物浓度。MMP、MEP、MiBP、MBP、MEHP五种邻苯二甲酸酯代谢物的检出率范围是97%100%。五种邻苯二甲酸酯代谢物的相对回收率范围在0.41.03。协方差模型的调整年龄和BMI后,五种邻苯二甲酸酯代谢产物中MBP,MEHP在组间的差异有统计学意义（F值分别是10.30,3.93,P值均小于0.05）,其他三种代谢产物MMP、MEP、MiBP均未发现显着性差异。病例对照多因素分析:使用条件二分类logistic回归分析,入选标准为0.10,剔除标准为0.15。OR正负值来看儿童营养评价（OR=2.326,95%CI:1.3973.871）、塑料器皿的进食频率（OR=1.625,95%CI:1.0692.465）、高蛋白高脂饮食（OR=3.940,95%CI:2.5156.168）以及MEHP暴露（OR=2.099,95%CI:1.4772.979）是女童性早熟的危险因素,家庭月收入（OR=0.750,95%CI:0.5830.964）、母亲初潮年龄（OR=0.727,95%CI:0.5800.910）是保护因素。结论1.深圳市学龄儿童健康对照组的主要饮食模式是平衡膳食模式,性早熟儿童的主要膳食模式是高蛋白高脂膳食模式。应对性早熟患儿进行健康教育,改变不良的饮食习惯。2.女童超重肥胖、塑料器皿的进食越频繁、高蛋白高脂饮食越多、MEHP暴露越多、家庭月收入越少、母亲初潮年龄越小发生性早熟的危险性就越大。
谢蓉蓉[6]（2019）在《环磷酰胺对男童性腺的远期影响及GnRH拮抗剂保护作用的实验研究》文中研究表明环磷酰胺（Cyclophosphamide,CPA）作为一种细胞毒性烷化剂和免疫抑制剂,具有抗肿瘤和免疫抑制作用,是儿科领域各类恶性肿瘤、严重自身免疫性疾病等的常用治疗药物之一。也正是由于其具有细胞毒性,特异性不强,环磷酰胺具有一定副作用,尤其在性腺损害方面。生殖系统对化学毒物反应相当敏感,在其他系统尚未出现毒性反应前,生殖系统可能已经受损伤。随着儿童肿瘤和一些严重自身免疫性疾病的长期生存率的不断提高,这部分幸存者进入成年后的远期生活质量,尤其是性腺功能,逐渐引起医患双方的越来越多的关注。研究发现[1],患儿接受环磷酰胺治疗的年龄越小,远期睾丸组织所有的损害就越小,可能与其性腺增殖尚未启动有关。这项研究结果提示,在生精细胞的增殖处于不分化状态时接受抗肿瘤药物治疗,可避免其受抗肿瘤药物的损伤,是一种有效的保护方法。因此,在使用环磷酰胺时,针对性抑制下丘脑-垂体-性腺轴,从而抑制睾丸或卵巢功能,将有可能保护使用性腺毒性药物后的性腺。促性腺激素释放激素拮抗剂（Gonadotropin-releasing hormone antagonists,GnRHant）可以通过竞争性阻断下丘脑GnRH受体而直接引起下丘脑-垂体-性腺轴的快速抑制。故本课题对曾经接受过环磷酰胺静脉冲击治疗的男性患儿进入成年后进行远期回顾性随访研究,评估这部分患儿的性腺影响;建立环磷酰胺诱导的青春期大鼠睾丸功能远期损害的动物模型,并通过GnRH拮抗剂干预上述大鼠模型,研究GnRH拮抗剂能否改善远期的性腺损害及初步探索其可能的作用机制。第一部分环磷酰胺冲击治疗对男童性腺远期影响的单中心临床观察目的:回顾性分析及随访研究环磷酰胺静脉冲击治疗对男性患儿睾丸的远期影响。方法:回顾性收集2003年12月至2013年12月期间,在苏州大学附属儿童医院住院接受环磷酰胺静脉冲击治疗的难治性肾病综合征、过敏性紫癜性肾炎、系统性红斑狼疮性肾炎等患儿的资料,对停用环磷酰胺5年以上的患者进行远期随访评估。随访内容如下:一般体格检查,外生殖器检查评估,开始使用环磷酰胺时的年龄,随访时的年龄,随访时的停药时间,环磷酰胺用药情况（累积剂量及疗程次数）,血清相关性激素水平的测定,超声检测睾丸容积等。结果:符合纳入标准的男性患儿共53例,电话成功随访到19例,开始用药年龄为7-16岁,累积剂量为32-210mg/kg,累积使用疗程为2-16次,随访时年龄为16-25岁,停用环磷酰胺时间为5-11年,其中前来我院参加体检者共9例,身高、体重、体检睾丸容积和超声下测量睾丸体积无异常,性激素水平（卵泡刺激素FSH、黄体生成素LH、睾酮T、抗苗勒氏管激素AMH、抑制素B、泌乳素PRL）和同龄男性相比无显着性差异,其中1例FSH水平偏高。结论:在儿童期接受环磷酰胺临床常规剂量静脉冲击治疗并停药5～11年后的青年未婚男性的睾丸体积、性激素水平、遗精年龄未见明显变化,有待今后进一步继续随访作全面评估。第二部分促性腺激素释放激素拮抗剂改善环磷酰胺致幼鼠远期睾丸损伤的实验研究目的:随着儿童期肿瘤和自身免疫性疾病存活率不断提高,维持患儿化疗后性腺的正常功能越来越受到重视。本研究旨在纵向探讨GnRH拮抗剂是否可以减轻青春期大鼠环磷酰胺诱导的远期睾丸损伤。方法:将24只5周龄雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组6只:（1）正常对照组,（2）环磷酰胺组,（3）GnRH拮抗剂+环磷酰胺组,（4）GnRH拮抗剂组。环磷酰胺按100 mg/kg腹腔注射,仅一次;GnRH拮抗剂在环磷酰胺注射前一小时开始腹腔注射,按0.1 mg/kg,每周3次,共持续4周。于结束用药9周经过一个生精周期后,比较各组雄鼠体重和睾丸重量,血清性激素水平（睾酮T,抗苗勒氏管激素AMH,抑制素B）,光镜下观察各组睾丸组织形态学改变,以及采用免疫组化法、实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组睾丸雄激素受体（androgen receptor,AR）的表达情况。结果:GnRH拮抗剂组大鼠睾丸组织形态学和雄激素表达水平与正常对照组没有显着性改变,GnRH拮抗剂+环磷酰胺组大鼠体重、雄激素受体m RNA和蛋白表达均比环磷酰胺组大鼠显着性增高,与对照组及GnRH拮抗剂组没显着性差异,光镜下GnRH拮抗剂+环磷酰胺组雄鼠睾丸组织形态的损伤程度包括曲细精管的不规则形态、减少的Sertoli细胞及各级生精细胞,减少的管腔内精子细胞数量等较环磷酰胺损伤组改善,雄激素受体表达同样比环磷酰胺组大鼠有所改善。然而各组睾丸重量和血清睾酮、AMH、Inh B没有显着性差异改变。结论:青春期雄鼠采用GnRH拮抗剂可以通过增加睾丸中的雄激素受体表达来安全保护环磷酰胺诱导的远期睾丸损伤。
向伟[7]（2018）在《RFRP-3调控雌性小鼠生殖发育的分子机制研究》文中进行了进一步梳理哺乳动物中,RFRP-3可在垂体促性腺细胞水平或GnRH神经元水平抑制促性腺激素的合成与分泌,RFRP-3也是目前已知的唯一抑制生殖的下丘脑神经肽。尽管大量研究已经证实RFRP-3功能的重要性,但其作用靶细胞的分子机制尚未完全阐明,特别是很少有研究证实RFRP-3对青春期的启动是否起到决定性作用。因此,本研究在高通量测序、生物信息学分析基础上,应用分子生物学手段从体内、体外阐明RFRP-3调控哺乳动物生殖发育的分子机制。具体研究主要体现在以下几个方面:（1）明确RFRP-3对雌性小鼠青春期的发育及启动的作用。本研究通过侧脑室注射外源RFRP-3多肽、以及RFRP-3过表达慢病毒,探究RFRP-3对雌性小鼠青春期前期生殖发育的生理学作用。RT-qPCR和免疫组化研究结果显示RFRP-3多肽和慢病毒颗粒注射都抑制了下丘脑GnRH mRNA和蛋白水平,也显着抑制了下丘脑kiss1/GPR54基因的表达。RFRP-3多肽和RFRP-3过表达均显着抑制了血清中LH和E2的分泌,而青春期前期卵巢切除消除了RFRP-3对LH分泌的抑制作用,在成熟小鼠中卵巢切除则未改变RFRP-3的抑制作用。