一、姜黄素对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响（论文文献综述）
康晓文[1]（2021）在《“醒脑开窍”针法对脑缺血损伤血脑屏障通透性的调控作用及对ICAM-1、MMPs-9表达的影响》文中研究指明目的:观察“醒脑开窍”针法对脑缺血损伤后血脑屏障通透性的调控作用,并探讨其作用机制,为“醒脑开窍”针法治疗脑血管病提供理论依据。方法:SPF级雄性SD大鼠88只,按体重随机分为空白组（N=8）,假手术组（N=8）,模型组（N=24）,中风膏组（N=24）,针刺+中风膏组（N=24）,除空白组和假手术组外,其它3组每组组内再进一步分为4h,3d和15d三个亚组,每个亚组8只。空白组不予处理,假手术组予以生理盐水灌胃,2次/日,中风膏组予以中风膏混悬液灌胃,2次/日,针刺+中风膏组在中风膏灌胃的基础上予以“醒脑开窍”针法,1次/日。干预后通过Zea-longa评分方法检测各组实验大鼠的神经功能缺损评分;采用伊文斯蓝测定法评价各组实验大鼠的血脑屏障通透性;用实时定量聚合酶链反应检测缺血脑组织ICAM-1、MMPs-9的基因相对表达。结果:1.大鼠神经功能缺损评分缺血再灌注4h:与空白组和假手术组比较,模型组、中风膏组和针刺+中风膏组神经功能缺损评分均上升（P<0.05）;缺血再灌注3d:与模型组相比,中风膏组神经功能缺损评分几乎无变化,针刺+中风膏组神经功能缺损评分降低（P>0.05）;缺血再灌注15d:与模型组相比,中风膏组和针刺+中风膏组神经功能缺损评分均降低（P<0.05）。其中,针刺+中风膏组比中风膏组下降更显着（P>0.05）。与4 h、3d相比:针刺+中风膏组15d神经功能缺损评分显着降低（P<0.05）。2.大鼠EB含量测定缺血再灌注4h:与空白组和假手术组比较,模型组、中风膏组和针刺+中风膏组EB含量均上升（P<0.05）;缺血再灌注3d:与模型组相比,中风膏组、针刺+中风膏组的EB含量均降低（P<0.05）,中风膏组与针刺+中风膏组相比较,差异无统计学意义（P>0.05）;缺血再灌注15d:与模型组相比,中风膏组、针刺+中风膏组EB含量均降低（P<0.05）。其中,针刺+中风膏组的EB含量高于中风膏组（P<0.05）。与4h相比:针刺+中风膏组3d时EB含量增高,15d时EB含量降低。3.大鼠脑组织ICAM-1mRNA的含量测定缺血再灌注4h:与空白组和假手术组比较,模型组、中风膏组和针刺+中风膏组的ICAM-1mRNA含量均上升（P<0.05）;缺血再灌注3d:与模型组相比,中风膏组、针刺+中风膏组的ICAM-1mRNA含量均降低（P>0.05）,中风膏组与针刺+中风膏组相比较无统计学差异（P>0.05）;缺血再灌注15d:与模型组相比,中风膏组和针刺+中风膏组ICAM-1mRNA含量均降低（P<0.05）。其中,针刺+中风膏组比中风膏组ICAM-1mRNA含量下降更显着（P<0.05）。针刺+中风膏组ICAM-1mRNA含量在4h、3d、15d各个时相依次降低。4.大鼠脑组织MMPs-9含量检测缺血再灌注4h:与空白组和假手术组比较,模型组、中风膏组和针刺+中风膏组MMPs-9含量均上升（P<0.05）;缺血再灌注3d:与模型组相比,中风膏组、针刺+中风膏组MMPs-9含量均下降（P<0.05）,中风膏组与针刺+中风膏组比较差异无统计学差异（P>0.05）;缺血再灌注15d:与模型组相比,中风膏组和针刺+中风膏组MMPs-9含量均降低（P<0.05）。其中,针刺+中风膏组比中风膏组下降更显着（P<0.05）。与4h相比:针刺+中风膏组3d时MMPs-9含量增高,15d时MMPs-9含量降低。结论:1.“醒脑开窍”针法对脑缺血损伤血脑屏障通透性具有双向调控作用。在脑缺血再灌注3d时“醒脑开窍”针法可以降低血脑屏障的通透性,在15d时“醒脑开窍”针法可以增加血脑屏障的通透性。2.此种双向调控作用可能是通过针刺调节缺血再灌注大鼠脑组织中ICAM-1含量和MMPs-9含量来实现的。
肖福龙[2]（2020）在《搜风祛痰中药对Hcy诱导的心肌微血管内皮细胞损伤的作用机制研究》文中进行了进一步梳理目的:采用网络药理学方法,以搜风祛痰中药为研究载体,构建“中药成分-靶点-疾病”相互作用网络,并对交集靶点进行富集分析,预测搜风祛痰中药治疗冠心病的作用机制。在体外细胞培养条件下,以大鼠心肌微血管内皮细胞（RCMECs）为研究对象,观察搜风祛痰中药含药血清对同型半胱氨酸（Hcy）诱导的RCMECs损伤的作用,探讨搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs炎症和线粒体凋亡的影响,进一步揭示搜风祛痰中药治疗冠状动脉微血管功能障碍的作用机制,丰富风痰理论的科学内涵,为搜风祛痰法的应用提供实验依据。材料与方法:（1）基于网络药理学探讨搜风祛痰中药治疗冠心病的机制研究:通过文献检索及多个数据库联用检索搜风祛痰中药成分靶点及冠心病疾病靶点,取交集靶点,推测出中药有效成分。根据中药有效成分与交集靶点筛选关键成分。利用Cytoscape3.6.0软件对中药有效成分-交集靶点网络进行拓扑分析,进一步行GO富集分析和KEGG通路富集分析以阐释搜风祛痰中药治疗冠心病的分子作用机制。