一、猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊治（论文文献综述）
刘雨琦[1]（2020）在《猪圆环病毒2型和3型双重微滴式数字PCR检测方法的建立》文中研究说明猪圆环病毒2型是世界上公认的对养猪业造成严重危害的致病菌之一,可与多种其他病原体混合感染,引起仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征和增生和坏死性肺炎等多种疾病,对各国养猪业造成巨大的影响。猪圆环病毒3型是一种2016年在美国发现的新型病毒,之后在世界各养猪国均有PCV3感染的报道,对未来养猪业会造成不容小觑的影响。猪圆环病毒2型和3型同属于猪圆环病毒,引起的疾病临床表现类似,在我国7个省市均有混合感染的报道,在湖南、湖北和江苏等地,二者混合感染率可达42.9%。目前已建立PCV2和PC V3的免疫学诊断方法和分子生物学诊断方法,其中包括常见的酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）、聚合酶链式反应（Polym erase Chain Reaction,PCR）和实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PC R,q PCR）等检测方法。这些检测方法大多存在耗时长、灵敏度低、易污染等缺点。本实验旨在利用微滴式数字PCR技术（Droplet Digital PCR,dd PCR）建立一种快速、高效、可同时对PCV2和PCV3定量的检测的方法,可对猪的病料组织或者血清等低浓度样本进行特异性定量检测。具体研究内容如下。1.单重PCV2微滴式数字PCR检测方法的建立,单重PCV3微滴式数字PCR检测方法的建立。选择PCV2和PCV3中目的基因的保守序列片段（Gen Bank No.KC823059.1和KY778776）与载体p UC59合成质粒,并利用Primer Premier 5软件设计引物。通过引物筛选、优化退火温度和引物探针浓度比建立PCV2和PCV3微滴式数字PCR检测方法,通过特异性实验探究建立的反应体系的特异性,并比较了所建立的PCV2和PCV3微滴式数字PCR检测方法与PCV2和PCV3实时荧光定量PCR检测方法的灵敏度和重复性。实验结果表明,当引物探针浓度比为400 n Mv:200 n M和退火温度为56℃时,阳性液滴集中,扩增效果最好,对其他核酸样本无特异性扩增,灵敏度均能达到0.1 fg/μL,dd PCR最低可检出1.1 copies/μL的p UC59-PCV2和1.03 copies/μL的p UC59-PCV3。其中PCV2的q PCR和dd PCR标准曲线相关系数（R2）分别为0.9941和0.9762,dd PCR的扩增效率为83.41%;PCV3的q PCR和dd PCR标准曲线相关系数（R2）分别为0.965和0.9575,dd PCR的扩增效率为80.75%。PCV2微滴式数字PCR检测方法与PCV2实时荧光定量PCR检测方法的组内组间实验CV（%）值均小于5,PCV3微滴式数字PCR检测方法与PCV3实时荧光定量PCR检测方法的组内组间CV（%）值均小于6.06,说明本实验所建立的四种检测方法其可重复性好,稳定性强。2.双重PCV2和PCV3微滴式数字PCR检测方法的建立。让每个微反应体系都含有两套引物探针,分别用含有FAM和VIC两种不同的报告基团探针进行检测,实现PCV2和PCV3能同时高效的准确定量,提高检测效率,降低检测成本。本实验建立的双重PCV2和PCV3微滴式数字PCR检测方法和的双重PCV2和PCV3实时荧光定量PCR检测方法灵敏度均能达到0.1 fg/μL,其中双重dd PCR检测检出0.1 fg/μL的p UC59-PCV2和p UC59-PCV3的拷贝数为1.1 copies/μL和1.32 copies/μL,双重q PCR检测PCV2和PCV3标准曲线相关系数（R2）分别为0.9907和0.9682,双重dd PCR检测PCV2和PCV3标准曲线相关系数（R2）分别为0.9651和0.9638,扩增效率分别为83.9%和78.8%。方差分析结果表明四个F值均小于其F crit值,则F值在a=0.05的水平上不显着差异。说明本实验建立的双重微滴式数字PCR和双重实时荧光定量PCR与单重检测之间结果无显着差异,且均呈现良好的线性关系。3.实际样本检测和试剂盒研发。利用已建立的q PCR和dd PCR两种检测方法对95份疑似感染PCV2的病猪样本进行检测,其中q PCR的阳性检出率为60%（57/95）,dd PCR的检出率为62.10%（59/95）,两种方法检测结果的kappa系数为0.9766,说明两种方法具有很好的一致性。其中dd PCR对q PCR检测出的疑似结果,能够通过具体拷贝数做出阳性或阴性的判断,在低浓度的检测样本中发挥出独特优势。本章实验也研发了两种双重检测试剂盒,其中试剂盒具有良好的特异性和灵敏度,能满足各种环境和条件下的检测要求,且节约了成本,缩短了检测时间,在一次反应过程种能对PCV2和PCV3同时检出,将会有广阔的市场前景。