这表明RFRP-3对促性腺激素分泌的抑制作用与雌激素状态和发育阶段相关。此外,解剖学结果显示,RFRP-3慢病毒注射显着抑制了小鼠子宫内膜的厚度和卵巢初始卵泡的数量。这些研究结果表明:RFRP-3可直接或间接作用GnRH神经元来抑制GnRH/LH的激增,从而抑制青春期的启动,进而在性腺的发育与成熟中发挥重要的生理学作用。（2）垂体细胞中探究RFRP-3调控促性腺激素分泌的分子机制。目前RFRP-3对促性腺激素分泌的抑制作用发生在垂体水平还是下丘脑水平尚存在争论。本研究在垂体瘤细胞株LβT2细胞中探究RFRP-3调控促性腺激素分泌的分子机制。结果显示:外源激素和RFRP-3过表达对基底促性腺激素分泌并无显着影响,但均以时间和剂量依赖性抑制GnRH诱导的促性腺激素的分泌。根据KEGG信号通路分析结果显示GnRH处理激活了GnRH信号通路里PKA和PKC信号通路。PKA拮抗剂H89和PKC拮抗剂GF预处理发现,H89和GF均减弱了RFRP-3对GnRH诱导的促性腺激素分泌的抑制作用,这表明该抑制作用效果可能通过PKA和PKC联合调节的ERK信号通路发挥生理学效应。上述研究结果表明RFRP-3在垂体水平对促性腺激素分泌的抑制作用依赖于GnRH,可能通过作用于GnRH调节的PKA/PKC信号通路调控促性腺激素的合成和分泌。（3）下丘脑细胞中探究RFRP-3调控GnRH分泌的分子机制。本研究在下丘脑GnRH神经元GT1-7细胞系探究RFRP-3调控GnRH分泌的信号转导途径,发现:无论是外源性激素,还是RFRP-3基因过表达,均能够显着抑制GnRH的转录和蛋白的合成与分泌。通过高通量测序数据,利用生物信息学分析,结果显示,RFRP-3处理下调了cAMP信号通路、MAPK信号通路以及GnRH信号通路等信号通路的活性。根据KEGG数据库分析我们推测RFRP-3可能通过cAMP/PKA/ERA信号通路抑制GnRH的分泌。在细胞水平利用不同级联信号通路抑制剂和RFRP-3联合处理验证这一假设。H89预处理减弱了RFRP-3对GnRH分泌的抑制作用,然而GF处理对其抑制作用并无明显影响,这进一步证实RFRP-3通过抑制PKA调节的ERK信号通路抑制Gn RH的合成和分泌。此外,本研究还证实RFRP-3与雌激素信号通路和kisspeptin信号通路之间相互作用相互联系。结果显示,三者之间相互促进,以不同的信号途径共同调控GnRH的合成与分泌。本研究从多角度系统的验证了RFRP-3调节雌性小鼠生殖发育的分子机制。哺乳动物中,RFRP-3通过其受体GPR147激活Gai,从而抑制/cAMP/PKA调节的ERK信号通路,进而直接抑制GnRH的合成和分泌。GnRH分泌进入垂体门静脉系统,在垂体水平调控促性腺激素的分泌,从而调控性腺的发育与性激素的合成与分泌,调控哺乳动物青春期的发育和启动以及生殖功能。
韩兴发[8]（2017）在《GnRH主动免疫对动物生殖及生产性能的影响及其作用机制研究》文中研究说明促性腺激素释放激素（Gn RH）通过下丘脑-垂体-性腺轴（HPG axis）紧密调控动物的生殖功能和行为,是动物生殖生理的中枢启动激素和调控激素;同时,生殖内分泌与生长内分泌、免疫系统功能及动物肉品质特别是公猪肉“膻味”形成密切相关。Gn RH主动免疫通过有效“中和”内源性Gn RH,抑制性激素的分泌和配子的发生,从而达到免疫去势目的,已成为目前最有望取代传统外科阉割去势的安全友好的去势方法。然而,目前Gn RH主动免疫去势仍然存在不少问题,严重阻碍了Gn RH主动免疫去势实践应用:1)少数动物Gn RH主动免疫后反应较小或没有反应,存在免疫“逃逸”现象;2)为了达到良好的免疫去势效果,存在Gn RH去势疫苗抗原用量大且需2次或2次以上注射,提高了Gn RH主动免疫去势的应用成本;3)Gn RH主动免疫去势的分子机制不清楚,严重阻碍了上述两个问题的解决;4)Gn RH主动免疫扰乱生殖内分泌后对动物生长内分泌、免疫系统及公猪肉“膻味”物质代谢的影响及其可能作用机制不完全清楚。因此,本研究通过五个试验,以SD雄鼠、雄性绵羊和公猪为试验对象,研究Gn RH新蛋白构型抗原制备策略并系统探讨Gn RH主动免疫对生殖内分泌、生长内分泌、免疫系统及功能、公猪肉“膻味”物质（雄烯酮和粪臭素）代谢的影响及其作用机制,为研发高效Gn RH免疫去势疫苗及推动Gn RH主动免疫去势大规模实践应用提供理论参考。试验一新蛋白构型Gn RH去势抗原设计及不同新蛋白构型Gn RH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究本研究中新蛋白构型Gn RH抗原设计的核心思路是:1)增加Gn RH拷贝数;2)增大抗原分子量。新蛋白构型Gn RH抗原设计如下:以D型赖氨酸（D-lysine）取代天然Gn RH十肽第6位甘氨酸（Glysine）形成与载体蛋白偶连位点（G6K-Gn RH,G6K）,以化学合成法合成G6K-Gn RH并列体（G6K-Gn RH-tandem,G6KT）作为新蛋白Gn RH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成本研究抗原○1G6KTD,紧接着将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白（OVA）偶联分别形成本研究抗原○2G6KT-OVA及○3G6KTD-OVA。将3种新蛋白构型Gn RH抗原配于Specol佐剂分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1ml乳化抗原（含相应新构型Gn RH蛋白100μg）,8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,同时设置完整对照组（Intact controls）和手术去势组（Surgical castrates）,每试验组12只雄鼠。免疫当天及免疫后4、8、12 wpv（weeks post vaccination）尾动脉采集血液分析血清Gn RH抗体滴度和生殖激素浓度变化,加免后4周断颈处死所有试验鼠,采集垂体及两侧睾丸,q PCR检测生殖相关基因m RNA表达并进行睾丸组织学分析。试验结果显示:1)三种新蛋白构型Gn RH抗原主动免疫后均能刺激雄鼠产生良好的抗体反应（P<0.05）。2)其中G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,初免4周后就显着降低雄鼠体内血清LH、FSH、睾酮及抑制素B浓度（P<0.05）;在试验结束时,两免疫组睾丸重量及体积均下降到完整对照组睾丸50%以下,精子发生完全被终止,垂体Gn RHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα,INβA及INHβB m RNA表达显着下调（P<0.05）;3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只（75%）有显着的免疫学和生物学反应（“免疫反应鼠”）,而剩余3只（25%）则无明显的生物学反应（“免疫逃逸鼠”）;“免疫反应鼠”,G6KTD初免对所测血清生殖激素浓度无明显影响（P>0.05）,但加免后显着降低血清LH、FSH、睾酮及抑制素B浓度（P<0.05）;处死时其睾丸重量和体积分别减少到完整对照睾丸的64%和62%,且睾丸精子发生受到明显抑制,同时垂体和睾丸所测生殖相关基因m RNA表达水平显着下调（P<0.05）;而“免疫逃逸鼠”则整个试验期间血清生殖激素浓度与完整对照组雄鼠相似（P>0.05）,处死时睾丸精子发生正常,垂体和睾丸所测生殖相关基因m RNA表达水平与完整对照组相似（P>0.05）。