（2）搜风祛痰中药含药血清对Hcy诱导的心肌微血管内皮细胞损伤保护作用的量效关系研究:将40只SPF级Sprague-Dawley大鼠分组,分别给予生理盐水、搜风祛痰中药不同剂量灌胃,制备含药血清。将购买的RCMECs进行传代培养、冷冻及复苏,倒置显微镜观察RCMECs形态,CD31免疫荧光法鉴定细胞,阳性率达95%以上,用于后续实验。将RCMECs分为空白对照组、模型对照组及搜风祛痰中药低、中、高剂量组,除空白对照组外其余各组细胞以Hcy诱导RCMECs损伤,搜风祛痰中药低、中、高剂量组分别用搜风祛痰中药低、中、高剂量含药血清与细胞共同培养24h。收集细胞后进行相关指标的检测,采用MTT法检测各组细胞生存活性;ELISA法检测细胞培养上清液中ET-1、TNF-α、IL-6、IL-8含量;Western Blot法检测各组细胞Bax、Bcl-2、Cyto-C、Caspase9、Caspase3、e NOS蛋白表达。（3）搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的心肌微血管内皮细胞PI3K/Akt信号通路的调控作用研究:将已鉴定的RCMECs分为空白对照组、模型对照组、LY294002（PI3K特异性抑制剂）组及中药+LY294002组,其中模型对照组、LY294002组及中药+LY294002组予以Hcy诱导RCMECs损伤,LY294002组及中药+LY294002组分别用20μmol/L LY294002、20μmol/L LY294002+中剂量搜风祛痰中药含药血清与细胞共同培养24h。收集细胞后进行相关指标的检测,采用TUNEL法检测各组细胞凋亡;荧光探针法检测各组ROS阳性细胞数;RT-PCR检测各组细胞PI3K P85、Akt、m RNA表达;Western Blot法检测各组细胞PI3K P85、P-PI3K P85、Akt、P-Akt蛋白表达。（4）搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的心肌微血管内皮细胞IKK/NF-k B信号通路的调控作用研究:将已鉴定的RCMECs分为空白对照组、模型对照组、IMD0354（选择性IKKβ抑制剂）组及中药+IMD0354组,其中模型对照组、IMD0354组及中药+IMD0354组以Hcy诱导RCMECs损伤,IMD0354组及中药+IMD0354组分别用0.5μmol/L IMD0354、0.5μmol/L IMD0354+中剂量搜风祛痰中药含药血清与细胞共同培养24h。收集细胞后进行相关指标的检测,采用Western Blot法检测各组细胞NF-k B P65、P-NF-k B P65、Ik B-α、P-Ik B-α、IL-6、IL-8蛋白表达;免疫荧光法检测P-NF-k B P65蛋白核转移表达。结果:1网络药理学本研究共收集搜风祛痰中药583种化学成分、靶点777个、疾病靶点1229个、交集靶点313个,构建中药有效成分-交集靶点网络,通过Cytoscape软件进行网络分析,显示这些化学成分具有抗炎等作用,富集分析显示靶点基因所在的生物学过程主要涉及凋亡过程、炎症反应等方面,通路多涉及PI3K/Akt信号通路、NF-k B信号通路等,主要指标包括PI3K、Akt、Bcl-2、Ik B-α、NF-k B、e NOS等。2 RCMECs的形态学观察及免疫荧光法鉴定将购买的RCMECs培养至第2d-3d时,倒置显微镜下可见未融合状态下单个微血管内皮细胞呈梭形、星型或多角形,去除组织块继续培养至第5d时,可见细胞汇合成铺路石样;CD31免疫荧光法鉴定结果显示所提取的RCMECs纯度>95%。3搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs生存活性的影响与空白对照组比较,模型对照组OD值均显着降低（P<0.01）;与模型对照组比较,中药各剂量组OD值均显着升高（P<0.01）。4搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs上清液中ET-1、TNF-α、IL-6、IL-8含量的影响与空白对照组比较,模型对照组ET-1、TNF-α、IL-6、IL-8含量均显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药各剂量组ET-1、TNF-α、IL-6、IL-8含量均显着降低（P<0.01）。5搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs中Bax、Bcl-2、Cyto-C、Caspase9、Caspase3、e NOS蛋白表达的影响5.1各组细胞e NOS、Cyto-C蛋白表达与空白对照组比较,模型对照组e NOS蛋白表达显着降低,Cyto-C蛋白表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药各剂量组e NOS蛋白表达显着升高,中、高剂量组Cyto-C蛋白表达显着降低（P<0.01）。5.2各组细胞Bax、Bcl-2、Caspase9、Caspase3蛋白表达与空白对照组比较,模型对照组Bax、Bcl-2、Caspase9、Caspase3蛋白表达均显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中、高剂量组Bax蛋白表达均显着降低,Bcl-2蛋白表达均显着升高（P<0.01）,低剂量组Bcl-2蛋白表达均升高（P<0.05）,中药各剂量组Caspase9、Caspase3蛋白表达均显着降低（P<0.01）。