赵云波,马亚,郭欣,李岩磊[2]（2020）在《仔猪伪狂犬病与附红细胞体病混合感染诊治》文中认为邯郸市成安县康源养殖场新进仔猪出现发病情况。发病猪体温升高,表现共济失调,前冲、后退或转圈运动等神经症状。根据临床症状、剖检变化、实验室诊断,判断为仔猪伪狂犬病与附红细胞体病混合感染,通过紧急接种猪伪狂犬基因缺失活疫苗,使用干扰素、三氮脒、多西环素等药物控制病情。经治疗,15头发病猪,死亡3头,其余痊愈。猪群健康状况趋于稳定,未出现新的病例。该文主要论述仔猪伪狂犬病与附红细胞体病混合感染诊治过程。
李国光,李文灿,杨兴梅[3]（2019）在《猪伪狂犬病与猪链球菌混感的诊治》文中指出随着我国生猪养殖规模的扩大和养殖模式的转变,高密度的养殖环境和跨区域的种猪、仔猪调运增加了猪疫病的感染风险。一些传染性强、潜伏周期长的病毒往往具有传播快、死亡率高、混感的特点,极大的增加了猪疫病防控的难度,给养殖户带来了严重的经济损失。猪伪狂犬病是一种潜伏周期较长、感染性较强的疾病,猪链球菌病是一种易感率高、发病范围广、四季皆可感染且
尹健灿[4]（2019）在《猪伪狂犬病与猪链球菌混感的诊治》文中研究指明目前,猪伪狂犬病发病率逐年增长,虽然一些猪场常规免疫接种猪伪狂犬疫苗,仍会出现病例,大部分同其他一种或多种疫病相混合感染,导致免疫抑制,诊断与治疗难度较大。如果不进行及时有效的治疗,则会造成病猪大规模死亡,使得养殖户承受严重的经济损失。鉴于此,本文结合多年诊治经验,重点介绍猪伪狂犬病与猪链球菌混合感染的诊断方法,并提出有效的治疗方法,便更好地指导实践工作。
张珍[5]（2017）在《猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊断与治疗》文中研究表明在肉猪养殖中,混合感染是经常出现的病症类型。在本文中,将就猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊治进行一定的研究。
王洪光,汤德元,罗险峰,曾智勇,李春燕,甘振磊,王凤,刘建,郝飞[6]（2013）在《猪瘟与其他疫病混合感染情况的研究进展》文中研究表明猪瘟是当今危害养猪业的主要疫病之一,近年来典型猪瘟已不多见,多表现为温和型猪瘟、隐性猪瘟以及妊娠母猪繁殖障碍猪瘟。许多研究人员发现,几年来猪瘟与其他疫病混合感染现象十分普遍,常常表现为猪瘟与细菌性疫病的混合感染,猪瘟与其他病毒性疫病的混合感染,猪瘟与病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫疾病的混合感染,这些混合感染严重影响猪瘟的诊断与防制,给养猪业造成重大的经济损失。本文主要对猪瘟的混合感染情况进行分析,为养殖户及相关研究提供参考。
刘丽萍,王守君,单艳君,朱永信,张玲,张谦[7]（2011）在《猪高热病的诊断与防治》文中研究指明猪高热病是由高致病性蓝耳病等病毒和细菌、寄生虫等多种病原混合或继发感染引起的急性、热性、高致病性和致死性的传染性疾病。近年来,猪高热病在不少地方经常发生,尤其是高温高湿夏季。
二、猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊治（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊治（论文提纲范文）
（1）猪圆环病毒2型和3型双重微滴式数字PCR检测方法的建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 PCV的病原学特征 |
| 1.1.1 形态及理化性质 |
| 1.1.2 PCV基因结构特征 |
| 1.2 PCV的复制方式 |
| 1.3 PCV的分类 |
| 1.3.1 PCV1的基因结构 |
| 1.3.2 PCV2的基因结构与分型 |
| 1.3.3 PCV3的基因结构 |
| 1.4 PCV2和PCV3引起的相关综合征和疾病 |
| 1.4.1 PCV2引起的相关综合征和疾病 |
| 1.4.2 PCV3引起的相关综合征和疾病 |
| 1.5 PCV2和PCV3与其他病原体引起的混合感染 |