因此,新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖轴生殖激素分泌的目的,在作为单剂量Gn RH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原先,可单独作为Gn RH去势抗原,能有效避开Gn RH分子与载体蛋白偶连所面临的Gn RH抗原损失严重及与载体蛋白偶连的后续纯化等问题。试验二Gn RH主动免疫对动物下丘脑-垂体-睾丸轴功能的影响本研究为了提高研究结论的可靠性（即,避开物种差异对探讨Gn RH主动免疫去势机理的干扰）,我们同时研究了Gn RH主动免疫对SD雄鼠、雄性绵羊和公猪下丘脑-垂体-睾丸轴功能的影响。SD雄鼠、雄性绵羊和公猪均分为:Gn RH免疫去势组、完整对照组和手术去势组。免疫去势组SD雄鼠主动免疫G6KT-OVA,雄性绵羊和公猪主动免疫G6KTD-OVA,加免一次,间隔8周,加免后4-8周处死试验动物,分离下丘脑、垂体及睾丸q PCR分析生殖轴生殖相关基因m RNA表达变化,试验期间采集血液分析血清Gn RH抗体和生殖激素浓度变化。结果显示:1)在SD大鼠、雄性绵羊及公猪上我们均发现,Gn RH主动免疫后随着血清Gn RH抗体滴度的升高,血清生殖激素LH、FSH、睾酮及抑制素（精子发生的biomarker）浓度缓慢降低,加免后随血清Gn RH抗体急速上升到一定浓度时,血清生殖激素降低到极低甚至不可测水平,睾丸萎缩、精子发生受到抑制或完全终止,表明在Gn RH主动免疫初期,抗体“中和”理论完全能解释Gn RH主动免疫去势的机制;2)与完整对照组相比,Gn RH主动免疫显着下调下丘脑弓状核（Arc）及前腹侧室旁核（AVPV）AR、kiss1、GPR54及Gn RH m RNA表达水平和下丘脑正中隆起Gn RH含量（P<0.05）,表明Gn RH主动免疫通过下调下丘脑AR-kiss1-GPR54-Gn RH信号通路,显着降低下丘脑Gn RH合成和或释放;动物手术去势后也得到和Gn RH去势后一致的研究结果,表明下丘脑Gn RH上游信号环路完整性和Gn RH正常合成需要睾丸类固醇激素的维持。上述研究结果在SD大鼠、雄性绵羊和公猪上一致,由此说明,Gn RH主动免疫后下丘脑Gn RH的合成和释放的降低是造成Gn RH主动免疫去势的重要原因之一,特别是在Gn RH抗体滴度降低后Gn RH免疫动物仍然维持不育的重要原因;3)Gn RH主动免疫显着降低（P<0.05）垂体Gn RH基因受体Gn RHR m RNA表达水平及睾丸LHR、FSHR m RNA表达水平且在三种受试动物上研究结果一致。垂体Gn RHR及睾丸LHR和FSHR表达降低,严重破坏生殖轴功能的完整性,这也是Gn RH主动免疫去势的重要原因之一,特别是维持较长时间去势状态的重要原因之一。试验三GnRH主动免疫对GHRH/SS-GH-IGF1轴功能的影响本项研究在试验二SD雄鼠和目标动物公猪上进行,动物分组处理见试验二。试验开始后每隔4周采集血清以分析血清生长相关激素浓度变化;记录试验动物每天采食量,并在初免当天、加免当天及试验最后一天称取动物体重,计算各处理组动物从初免到加免、加免到试验结束及整个试验期间的日增重及饲料转化效率;试验结束时采集动物下丘脑、垂体及肝脏q PCR分析生长相关基因m RNA表达水平。试验结果显示,与完整对照组相比,手术去势显着降低雄鼠和公猪下丘脑（P<0.05）Gn IH、GHRH,垂体GH和肝脏IGF1 m RNA表达;显着降低血清（P<0.05）GH和IGF1浓度;显着增加（P<0.05）血清尿素氮含量。与手术去势不同,Gn RH主动免疫对SD雄鼠和公猪下丘脑Gn IH、GHRH,垂体GH和肝脏IGF1 m RNA表达和血清GH浓度无影响（P>0.05）;此外Gn RH免疫去势动物血清IGF1和尿素氮含量分别显着高于和低于（P>0.05）手术去势动物血清相应含量;与手术去势动物相比,Gn RH免疫去势SD雄鼠和公猪有更高的饲料转化效率（P<0.05）。由此可知,免疫去势动物较手术去势动物具有更优异的生产性能表现,这主要是由于免疫去势对GHRH-GH无明显影响所致。Gn IH作为同时能调节生殖内分泌及生长内分泌的因子,很可能是生殖内分泌与生长内分泌间的桥梁分子,是造成手术去势与免疫去势后下丘脑GHRH表达差异的原因。试验四Gn RH主动免疫对免疫系统功能的影响本研究在试验三雄性绵羊中开展。试验期间按试验三中所述采集血清分析血清免疫细胞因子浓度,试验结束采集脾脏q PCR分析生殖和免疫相关基因m RNA表达变化。结果显示,与完整对照组相比,Gn RH主动免疫显着增加（P<0.05）脾脏Gn RH m RNA和蛋白含量;与脾脏Gn RH表达上调一致,Gn RH主动免疫显着上调（P<0.05）脾脏IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α及淋巴细胞表面分子CD4、CD8、CD19 m RNA表达水平以及血清IL-2、IL-4,IL-6、TNF-α浓度。与免疫去势相似,手术去势也显着上调（P<0.05）绵羊脾脏Gn RH及免疫细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-αm RNA表达及血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α浓度。此外,Gn RH主动免疫和手术去势均显着下调（P<0.05）脾脏AR m RNA表达,表明免疫或手术去势后脾脏Gn RH表达增加可能是因两种去势处理解除了雄激素对脾脏Gn RH合成的反馈抑制所致。由上推断,Gn RH主动免疫通过解除睾酮对脾脏Gn RH合成的反馈抑制作用,继而上调脾脏Gn RH表达,从而显着增强动物免疫功能。试验五Gn RH主动免疫对公猪“boar taint”及“boar taint”代谢的影响本研究在试验二公猪试验上进行。试验开始后,按试验二中所述采集血液分析血液生殖激素和公猪“boar taint”物质浓度变化;试验结束时采集背部脂肪分析脂肪“boar taint”物质含量,采集肝脏及睾丸分析“boar taint”物质代谢相关基因m RNA表达和蛋白水平变化。结果显示,与完整对照相比,Gn RH主动免疫显着下调（P<0.05）睾丸雄烯酮合成关键酶STAR、CYP11A1、CYP17A1及CYB5A m RNA表达;显着降低（P<0.05）血清和脂肪雄烯酮水平,表明Gn RH主动免疫能有效抑制睾丸雄烯酮的合成,这是Gn RH主动免疫去除公猪体内雄烯酮沉积最主要原因。此外,Gn RH主动免疫显着上调（P<0.05）肝脏雄烯酮代谢降解酶3β-HSD及SULT2A1 m RNA和蛋白质表达,与手术去势后研究结果一致,表明睾丸性激素对肝脏雄烯酮代谢酶的表达或活性具有抑制作用,Gn RH主动免疫也可通过抑制睾丸性激素的产生继而增强肝脏雄烯酮清除能力。Gn RH主动免疫显着降低（P<0.05）公猪血清和脂肪粪臭素含量,屠宰时免疫去势公猪血清和脂肪粪臭素含量下降到手术去势公猪水平。与血清和脂肪粪臭素水平降低一致,Gn RH主动免疫和手术去势均显着上调（P<0.05）肝脏粪臭素代谢关键酶CYP2E1、CYP2A19、CYP2C49及CYB5A m RNA表达,表明睾丸类固醇激素对肝脏粪臭素代谢也有显着的抑制作用。相关分析显示,相对于血清睾酮及雌二醇,雄烯酮和血清粪臭素含量呈现更加显着的正相关关系（P<0.05）,表明雄烯酮是肝脏粪臭素代谢的主要抑制因子。由此可知,Gn RH主动免疫能有效清除公猪体内由雄烯酮和粪臭素沉积所引起的“膻味”。其中,睾丸合成雄烯酮的强度似乎是决定公猪脂肪中沉积雄烯酮和粪臭素含量多少的主要决定因素。