6加入LY294002后搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs凋亡的影响空白对照组仅见少量TUNEL阳性细胞;与空白对照组比较,模型对照组凋亡细胞数显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,LY294002组、LY294002+中药组凋亡细胞数显着降低（P<0.01）;与LY294002组比较,LY294002+中药组凋亡细胞数显着降低（P<0.01）。7加入LY294002后搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs中ROS的影响空白对照组仅见少量ROS阳性细胞;与空白对照组比较,模型对照组ROS阳性细胞数均显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,LY294002组、LY294002+中药组ROS阳性细胞数均显着降低（P<0.01）;与LY294002组比较,LY294002+中药组ROS阳性细胞数显着降低（P<0.01）。8加入LY294002后搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs中PI3K P85、Akt m RNA表达的影响与空白对照组比较,模型对照组细胞PI3K P85、Akt m RNA表达显着降低（P<0.01）;与模型对照组比较,LY294002组、LY294002+中药组PI3K P85、Akt m RNA表达显着降低（P<0.01）;与LY294002组比较,LY294002+中药组细胞PI3K P85、Akt m RNA表达显着升高（P<0.01）。9加入LY294002后搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs中PI3K P85、P-PI3K P85、Akt、P-Akt蛋白表达的影响与空白对照组比较,模型对照组P-PI3K P85、P-Akt蛋白表达显着降低,P-PI3K P85/PI3K P85、P-Akt/Akt比值显着降低（P<0.01）;与模型对照组比较,LY294002组、LY294002+中药组P-PI3K P85、P-Akt蛋白表达显着降低,P-PI3K P85/PI3K P85、P-Akt/Akt比值显着降低（P<0.01）;与LY294002组比较,LY294002+中药组P-PI3K P85、P-Akt蛋白表达显着升高,P-PI3K P85/PI3K P85、P-Akt/Akt比值显着升高（P<0.01）。10加入IMD0354后搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs中NF-k B P65、P-NF-k B P65、Ik B-α、P-Ik B-α、IL-6、IL-8蛋白表达的影响10.1各组细胞P-NF-k B P65、NF-k B P65、P-Ik B-α、Ik B-α蛋白表达与空白对照组比较,模型对照组P-NF-k B P65、P-Ik B-α蛋白表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,IMD0354组、IMD0354+中药组P-NF-k B P65、P-Ik B-α蛋白表达显着降低（P<0.01）;与IMD0354组比较,IMD0354+中药组P-NF-k B P65、P-Ik B-α蛋白表达显着降低（P<0.01）。10.2各组细胞IL-6、IL-8蛋白表达与空白对照组比较,模型对照组IL-6、IL-8蛋白表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,IMD0354组、IMD0354+中药组IL-6、IL-8蛋白表达显着降低（P<0.01）;与IMD0354组比较,IMD0354+中药组IL-6、IL-8蛋白表达显着降低（P<0.01）。11加入IMD0354后搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的RCMECs中P-NF-k B P65蛋白核转移的影响空白对照组P-NF-k B P65蛋白表达多发生在细胞质,少数位于细胞核内;与空白对照组比较,模型对照组P-NF-k B P65蛋白在细胞核内表达明显增加（P<0.01）;IMD0354组、IMD0354+中药组可明显抑制P-NF-k B P65蛋白向细胞核内转移,在细胞核内蛋白表达明显少于模型对照组（P<0.01）;IMD0354+中药组抑制P-NF-k B P65蛋白向核内转移,在细胞核内蛋白表达明显少于IMD0354组（P<0.01）。结论:1基于网络药理学从分子水平预测搜风祛痰中药治疗冠心病的主要活性成分及潜在的分子作用机制,主要涉及炎症反应与细胞凋亡,通路多涉及PI3K/Akt信号通路、NF-k B信号通路等。2搜风祛痰中药含药血清抑制Hcy损伤的RCMECs炎症和细胞凋亡,改善冠状动脉微血管功能障碍,各剂量组之间存在量效关系。3搜风祛痰中药含药血清抑制线粒体凋亡,改善冠状动脉微血管功能障碍,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路相关。4搜风祛痰中药含药血清抑制炎症反应,改善冠状动脉微血管功能障碍,其机制可能与调控IKK/NF-k B信号通路相关。