| 1.5.1 PCV2与其他病原体引起的混合感染 |
| 1.5.2 PCV3与其他病原体引起的混合感染 |
| 1.5.3 PCV2与PCV3的混合感染 |
| 1.6 研究进展 |
| 1.6.1 免疫学诊断方法 |
| 1.6.2 分子生物学诊断方法 |
| 1.6.3 PCV2和PCV3的双重检测 |
| 1.7 微滴式数字PCR |
| 1.7.1 数字PCR的简介 |
| 1.7.2 数字PCR的分类 |
| 1.7.3 ddPCR的优点 |
| 1.7.4 ddPCR的应用 |
| 1.8 论文研究内容、目的和意义 |
| 1.8.1 研究内容和方法 |
| 1.8.2 研究目的和意义 |
| 第二章 猪圆环病毒2型微滴式数字PCR定量检测方法的建立 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验样品 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细菌的培养 |
| 2.2.2 核酸的提取与反转录 |
| 2.2.3 标准品的制备 |
| 2.2.4 标准品的制备 |
| 2.2.5 PCV2的qPCR和ddPCR反应体系的建立和优化 |
| 2.2.6 qPCR和ddPCR检测PCV2的特异性实验 |
| 2.2.7 qPCR和ddPCR检测PCV2的灵敏度实验及标准曲线绘制 |
| 2.2.8 qPCR和ddPCR检测PCV2的最低检测限实验和重复性实验 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 引物的筛选和体系的优化 |
| 2.3.2 qPCR和ddPCR检测PCV2的特异性实验 |
| 2.3.3 qPCR和ddPCR检测PCV2的灵敏度实验及标准曲线绘制 |
| 2.3.4 qPCR和ddPCR检测PCV2的最低检测限实验和重复性实验 |
| 2.4 讨论与小结 |
| 第三章 微滴式数字PCR检测猪圆环病毒3型方法的建立 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验仪器 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验样品 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 引物的筛选和体系的优化 |
| 3.3.2 qPCR和ddPCR检测PCV3的特异性实验 |
| 3.3.3 qPCR和ddPCR检测PCV3的灵敏度实验及标准曲线绘制 |
| 3.3.4 qPCR和ddPCR检测PCV3的最低检测限实验和重复性实验 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 双重微滴式数字PCR检测猪圆环病毒2型和3型方法的建立 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验仪器 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验样品 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 标准品的制备 |
| 4.2.2 引物与探针的设计合成 |
| 4.2.3 双重qPCR检测PCV2和PCV3反应体系的建立 |
| 4.2.4 双重dd PCR检测PCV2和PCV3反应体系的建立 |
| 4.2.5 双重qPCR检测PCV2和PCV3的灵敏度实验及标准曲线绘制 |
| 4.2.6 双重dd PCR检测PCV2和PCV3的灵敏度实验及标准曲线绘制 |
| 4.2.7 方差分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 双重qPCR和双重dd PCR检测PCV2和PCV3反应体系的建立 |
| 4.3.2 双重qPCR和双重dd PCR检测PCV2和PCV3灵敏度实验 |
| 4.3.3 方差分析 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 实际样本检测和实际应用 |
| 5.1 实际样本检测 |
| 5.1.1 实验样本 |
| 5.1.2 提取方法 |
| 5.1.3 实际样本检测结果 |
| 5.2 猪圆环病毒2型和3型双重微滴式数字PCR检测试剂盒的研发 |
| 5.2.1 简介 |
| 5.2.2 试剂盒组成 |
| 5.2.3 具体操作步骤 |
| 5.2.4 结果判读 |