王蔚华[9]（2016）在《滋阴清肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素及受体的影响》文中进行了进一步梳理目的:从中医基础理论和现代医学角度分析并总结中枢性性早熟的病因病机、治则治法。本文建立雌性大鼠中枢性性早熟（central precocious puberty,CPP）模型,通过观察滋阴清肝方对雌性CPP大鼠性发育、褪黑素及受体、体质量等相关指标的影响,探讨褪黑素及其受体与性早熟之间的关系;了解褪黑素和受体表达及体质量在滋阴清肝方治疗性早熟中的作用,进一步明确滋阴清肝方的作用机制。方法:1理论研究系统回顾古今文献,了解中西医理论对CPP的病因病机、治则治法的认识,为实验研究提供理论依据。2实验研究SD雌性大鼠共32只,出生后随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组8只。大鼠5日龄时,除正常组外,其余3组大鼠皮下注射300μg达那唑建立大鼠CPP模型。15日龄时,西药组、中药组大鼠分别给予亮丙瑞林（100μg/kg）和滋阴清肝方（3.2g/ml）进行干预。当模型组阴门开启动物超过半数（>50%）时终止实验。自造模之日（5日龄）起,每日通过肉眼观察各组大鼠阴门开启情况并记录开启时的日龄（vaginal opening,VO）;阴道涂片法观察第1个发情间期的出现并记录出现时的日龄（first diestrus,D1）;每4天监测各组大鼠体质量。实验结束时麻醉后处死大鼠,取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的褪黑素（MT）、促黄体生成素（LH）和骨钙素（bgp）水平;通过荧光实时定量pcr法检测下丘脑促性腺激素释放激素（gnrh）mrna的表达;检测下丘脑褪黑素受体mt1、mt2mrna的表达。统计学处理:采用spss18.0统计软件进行统计学分析,组间数据采用单因素方差分析,所有数据均以均数±标准差（x±s）表示,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1、理论研究回顾古今研究cpp的相关文献,对cpp的病因病机、治则治法的认识均认为肝脾肾为发病的关键。现代中医认为性早熟的病机主要有阴虚火旺、肝郁化火、脾虚痰结型3个常见证型。而在长江以南地区,性早熟的证型以阴虚火旺合并肝郁化火多见。滋阴清肝方由知母,黄柏,夏枯草,白芍,生地,丹皮组成,是总结导师向楠教授及专科10余年治疗icpp经验的基础方。在临床观察和动物实验中都已初步证实,滋阴清肝方对cpp有较好的治疗效果。2、实验研究（1）与正常组比较,模型组大鼠31日龄阴门开启日龄明显提前、子宫系数增加（p<0.05）,卵巢系数明显增加（p<0.01）,子宫壁厚度、卵巢黄体数均增加（p<0.05,p<0.01）,血清lh,bgp明显上升（p<0.01）,下丘脑gnrhmrna表达水平升高（p<0.01）,病理切片上可见子宫卵巢组织体积增大,夜间血清mt降低（p<0.01）,下丘脑mt受体mt1mrna的表达上升（p<0.01）。（2）与模型组比较,中药组大鼠的阴门开启日龄延迟,子宫系数降低（p<0.05）,卵巢系数降低（p<0.01）,子宫壁厚度和黄体生成数降低（p<0.05,p<0.01）,lh和bgp降低（p<0.05）,夜间血清mt升高（p<0.05）,并且下丘脑gnrhmrna表达水平下降（p<0.05）,下丘脑mt受体mt1mrna的表达上升（p<0.05）,病理切片上可见子宫卵巢组织体积缩小。（3）与正常组、模型组、西药组比较,中药组组大鼠自25日龄（滋阴清肝方灌胃10日后）至实验结束,体质量明显降低（P<0.05）。结论:（1）在中医基础理论指导下,应用滋阴清肝方治疗CPP既有理论基础,也有实验研究支持。（2）造模后大鼠出现性发育提前,性腺组织增大,性激素水平升高,骨发育亢进,GnRHmRNA表达水平升高的特点;同时夜间血清MT降低,下丘脑MT受体MT1 mRNA的表达下降。提示雌性CPP大鼠造模成功,MT及其受体与性早熟密切相关。（3）滋阴清肝方对雌性CPP大鼠具有明确的治疗作用,可使性发育减缓,性腺组织减小,性激素水平下降,骨发育趋缓,同时夜间血清MT升高,下丘脑MT受体MT1 mRNA的表达上升。滋阴清肝方可能通过升高夜间血清MT,上调下丘脑MT1 mRNA的表达,从而抑制GnRH的释放,延缓HPGA的启动,达到治疗CPP的目的。（4）滋阴清肝方对雌性CPP大鼠的体质量有降低作用,可能与治疗CPP相关。
石乔,熊德梁,杨玉[10]（2014）在《滋阴泻火中药运用于特发性性早熟的研究进展》文中研究说明性早熟是小儿内分泌的常见疾病,近年来促性腺激素释放激素拟似剂已经成熟运用于特发性性早熟的治疗中并取得一定的疗效,国内也有相当一部分文献报导关于滋阴泻火中药在特发性性早熟治疗的研究,现对滋阴泻火中药对性早熟患儿的临床应用进展作一综述;
二、促性腺激素释放激素拟似剂对青春期大鼠生长轴与性腺轴相关基因表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、促性腺激素释放激素拟似剂对青春期大鼠生长轴与性腺轴相关基因表达的影响（论文提纲范文）
（1）九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.中医对性早熟疾病的认识 |
| 1.1 病名的探讨 |
| 1.2 病因病机的探讨 |
| 1.3 证型探讨 |
| 1.4 治法探讨 |
| 2.西医对性早熟的认识 |
| 2.1 性早熟的定义及分类 |
| 2.2 性早熟的影响因素 |
| 2.3 性早熟发病机制探讨 |
| 2.4 治疗现状及预防措施 |
| 2.5 性早熟与肥胖的研究 |
| 3.中枢性性早熟模型研究 |
| 3.1 促性腺激素类药诱导性早熟 |
| 3.2 神经递质类药诱导性早熟 |
| 3.3 环境内分泌干扰物诱导性早熟 |
| 3.4 光照诱导性早熟 |
| 4.九味楮实颗粒的相关研究 |
| 4.1 九味楮实颗粒的来源 |
| 4.2 九味楮实颗粒的提取及成形工艺 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验药物 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 仪器 |
| 1.4 试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 构建模型 |
| 2.2 给药 |
| 2.3 阴道细胞涂片染色 |
| 2.4 停止给药时间及处死时间 |
| 2.5 测体质量 |
| 2.6 子宫、卵巢病理切片及脏器系数 |
| 2.7 采用ELISA检测LH、FSH、E2 的水平 |
| 2.8 荧光定量PCR检测下丘脑KISS-1、Gn RHm RNA |