姜丹[3]（2019）在《搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:本实验研究通过建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,从内皮功能、炎症反应、细胞凋亡角度探讨搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探析其作用机制,为搜风祛痰中药的临床应用提供理论依据。材料与方法:将140只SD大鼠适应性喂养7d,随机将大鼠分成假手术组、模型组、培哚普利组、搜风祛痰中药组四组,35只/组。根据成人每日用药临床推荐的常用剂量,按成人与大鼠体重折算系数6.3,折算成大鼠用量后给药,进行预处理,每日1次,继续灌胃7d。其中假手术组、模型组大鼠予以生理盐水10 mL·kg-1灌胃;搜风祛痰中药组大鼠予以搜风祛痰中药8.1g·kg-1灌胃;培哚普利组予以培哚普利片0.4mg·kg-1灌胃。在第7d灌胃结束后1小时建立心肌缺血再灌注模型,假手术组与其它三组手术过程相同,但不结扎。造模成功后每组随机选取10只大鼠进行取材,取材前夜禁食,经大鼠腹主动脉取血4 mL,静置30 min后离心,取上清液-20℃保存备用;取血结束后即刻处死大鼠,无菌条件下取出心脏,经预冷的灭菌生理盐水清洗后,心脏经10%甲醛固定,置于液氮中,-20℃冻存备用。采用ELISA法检测血清中VEGF、TXA2、PGI2、sTM、sEPCR、IL-8、IL-6、TNF-α含量;采用Western Blot法测定P-Akt、Bax、Bcl-2蛋白表达水平;采用RT-PCR法测定Akt mRNA、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平。结果:1.ELISA法检测:1.1各组大鼠血清VEGF含量比较:模型组与假手术组相比,VEGF水平明显下降（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,VEGF水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,VEGF水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,VEGF水平升高明显（P<0.05）。1.2各组大鼠血清TXA2、PGI2含量及TXA2/PGI2比值比较:模型组与假手术组相比,TXA2水平明显升高,PGI2水平明显下降,TXA2/PGI2明显升高（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,TXA2水平下降,PGI2水平升高,TXA2/PGI2下降（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,TXA2水平下降,PGI2水平升高,TXA2/PGI2下降（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,TXA2水平下降明显（P<0.05）,PGI2水平升高不明显（P>0.05）,TXA2/PGI2下降明显（P<0.05）。1.3各组大鼠血清sTM、sEPCR含量:模型组与假手术组比较,sTM、sEPCR含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组和搜风祛痰中药组sTM、sEPCR含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组sTM、sEPCR含量升高（P>0.05）。1.4各组大鼠IL-6、IL-8含量比较:与假手术组比较,模型组IL-6、IL-8含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组与搜风祛痰中药组IL-6、IL-8含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组IL-8含量降低（P<0.05）,IL-6含量升高（P>0.05）。1.5各组大鼠TNF-a含量比较:与假手术组比较,模型组TNF-a含量升高（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组与搜风祛痰中药组TNF-a含量均降低（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组TNF-a含量升高（P>0.05）。2.PCR检测2.1各组大鼠Akt mRNA表达水平:模型组与假手术组相比,Akt mRNA表达明显降低,（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,Akt mRNA表达水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比Akt mRNA表达水平升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,Akt mRNA表达水平升高不明显（P>0.05）。