| 5.2.5 注意事项 |
| 5.3 猪圆环病毒2型和3型实时荧光PCR检测试剂盒的研发 |
| 5.3.1 简介 |
| 5.3.2 试剂盒组成 |
| 5.3.3 具体操作步骤 |
| 5.3.4 结果判读 |
| 5.3.5 注意事项 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点和应用前景 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 中英文缩略表 |
| 攻读硕士学位期间的科研情况 |
| 致谢 |
（2）仔猪伪狂犬病与附红细胞体病混合感染诊治（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 发病情况 |
| 2 临床症状 |
| 3 剖检变化 |
| 4 实验室诊断 |
| 4.1 病料涂片镜检 |
| 4.2 细菌分离培养 |
| 4.3 动物感染试验 |
| 5 预防与治疗 |
| 5.1 隔离、严格消毒 |
| 5.2 紧急接种 |
| 5.3 处理方案及治疗用药 |
| 6 分析 |
| 7 结束语 |
（3）猪伪狂犬病与猪链球菌混感的诊治（论文提纲范文）
| 1 临床病症 |
| 2 诊断 |
| 2.1 涂片镜检 |
| 2.2 病原的分离培养 |
| 2.3 荧光PCR检测 |
| 3 治疗方法 |
| 3.1 消毒、饲养处理 |
| 3.2 疫苗注射治疗 |
| 3.3 中药治疗 |
| 4 结语 |
（4）猪伪狂犬病与猪链球菌混感的诊治（论文提纲范文）
| 1 疾病的诊断 |
| 1.1 涂片镜检 |
| 1.2 病原的分离培养 |
| 1.3荧光PCR检测 |
| 2 猪伪狂犬病与猪链球菌混感治疗 |
| 3 结语 |
（5）猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊断与治疗（论文提纲范文）
| 1 临床症状 |
| 1.1 仔猪 |
| 1.2 育肥猪 |
| 2 诊断 |
| 2.1 细菌学检查 |
| 2.1.1 涂片镜检 |
| 2.1.2 分离培养 |
| 2.2 血清学检查 |
| 2.2.1 链球菌间接血凝试验 |
| 2.2.2 间接血凝试验 |
| 3 防治措施 |
（6）猪瘟与其他疫病混合感染情况的研究进展（论文提纲范文）
| 1 猪瘟与细菌性疫病的混合感染 |
| 2 猪瘟与病毒性疫病的混合感染 |
| 2.1 猪瘟与猪繁殖与呼吸综合征的混合感染 |
| 2.2 猪瘟与猪伪狂犬病的混合感染 |
| 2.3 猪瘟与猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病的三重感染 |
| 2.4 猪瘟与猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病的混合感染 |
| 3 猪瘟与寄生虫性疫病的混合感染 |
| 4 猪瘟与病毒性、细菌性及寄生虫性疫病的混合感染 |
| 4.1 猪瘟与猪伪狂犬病及细菌性或寄生虫性疫病的混合感染 |
| 4.2 猪瘟与猪圆环病毒病及细菌性疫病的混合感染 |
| 4.3 猪瘟与猪繁殖与呼吸综合征及副猪嗜血杆菌的混合感染 |
| 4.4 猪瘟与猪肺疫等细菌性或寄生虫性疫病的混合感染。 |
（7）猪高热病的诊断与防治（论文提纲范文）
| 1 流行特点 |
| 2 临床症状 |
| 3 剖检变化 |
| 4 预防措施 |
| 5 治疗方案 |
四、猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊治（论文参考文献）
- [1]猪圆环病毒2型和3型双重微滴式数字PCR检测方法的建立[D]. 刘雨琦. 暨南大学, 2020(03)
- [2]仔猪伪狂犬病与附红细胞体病混合感染诊治[J]. 赵云波,马亚,郭欣,李岩磊. 畜牧兽医科学(电子版), 2020(11)
- [3]猪伪狂犬病与猪链球菌混感的诊治[J]. 李国光,李文灿,杨兴梅. 畜牧兽医科技信息, 2019(12)
- [4]猪伪狂犬病与猪链球菌混感的诊治[J]. 尹健灿. 畜牧兽医科技信息, 2019(07)
- [5]猪伪狂犬病与链球菌病混合感染的诊断与治疗[J]. 张珍. 中国畜牧兽医文摘, 2017(07)
- [6]猪瘟与其他疫病混合感染情况的研究进展[J]. 王洪光,汤德元,罗险峰,曾智勇,李春燕,甘振磊,王凤,刘建,郝飞. 中国猪业, 2013(04)
- [7]猪高热病的诊断与防治[J]. 刘丽萍,王守君,单艳君,朱永信,张玲,张谦. 养殖技术顾问, 2011(04)