| 2.9 统计学方法 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 各组大鼠阴道口开放情况 |
| 3.2 两种阴道细胞涂片染色比较 |
| 3.2.1 美兰染色法 |
| 3.2.2 瑞氏染色法 |
| 3.3 体质量的变化 |
| 3.4 脏器系数比较 |
| 3.5 子宫壁内膜厚度及卵巢黄体数 |
| 3.6 乳腺病理切片 |
| 3.7 各组LH、FSH、E2 水平比较 |
| 3.8 各组下丘脑KISS-1、Gn RHm RNA相对表达水平 |
| 4.讨论 |
| 4.1 实验动物品种的选择及雌性CPP动物模型的建立 |
| 4.2 阳性对照药物的选择 |
| 4.3 结果分析 |
| 4.4 中医药治疗性早熟机制研究 |
| 4.5 小结 |
| 4.6 不足与展望 |
| 第三部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 综述:性早熟治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
（2）基于天癸理论的滋阴疏肝方对性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用研究（论文提纲范文）
| 中英文对照 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 材料 |
| 1.实验动物 |
| 2.实验仪器、耗材及试剂 |
| (二) 方法 |
| 1.动物分组 |
| 2.性早熟大鼠模型建立 |
| 3.滋阴疏肝方药物制备 |
| 4.药物干预 |
| 5.标本采集 |
| 6.指标检测 |
| 7.统计方法 |
| 二、结果 |
| (一) 各组大鼠的一般情况 |
| (二) 性早熟大鼠的体质量变化情况 |
| (三) 各组大鼠阴道口开启日龄及第一个动情间期 |
| (四) 性早熟大鼠子宫指数、卵巢指数 |
| (五) 性早熟大鼠子宫、卵巢组织形态 |
| (六) 性早熟大鼠血清LH、FSH水平 |
| (七) 性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA水平 |
| 三、分析与讨论 |
| (一) 性早熟的现代医学认识 |
| 1.性早熟的发病与危害 |
| 2.性早熟与下丘脑-垂体-性腺轴 |
| 3.性早熟的西医治疗与问题 |
| (二) 性早熟的中医学认识 |
| 1.“天癸”的内涵 |
| 2.“天癸”的生理功能及特点 |
| 3.“天癸”与性早熟 |
| (三) 滋阴疏肝方与性早熟 |
| 1.滋阴疏肝方组成与功效 |
| 2.滋阴疏肝方对雌性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的作用 |
| (四) 问题与展望 |
| 四、小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 文献综述 中医药治疗儿童性早熟的研究现状 |
| 参考文献 |
（3）Kallmann综合征伴ANOS1基因突变患者的特征分析和促性腺激素治疗部分性CHH患者的生精疗效研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分: Kallmann综合征伴ANOS1基因突变患者的特征分析 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 优势与局限 |
| 6. 结论 |
| 7. 参考文献 |
| 第二部分: 促性腺激素治疗部分性CHH患者的生精疗效研究 |
| 1. 前言 |
| 2.研究方法与内容 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 优势与局限 |
| 6. 结论 |
| 7. 参考文献 |
| 论文综述 ANOS1基因的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）血清IGF-1、DHEAS、AMH及BMP-6在快进展型青春期女童中的早期预警价值（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究对象与方法 |
| 结果 |
| 1. 各组女童体格发育及相关临床指标比较 |
| 2. RPP组和SPP组女童身高情况 |
| 3. EP-RPP组、EP-SPP组和CPP组的一般资料分析 |
| 4. EP-RPP组与RPP组的一般资料分析 |
| 5. 各组女童血清IGF-1、DHEAS、AMH、BMP-6水平分析 |
| 6. EP-RPP组、EP-SPP组、CPP组与健康对照组血清IGF-1水平分析 |
| 7. EP-RPP组、EP-SPP组、CPP组与健康对照组血清DHEAS水平分析 |
| 8. RPP组与SPP组女童出生史资料分析 |
| 9. 病例组与健康对照组女童出生史资料分析 |
| 10. ROC曲线分析 |
| 讨论 |
| 1. RPP女童相关临床指标差异性探讨 |
| 2. 血清IGF-1、DHEAS、AMH及BMP-6浓度与RPP的关系 |
| 结论 |
| 研究不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
（5）深圳市性早熟女童的特征及其与PAEs暴露的关联性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 第2章 研究内容 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究对象 |
| 2.3 研究方法 |
| 2.3.1 问卷调查及尿液收集 |
| 2.3.2 问卷内容 |
| 2.3.3 尿液邻苯二甲酸酯代谢物浓度测定 |
| 2.3.4 临床检查和生化指标评定 |
| 2.4 样本量统计 |
| 2.5 纳入排除标准 |
| 2.5.1 病例纳入标准 |
| 2.5.2 病例排除标准 |
| 2.5.3 对照纳入标准 |
| 2.5.4 对照排除标准 |
| 2.6 统计方法 |
| 2.7 缺失值处理 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 研究对象基本情况 |
| 3.2 病例对照结果比较 |
| 3.2.1 儿童基本情况比较 |
| 3.2.2 儿童家庭情况比较 |
| 3.2.3 儿童环境暴露情况 |
| 3.2.4 儿童饮食习惯 |
| 3.2.5 LC-MS/MS测定儿童PAEs代谢物 |
| 3.2.6 1:1 配对资料的条件二分类logistic回归 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:性早熟的影响因素研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者攻读硕士学位期间的科研成果 |
| 致谢 |
（6）环磷酰胺对男童性腺的远期影响及GnRH拮抗剂保护作用的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 环磷酰胺对男童性腺的远期影响的单中心临床观察 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 促性腺激素释放激素拮抗剂改善环磷酰胺致青春期大鼠远期睾丸损伤的实验研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 环磷酰胺对儿童性腺的远期影响 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 攻读博士学位期间的科研成果 |