2.2各组大鼠Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平:模型组与假手术组相比,Bax mRNA表达明显升高,Bcl-2 mRNA表达明显升高（P<0.05）;培哚普利组与模型组相比,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA表达升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组相比,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA升高（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组相比,Bax mRNA下降不明显,Bcl-2 mRNA增加不明显（P>0.05）。3.Western Blot蛋白印记检测（蛋白灰度统计）3.1各组大鼠P-Akt蛋白表达水平比较:模型组与假手术组比较,P-Akt蛋白表达均降低（P<0.05）;培哚普利组与模型组比较,P-Akt蛋白表达增加（P<0.05）;搜风祛痰中药组与模型组比较,P-Akt蛋白表达增加（P<0.05）;搜风祛痰中药组与培哚普利组比较,P-Akt蛋白表达降低不明显（P>0.05）。3.2各组大鼠Bax、Bcl-2蛋白表达水平比较:模型组与假手术组比较,Bax、Bcl-2蛋白表达均增加、Bcl-2/Bax降低（P<0.05）;与模型组比较,培哚普利组和搜风祛痰中药组Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达降低、Bcl-2/Bax升高（P<0.05）;与培哚普利组比较,搜风祛痰中药组Bcl-2和Bax蛋白表达均增加、Bcl-2/Bax降低（P<0.05）。结论:1.搜风祛痰中药能够使血清中VEGF含量上升,PGI2含量上升,TXA2的含量下降,保持TXA2/PGI2比例的平衡,降低血清中sTM、sEPCR水平,从而对大鼠心肌缺血再灌注后血管内皮功能具有保护作用。2.搜风祛痰中药能够降低血清中IL-8、IL-6、TNF-α的含量,说明搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用可能与抑制炎症反应有关。3.搜风祛痰中药能够上调P-Akt蛋白表达水平;下调Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平;搜风祛痰中药能够上调细胞凋亡相关基因Akt mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平,下调细胞凋亡相关基因Bax mRNA表达水平;搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用可能与激活Akt/Bax通路,抑制细胞凋亡有关。
陈卓[4]（2019）在《双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠NF-κB信号通路影响的实验研究》文中指出目的:本研究通过在体实验观察双参通脉颗粒（Ginseng and Salvia Miltiorrhiza Granules,GSG）对心肌缺血再灌注（Myocardial infarction Ischemia reperfusion injury,MIRI）大鼠心功能的保护作用、对NF-κB信号通路的作用,通过离体细胞实验,观察双参通脉颗粒含药血清对乳大鼠心肌细胞缺氧复氧模型NF-κB信号通路的作用,探讨双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注损伤的调节作用及机制,为临床用药提供理论支持。材料与方法:在体实验:SPF级12周龄SD大鼠50只,雌雄各半,质量（230±20）g。将50只SD大鼠随机分成5组,每组10只,分别为假手术组,模型组,西药组,中药低剂量组,中药高剂量组。按人体与大鼠体表面积换算药物剂量,低、高剂量分别相当于生药量7.31g/kg,13.45g/kg,西药合心爽用量4.23mg/kg。假手术组及模型组应用等量生理盐水,以上各组按2次/日,3ml/次,连续灌胃四周。心电图评估筛查后,结扎大鼠左冠状动脉前降支造模,缺血30min,再灌注120min,手术全程监测心电图判定造模是否成功,监测心功能。术后大鼠经腹主动脉取血,分离血清,ELISA法检测心肌组织氧化损伤指标谷胱甘肽过氧化酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）、内皮素（ET）、髓过氧化物酶（MPO）含量变化,炎症介质白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-ɑ）含量变化;免疫组化法检测细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管内皮细胞黏附分子-1（VCAM-1）含量变化;原位末端转移酶标记技术（TUNEL）染色评估心肌细胞凋亡指数;Western blot检测心肌核转录因子-κB（NF-κB）、IκBα蛋白表达;同时观察各组大鼠心肌组织病理变化。