| 本研究所获得的基金资助 |
| 致谢 |
（7）RFRP-3调控雌性小鼠生殖发育的分子机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词对照表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 中枢神经系统促进哺乳动物生殖功能的相关研究 |
| 1.1.1 Kisspeptin/GPR54对哺乳动物生殖的作用 |
| 1.1.2 GnRH对哺乳动物生殖功能的作用 |
| 1.1.3 下丘脑其他神经肽间接调控GnRH的分泌 |
| 1.2 RFRP-3抑制哺乳动物生殖功能的相关研究 |
| 1.2.1 RFRP-3及其同源物的保守性 |
| 1.2.2 RFRP-3的表达定位及神经元与纤维网络分布 |
| 1.2.3 RFRP-3神经肽对哺乳动物生殖功能调控的研究进展 |
| 1.2.4 RFRP-3神经肽对哺乳动物青春期发育调控的研究进展 |
| 1.2.5 RFRP-3神经肽作用细胞内信号通路的研究进展 |
| 1.3 课题立题依据与研究意义 |
| 1.4 课题研究目的与内容 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 1.5 课题创新点 |
| 1.6 技术路线 |
| 2 RFRP-3对小鼠青春期发育及启动的影响 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 |
| 2.1.1 实验动物与饲养管理 |
| 2.1.2 主要实验试剂与耗材 |
| 2.1.3 主要实验仪器 |
| 2.1.4 实验用部分溶液及其配制方法 |
| 2.2 实验方法及步骤 |
| 2.2.1 小鼠分组与处理 |
| 2.2.2 小鼠体重的测定 |
| 2.2.3 血清采样 |
| 2.2.4 ELISA检测血清相关蛋白的浓度 |
| 2.2.5 小鼠下丘脑相关基因表达量的检测 |
| 2.2.6 免疫组织化学 |
| 2.2.7 感受态制备 |
| 2.2.8 质粒构建 |
| 2.2.9 内毒素去除 |
| 2.2.10 慢病毒包装 |
| 2.2.11 小鼠手术处理 |
| 2.2.12 结果分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 发育过程中下丘脑RFRP基因表达模式及生殖激素分泌模式 |
| 2.3.2 RFRP-3对青春期前期雌性小鼠生殖发育的调节 |
| 2.3.3 过表达RFRF-3基因对青春期启动的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 RFRP-3对促性腺激素抑制作用的分子机制的研究 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 |
| 3.1.1 实验细胞株 |
| 3.1.2 主要实验试剂与耗材 |
| 3.1.3 主要实验仪器 |
| 3.1.4 实验中主要试剂配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞复苏、培养、传代、种板和冻存 |
| 3.2.2 细胞总RNA提取 |
| 3.2.3 反转录与实时荧光定量PCR |
| 3.2.4 质粒构建及提取 |
| 3.2.5 质粒内毒素去除 |
| 3.2.6 过表达质粒转染 |
| 3.2.7 细胞激素或拮抗剂处理 |
| 3.2.8 ELISA检测培养基中蛋白水平 |
| 3.2.9 WesternBlot分析蛋白表达 |
| 3.2.10 GEO数据库及生物信息学分析 |
| 3.2.11 数据统计与分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 RFRP-3对基底的促性腺激素的影响 |
| 3.3.2 RFRP-3对GnRH诱导的促性腺激素的影响 |
| 3.3.3 生物信息学分析GnRH调控促性腺激素分泌的机制 |
| 3.3.4 RFRP-3调控GnRH诱导的促性腺激素分泌的信号途径 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 4 RFRP-3调控GnRH合成与分泌分子机制的探究 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 |
| 4.1.1 实验细胞株 |
| 4.1.2 主要实验试剂与耗材 |
| 4.1.3 主要实验仪器 |
| 4.1.4 实验中主要试剂配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 细胞复苏、培养、传代、种板和冻存 |
| 4.2.2 细胞总RNA提取 |
| 4.2.3 反转录与实时荧光定量PCR |
| 4.2.4 质粒构建及提取 |
| 4.2.5 质粒内毒素去除 |
| 4.2.6 慢病毒包装及浓缩 |
| 4.2.7 质粒转染 |
| 4.2.8 细胞激素或拮抗剂处理 |
| 4.2.9 ELISA检测培养基中蛋白水平 |
| 4.2.10 WesternBlot分析蛋白表达 |
| 4.2.11 细胞免疫荧光 |
| 4.2.12 流式细胞技术 |
| 4.2.13 转录组高通量测序及分析 |
| 4.2.14 数据统计与分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 RFRP-3对GT1-7细胞中GnRH表达的影响 |
| 4.3.2 高通量测序及RFRP-3应激相关基因的筛选 |
| 4.3.3 差异表达基因的生物信息学分析 |
| 4.3.4 外源性RFRP-3抑制GnRH表达信号机制的验证 |
| 4.3.5 过表达RFRP-3对GnRH表达信号机制的验证 |
| 4.3.6 RFRP-3调控GnRH表达信号通路与雌激素信号通路相互作用关系 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 5 结论与展望 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 后续研究展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| A 作者在攻读学位期间发表的论文目录 |
| B 作者在攻读学位期间参加科研项目情况: |
（8）GnRH主动免疫对动物生殖及生产性能的影响及其作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写字母 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 生殖轴-HPG轴 |
| 2 生殖免疫调控 |
| 2.1 促性腺激素生殖免疫 |
| 2.2 性腺类固醇激素生殖免疫 |
| 2.3 GnRH免疫去势 |
| 2.3.1 GnRH免疫原制备 |
| 2.3.2 GnRH免疫去势应用前景 |
| 2.3.3 GnRH免疫去势的机理 |
| 3 GnRH主动免疫对生长内分泌系统的影响 |
| 4 GnRH主动免疫对免疫系统的影响 |
| 4.1 性腺类固醇激素对免疫系统的影响 |
| 4.2 GnRH对免疫系统的影响 |
| 4.3 LH和FSH对免疫系统的影响 |
| 5 GnRH主动免疫对“boar taint”物质代谢调控机制 |
| 5.1 雄烯酮代谢 |
| 5.2 粪臭素代谢 |
| 5.3 GnRH主动免疫对公猪“膻味”(boar taint)物质代谢的影响 |
| 6 GnRH主动免疫去势存在的问题 |
| 第二章 研究的目的和意义 |
| 本研究旨在 |
| 第三章 试验研究 |
| 试验一 新蛋白构型GnRH去势抗原设计及不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 新蛋白构型GnRH免疫原构建及乳化 |
| 1.1.1 新蛋白构型GnRH免疫原构建及制备 |
| 1.1.2 乳化 |
| 1.2 试验动物处理及样品采集 |
| 1.3 血清GnRH抗体滴度及生殖激素浓度测定 |
| 1.4 睾丸组织学分析 |
| 1.5 生殖相关基因qPCR定量分析 |
| 1.6 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 血清抗GnRH抗体滴度 |
| 2.2 睾丸重量及大小 |
| 2.3 血清睾酮(testosterone)和抑制素B(inhibinB)激素含量 |
| 2.4 血清LH和FSH含量 |
| 2.5 不同新蛋白构型GnRH主动免疫对睾丸形态学影响 |
| 2.6 不同新蛋白构型GnRH主动免疫对垂体-睾丸生殖基因mRNA表达水平影响 |
| 2.7 G6KTD免疫组数据重分析 |
| 2.7.1 G6KTD免疫亚组间各指标对比分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验二 GnRH主动免疫分子机制研究 |
| 1 GnRH主动免疫对SD雄鼠下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 组织样品采集及指标分析 |
| 1.1.2 血清GnRH抗体及生殖激素含量检测 |
| 1.1.3 下丘脑正中隆起GnRH含量测定 |
| 1.1.4 下丘脑生殖相关基因mRNA表达测定 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 血清抗体及激素含量浓度 |
| 1.2.2 下丘脑正中隆起GnRH含量及垂体重量 |
| 1.2.3 GnRH主动免疫对下丘脑-垂体-睾丸轴生殖相关基因mRNA表达的影响 |
| 2 GnRH主动免疫对雄性绵羊下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 疫苗 |
| 2.1.2 动物选取与分组 |
| 2.1.3 样品采集及屠宰测量 |
| 2.1.4 血清抗GnRH抗体及生殖激素含量测定 |
| 2.1.5 基因的检测 |
| 2.1.6 睾丸组织学分析 |
| 2.1.7 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 血清GnRH抗体滴度 |
| 2.2.2 血清生殖激素浓度 |
| 2.2.3 睾丸组织学 |
| 2.2.4 mRNA表达水平 |
| 3 GnRH主动免疫对公猪下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 疫苗 |
| 3.1.2 动物选取与分组 |
| 3.1.3 样品采集及屠宰测量 |
| 3.1.4 血清抗GnRH抗体及生殖激素含量测定 |
| 3.1.5 下丘脑正中隆起GnRH含量测定 |
| 3.1.6 基因的检测 |
| 3.1.7 睾丸组织学分析 |
| 3.1.8 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 血清抗体滴度 |
| 3.2.2 睾丸重量、体积及垂体重量 |
| 3.2.3 血清生殖激素浓度 |
| 3.2.4 下丘脑正中隆起GnRH含量 |
| 3.2.5 睾丸组织学分析 |
| 3.2.6 生殖轴生殖基因mRNA表达 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 试验三 GnRH主动免疫对GHRH/SS-GH-IGF1轴功能的影响 |
| 1 GnRH主动免疫对SD雄鼠GHRH/SS-GH-IGF1轴的影响 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 试验动物、处理及分组 |
| 1.1.2 采食量及体重测定 |
| 1.1.3 样品采集及屠宰测量 |
| 1.1.4 血清激素测定 |
| 1.1.5 血清尿素氮测定 |
| 1.1.6 基因的检测 |
| 1.1.7 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 GnRH主动免疫对SD雄鼠生产性能的影响 |
| 1.2.2 血清激素及尿素氮浓度 |
| 1.2.3 mRNA表达水平 |
| 2 GnRH主动免疫对公猪GHRH/SS-GH-IGF1轴的影响 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 疫苗、试验动物及分组 |
| 2.1.2 采食量及体重测定 |
| 2.1.3 样品采集及屠宰测量 |
| 2.1.4 血清激素测定 |
| 2.1.5 血清尿素氮测定 |
| 2.1.6 基因的检测 |
| 2.1.7 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 GnRH主动免疫对公猪生产性能的影响 |
| 2.2.2 血清激素及尿素氮 |
| 2.2.3 血清雌二醇和尿素氮 |
| 2.2.4 公猪下丘脑-垂体-肝脏基因mRNA表达 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验四 GnRH主动免疫对免疫系统的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 疫苗、试验动物及分组 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 血清GnRH抗体、生殖激素浓度测定 |
| 1.4 血清免疫细胞因子测定 |
| 1.5 下丘脑正中隆起和脾脏组织GnRH含量测定 |
| 1.6 下丘脑、肝脏基因mRNA表达 |
| 1.7 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 血清GnRH抗体及睾丸重量及体积 |
| 2.2 下丘脑正中隆起GnRH含量和脾脏重量 |
| 2.3 血清免疫细胞因子浓度 |
| 2.4 下丘脑和脾脏基因mRNA表达 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验五 GnRH主动免疫对公猪“boar taint”及“boar taint”代谢的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 疫苗、试验动物及分组 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 血清GnRH抗体、生殖激素浓度测定 |