离体实验:双参通脉颗粒含药血清的制备:30只SD大鼠,饲养于适宜环境中,自由饮水,进食,温度,湿度适宜,适应性喂养3天,后分组,随机分成三组,正常组10只,双参通脉颗粒低、高剂量组各10只,中药予浓度为7.31g/kg、13.45g/kg的颗粒剂水溶液,日两次灌胃,3ml/次,日两次,连续2周,正常组给予等量盐水,中药各组持续灌胃5d后取血,离心,取上清,过滤灭菌,-80℃冻存备用。细胞培养及传代:大鼠心肌细胞株接种于培养基,置于温度37℃,5%CO2培养箱内24h,传代。细胞造模:建立心肌细胞缺氧复氧模型,细胞分四组,正常组、模型组、中药低、高剂量组。正常组在37℃,5%CO2培养基中加入与含药血清同浓度的正常大鼠血清,连续培养24h;模型组心肌细胞置培养箱（37℃,5%CO2,90%N2,5%O2）缺氧6h,后置于37℃,5%CO2培养基复氧12h,结束;中药低、高剂量组细胞培养液中加入最佳工作浓度的中药含药血清（过滤除菌,4℃保存,稀释到适当浓度约1000倍）,其余同模型组。分别取各组细胞培养瓶中培养液,按照LDH检测试剂盒说明书,通过比色法检测各组细胞培养液中的乳酸脱氢酶（LDH）活性;CCK-8法检测心肌细胞活性;将培养好的心肌细胞以适当密度接种于96孔板中,每组设置6个复孔,加入培养液,CCK-8,与未加细胞孔对比,放置培养箱4-5小时,完成后,用酶标仪于450nm处检测OD值,Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测各组细胞培养基上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α含量变化,将各组心肌细胞按照上述实验方法加入含药学清及试剂后,按照ELISA试剂盒说明书操作;免疫荧光染色观察NF-κB、IκBα、Iκκβ的表达。采用SPSS17.0软件对所得实验数据进行处理分析,以均数±标准差（mean±SD）表示,组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）,两两比较采用q检验,凋亡率采用卡方检验（Chi-square test）,以p<0.05为具有统计学差异。结果:1双参通脉颗粒（GSG）对心肌缺血再灌注（MIRI）大鼠心功能的影响1.1 GSG对各组大鼠血流动力学的影响与模型组相比,GSG各组反映左心室收缩功能的指标（LVSP）显着升高（p<0.05）,左室最大上升速率（+dp/dtmax）升高（p<0.05）,反映左心室舒张功能的指标（LVDP）显着降低（p<0.05）,左室最大下降速率（-dp/dtmax）降低（p<0.05）,GSG低、高剂量组及西药组心率变化（D-value）均较模型组小（p<0.05）。1.2 GSG对MIRI大鼠血清GSH-PX、CAT、ET、MPO含量的影响GSG干预后,ET、MPO均有所下降,GSH-PX、CAT含量上升,与模型组比较有显着性差异（p<0.05）,与假手术组比较,模型组心肌细胞凋亡指数显着升高（p<0.05）,西药组及GSG低、高剂量组心肌细胞凋亡指数明显下降（p<0.05）。1.3 GSG对MIRI大鼠心肌组织病理变化的影响假手术组心肌纤维排列较紧密规整,组织间隙水肿较轻微,仅有轻度淤血,周围组织有微量渗出,血管轻度扩张。模型组心肌纤维扭曲断裂,细胞肿胀,组织间隙水肿,细胞核散乱无序,心肌细胞肥大,染色疏松。西药组心肌纤维断裂较少,排列紊乱,心肌间质疏松,心肌间隙血管扩张,周围可见水肿及渗出。中药低剂量组心肌纤维排列较MIRI组规整,组织间隙有水肿渗出,炎细胞浸润。中药高剂量组心肌纤维排列较规整,肌纤维断裂少,组织间隙水肿较轻。2双参通脉颗粒对MIRI大鼠NF-κB信号通路的影响2.1 GSG对血清炎症介质IL-1β、IL-6和TNF-ɑ含量的影响假手术组血清IL-1β、IL-6和TNF-ɑ含量水平升高不明显,模型组IL-1β、IL-6和TNF-ɑ含量增加（p<0.05）,与模型组比较,中药低、高剂量组IL-1β、IL-6和TNF-ɑ含量均显着下降（p<0.05）。2.2 GSG对心肌组织VCAM-1、ICAM-1含量变化的影响假手术组心肌组织可见微少的被染色的细胞;模型组心肌组织被染色的细胞较多,较密集;西药组染色细胞较模型组减少;中药低剂量组染色细胞较模型组减少;中药高剂量组染色细胞最少。ICAM-1含量变化:假手术组心肌组织可见微小的染色组织;模型组心肌组织被染色部位较大,较密集;西药组染色组织较模型组减少;中药低剂量组染色组织较模型组减少;高剂量组染色组织最少。2.3 GSG对大鼠心肌细胞凋亡率的影响假手术组心肌细胞凋亡率为6.12%,模型组心肌细胞凋亡率为32.01%,与假手术组比较有显着差异（p<0.05）;西药组凋亡细胞较模型组减少,25.32%;中药低剂量组细胞凋亡率为7.31%,与模型组比较有显着差异（p<0.05）;中药高剂量组细胞凋亡率为13.45%,与模型组比较有显着差异（p<0.05）。2.4 GSG对MIRI大鼠NF-κB、IκBα蛋白表达的影响与假手术组比较,模型组NF-κB蛋白表达显着升高（p<0.05）,IκBα蛋白表达显着降低（p<0.05）,给予GSG后,GSG低、高剂量组NF-κB蛋白表达均显着降低（p<0.05）,IκBα蛋白表达显着升高（p<0.05）。3双参通脉颗粒含药血清对乳大鼠心肌细胞NF-κB信号通路的影响3.1各组细胞培养液LDH活性改变正常组心肌细胞生长状态良好,心肌细胞培养液LDH活性为93.47U/L,模型组心肌细胞培养液LDH活性为241.54U/L,与正常组比较显着升高（P<0.05）;GSG低剂量组心肌细胞培养液LDH活性为175.02U/L,与模型组比较显着降低（P<0.05）,GSG高剂量组心肌细胞培养液LDH活性为142.77U/L,与模型组比较显着降低（P<0.05）。3.2各组心肌细胞存活率改变正常组心肌细胞存活率为80.65%;模型组心肌细胞存活率42.14%;与正常组相比明显降低（p<0.05）;中药低剂量组心肌细胞存活率为58.32%;与模型组相比显着升高（p<0.05）;高剂量组心肌细胞凋亡率为60.41%,与模型组比较均有显着性差异（p<0.05）。3.3各组心肌细胞凋亡率改变经Annexin V与PI染色后用流式细胞仪进行检测,正常组心肌细胞凋亡率为2.84%,模型组心肌细胞凋亡率为26.62%,与正常组比较有显着性差异（p<0.05）;中药血清低剂量组心肌细胞凋亡率为14.38%,高剂量组心肌细胞凋亡率为6.16%,与模型组比较均有显着性差异（p<0.05）。采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,正常组心肌细胞凋亡率为42.82%,模型组心肌细胞凋亡率值为83.71%,与模型组比较有显着性差异（P<0.05）;中药血清低剂量组心肌细胞AI值为54.21%,与模型组比较有显着性差异（P<0.05）,高剂量组心肌细胞凋亡率值为62.94%,与模型组比较有显着性差异（P<0.05）。3.4各组心肌细胞培养基上清IL-1β、IL-6和TNF-α含量改变与正常组比较,模型组心肌细胞培养基中IL-1β、IL-6和TNF-α含量显着增高（P<0.05）,与模型组比较,中药血清组IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显着降低（P<0.05）。3.5各组心肌细胞内蛋白激酶NF-κB、IκBα、Iκκβ表达改变与正常组比较,模型组心肌细胞绿色荧光强度显着升高,表明NF-κB蛋白激酶表达量增加（P<0.05）,提示NF-κB含量增高;与模型组比较,中药血清处理组绿色荧光强度降低,说明中药GSG含药血清对NF-κB、Iκκβ有抑制作用;对IκBα有增加作用;中药组能降低NF-κB、Iκκβ蛋白激酶表达水平（P<0.05）,升高IκBα蛋白激酶表达水平（P<0.05）。结论:1双参通脉颗粒可以保护缺血再灌注大鼠的心功能,提高各项心功能指标,降低心律失常发生率,减轻心肌细胞氧化损伤。2双参通脉颗粒可以降低NF-κB信号转导通路中的关键炎症介质IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,降低蛋白激酶NF-κB、Iκκβ的表达,升高抑制凋亡蛋白IκBα的表达,降低心肌细胞凋亡率。3双参通脉颗粒含药血清可以降低炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,降低蛋白激酶NF-κB、Iκκβ的含量,升高蛋白激酶IκBα的含量,从而提高大鼠缺氧复氧心肌细胞的存活率,抑制凋亡率。
陈永华[5]（2019）在《基于PERK/eIF2α/CHOP信号通路探讨肝豆灵对WD模型TX小鼠脑血管的保护及对HUVECs铜负荷损伤模型保护机制》文中认为目的本研究以TX小鼠和人脐静脉血内皮细胞（human umbical vein endothelial cells,HUVECs）为研究对象,以体内和体外实验相结合方式,研究中药肝豆灵对肝豆状核变性（Wilson’s disease,WD）患者脑血管的保护机制。阐明WD脑血管损害的机制与内质网应激PERK/e IF2α/CHOP信号通路介导的细胞凋亡有关,中药肝豆灵可过调控内质网PERK/e IF2α/CHOP信号通路抑制细胞凋亡,从而发挥保护WD脑血管损害作用。通过研究肝豆灵保护WD脑血管损害的分子机制,为肝豆灵临床应用提供理论基础和科学依据,为中医药防治WD脑血管损害提供新的思路。通过体内实验观察肝豆灵干预内质网应激PERK/e IF2α/CHOP信号通路对WD模型TX小鼠脑血管的保护作用;并通过体外实验HUVECs模拟脑血管内皮细胞进一步验证肝豆灵通过干预内质网应激PERK/e IF2α/CHOP信号通路对铜负荷后的HUVECs的保护机制;探讨肝豆灵对WD模型TX小鼠脑血管保护的作用机制。方法体内实验——肝豆灵对TX小鼠脑血管保护机制的探讨:48只TX小鼠随机分为模型组、肝豆灵组、青霉胺组、肝豆灵加青霉胺组、另外12只DL小鼠作为对照组。分别观察各组小鼠血清血管损伤因子v WF、TM、ACA的变化;观察各组小鼠的脑血管病理形态变化;选用免疫组化法观察小鼠血管内皮细胞损伤因子ICAM-1、VCAM-1、GRP78表达;选用TUNEL法观察各组小鼠脑血管内皮细胞凋亡情况;选用Western Blot法观察各组小鼠脑组织中内质网应激PERK信号通路关键蛋白表达结果。