| 1.4 血清和脂肪雄烯酮和粪臭素浓度测定 |
| 1.5 睾丸及肝脏Boartaint物质代谢酶测定 |
| 1.6 下丘脑、肝脏基因mRNA表达 |
| 1.7 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 血清激素浓度 |
| 2.2 血清和脂肪雄烯酮和粪臭素含量 |
| 2.3 雄烯酮和粪臭素代谢酶蛋白含量 |
| 2.4 雄烯酮和粪臭素代谢酶相关基因mRNA表达 |
| 2.5 血清性激素和IGF1与血清粪臭素相关关系 |
| 2.6 血清性激素和肝脏雄烯酮代谢关键酶mRNA表达及脂肪雄烯酮含量相关关系 |
| 2.7 血清性激素和肝脏粪臭素代谢关键酶mRNA表达及脂肪粪臭素含量相关关系 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 全文总体讨论、结论及有待进一步研究的问题 |
| 1 新蛋白构型GnRH抗原的设计和制备 |
| 2 GnRH主动免疫去势的分子机理 |
| 3 GnRH主动免疫对生长内分泌及动物生产性能(performance)的影响 |
| 4 GnRH主动免疫对免疫系统的影响 |
| 5 GnRH主动免疫对公猪“boar taint”及“boar taint”代谢的影响 |
| 本研究的创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（9）滋阴清肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素及受体的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中、英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.西医学对性早熟的研究 |
| 1.1 中枢性性早熟的发病机制 |
| 1.2 中枢性性早熟的治疗进展 |
| 2.中医学对性早熟的研究 |
| 2.1 古代中医对性早熟的认识 |
| 2.2 性早熟的中医病因病机及辨证论治 |
| 2.3 中医药防治性早熟的作用机理 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验药物 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 动物分组与雌性CPP大鼠模型的建立 |
| 2.2 各组大鼠阴门开启日龄及第1个发情间期 |
| 2.3 各组大鼠子宫和卵巢系数，子宫、卵巢组织形态，卵巢黄体数，子宫壁厚度 |
| 2.4 各组大鼠夜间血清MT、LH、BGP水平 |
| 2.5 各组大鼠下丘脑GnRH、MT1、MT2mRNA的表达水平 |
| 2.6 各组大鼠体质量的变化 |
| 2.7 统计学处理 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 一般情况观察 |
| 3.2 各组大鼠阴门开启情况及出现第1个发情间期的情况 |
| 3.3 各组大鼠子宫和卵巢发育的情况 |
| 3.4 各组大鼠血清MT、LH及BGP水平 |
| 3.5 各组大鼠下丘脑GnRH、MT1、MT2 mRNA表达水平 |
| 3.6 各组大鼠体质量的变化 |
| 4.讨论 |
| 4.1 雌性CPP动物模型的建立 |
| 4.2 阳性对照药物的选择 |
| 4.3 滋阴清肝方对阴门开启及出现第1个发情间期的影响 |
| 4.4 滋阴清肝方对子宫、卵巢系数的影响 |
| 4.5 滋阴清肝方对子宫壁厚度的影响 |
| 4.6 滋阴清肝方对卵巢黄体生成数的影响 |
| 4.7 滋阴清肝方对LH的影响 |
| 4.8 滋阴清肝方对BGP的影响 |
| 4.9 滋阴清肝方对下丘脑GnRH mRNA影响 |
| 4.10 滋阴清肝方对血清MT和下丘脑MT1、MT2 mRNA的影响 |
| 4.11 滋阴清肝方对体质量的影响 |
| 5. 结论 |
| 第三部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录一 综述 |
| 参考文献 |
| 附录二 研究生在学期间发表论文、科研情况 |
| 致谢 |
（10）滋阴泻火中药运用于特发性性早熟的研究进展（论文提纲范文）
| 1 中医对该病的病因和病机认识 |
| 1. 1 体质学说 |
| 1. 2 营养过剩,过食膏粱厚味 |
| 1. 3 环境类激素污染物 |
| 1. 4 社会心理方面不良因素的影响 |
| 2 滋阴泻火中药在性早熟中的应用 |
| 2. 1 滋阴泻火方剂 |
| 2. 2 对下丘脑- 垂体- 性腺轴的影响 |
| 2.2.1对kisspeptin-GPR54系统的影响 |
| 2.2.2对下丘脑GnRH的影响 |
| 2.2.3对ER的影响 |
| 2.2.4对芳香化酶的影响 |
| 2. 3 对下丘脑- 垂体- 生长轴的影响 |
| 2.3.1对IGHRH和SRIH的影响 |
| 2.3.2对IGF-1的影响 |
| 2.3.3长骨干骺端的IGF-1 |
| 2.3.4靶器官上的IGF-1 |
| 2.3.5对骨密度、骨矿含量的影响 |
| 3 环境内分泌干扰物 |
| 3. 1 对ER的影响 |
| 3. 2 对交叉对话机制的影响 |
| 3. 3 对雌激素合成途径的影响 |
| 4 讨论 |
四、促性腺激素释放激素拟似剂对青春期大鼠生长轴与性腺轴相关基因表达的影响（论文参考文献）
- [1]九味楮实颗粒对雌性中枢性性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究[D]. 黄艳霞. 湖北中医药大学, 2021(09)
- [2]基于天癸理论的滋阴疏肝方对性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用研究[D]. 何怡. 浙江中医药大学, 2021(02)
- [3]Kallmann综合征伴ANOS1基因突变患者的特征分析和促性腺激素治疗部分性CHH患者的生精疗效研究[D]. 郝明. 北京协和医学院, 2020(05)
- [4]血清IGF-1、DHEAS、AMH及BMP-6在快进展型青春期女童中的早期预警价值[D]. 张丹丹. 苏州大学, 2019(04)
- [5]深圳市性早熟女童的特征及其与PAEs暴露的关联性分析[D]. 孟凡顺. 南华大学, 2019(01)
- [6]环磷酰胺对男童性腺的远期影响及GnRH拮抗剂保护作用的实验研究[D]. 谢蓉蓉. 苏州大学, 2019
- [7]RFRP-3调控雌性小鼠生殖发育的分子机制研究[D]. 向伟. 重庆大学, 2018(04)
- [8]GnRH主动免疫对动物生殖及生产性能的影响及其作用机制研究[D]. 韩兴发. 四川农业大学, 2017(01)
- [9]滋阴清肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素及受体的影响[D]. 王蔚华. 湖北中医药大学, 2016(08)
- [10]滋阴泻火中药运用于特发性性早熟的研究进展[J]. 石乔,熊德梁,杨玉. 江西中医药, 2014(01)