体外实验——肝豆灵对铜负荷HUVECs保护机制探讨:实验中设计共分为6组,为正常组、对照组、肝豆灵低剂量组、肝豆灵中剂量组、肝豆灵高剂量组、Salubrinal组。流式细胞仪观察肝豆灵对铜负荷诱导的各组HUVECs凋亡的影响;RT-q PCR法观察肝豆灵对铜负荷诱导的各组HUVECs内PERK、p-e IF2α、CHOP m RNA表达的影响;Western Blot法观察肝豆灵对铜负荷诱导的各组HUVECs内PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白表达的影响;比色法观察肝豆灵对铜负荷诱导的各组HUVECs内caspase-3活性的影响。结果体内实验——肝豆灵对TX小鼠脑血管保护机制的探讨:（1）血清血管损伤因子:与对照组比较,模型组小鼠v WF、TM、ACA数值明显升高,有显着统计学差异（P<0.01）;与模型组比较,肝豆灵组v WF、TM、ACA数值均下降,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,青霉胺组v WF、TM、ACA数值有所下降,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,肝豆灵组加青霉胺组v WF、TM、ACA数值明显下降,有显着统计学差异（P<0.01）。（2）脑血管组织病理学改变:与对照组比较,模型组脑血管内皮细胞出现水肿变性,而对照组脑血管内皮细胞未见明显水肿变性,结果表明模型组发生了脑血管的损伤。与对照组相比,GDL组和青霉胺组的病理形态学改变显示脑血管内皮细胞轻度水肿变性。提示肝豆灵和青霉胺对脑血管损伤有改善作用,且肝豆灵和青霉胺联合治疗对WD小鼠脑血管的保护效果最明显。（3）免疫组化法观察内皮细胞损伤因子VCAM-1、ICAM-1、GRP78蛋白表达:对照组DL小鼠脑组织切片未见有明显的VCAM-1、ICAM-1、GRP78阳性染色血管;与对照组相比较,模型组TX小鼠有明显的VCAM-1、ICAM-1、GRP78阳性染色血管,镜下观察到表现为血管壁的棕黄色,有显着性统计学差异（P<0.01）;与模型组相比较,肝豆灵组、青霉胺组VCAM-1、ICAM-1、GRP78阳性染色血管明显减少（P<0.05）;与模型组相比较,肝豆灵加青霉胺组的VCAM-1、ICAM-1、GRP78阳性染色血管表达有显着减少,有显着的统计学差异（P<0.01）。（4）TUNEL法观察内皮细胞凋亡情况结果:对照组DL小鼠脑血管内皮细胞未见有明显的荧光标记;与对照组相比较,模型组有明显的荧光标记,AOD比值有显着性统计学差异（P<0.01）;与模型组相比较,肝豆灵组、青霉胺组荧光标记较模型组有减弱,AOD比值有统计学差异（P<0.05）;与模型组相比较,肝豆灵加青霉胺组的荧光标记有明显的减弱,AOD比值有显着的统计学差异（P<0.01）。（5）Western Blot法观察PERK信号通路关键蛋白表达:对照组DL小鼠脑血管组织未见有明显的PERK、p-e IF2α、CHOP、caspase-12、caspase-3蛋白表达;与对照组比较,模型组PERK、p-e IF2α、CHOP、caspase-12、caspase-3蛋白表达明显升高,有显着性统计学差异（P<0.01）;与模型组比较,肝豆灵组、青霉胺组的PERK、p-e IF2α、CHOP、caspase-12、caspase-3蛋白表达降低,有统计学差异（P<0.05）;与模型组比较,肝豆灵加青霉胺组的小鼠脑血管组织PERK、p-e IF2α、CHOP、caspase-12、caspase-3蛋白表达明显降低,有显着的统计学差异（P<0.01）。体外实验——肝豆灵对铜负荷HUVECs保护机制探讨:（1）流式细胞仪观察HUVECs的凋亡:与正常组相比较,对照组为模拟铜负荷情况下培养HUVECs 24h显着增加HUVECs的凋亡率（P<0.01）。与对照组比较,肝豆灵低、中、高剂量组呈现浓度依赖性的抑制HUVECs的凋亡（P<0.05,P<0.01）,特异性e IF2α磷酸酶抑制剂Salubrinal（30?mol/l）可以显着抑制HUVECs的凋亡（P<0.01）。（2）RT-q PCR观察PERK、p-e IF2α、CHOP m RNA表达:与正常组相比较,对照组为模拟铜负荷情况下培养HUVECs 24h显着增加HUVECs的PERK、p-e IF2α、CHOP m RNA表达（P<0.01）。与对照组比较,肝豆灵低、中、高剂量组呈现浓度依赖性的抑制HUVECs的PERK、p-e IF2α、CHOP m RNA表达（P<0.05,P<0.01）,特异性e IF2α磷酸酶抑制剂Salubrinal（30?mol/l）可以显着抑制HUVECs的p-e IF2α、CHOP m RNA表达（P<0.01）,但对PERK m RNA表达没有干预作用（P>0.05）。（3）Western Blot法观察PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白表达:与正常组相比较,对照组为模拟铜负荷情况下培养HUVECs 24h显着增加HUVECs的PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白表达（P<0.01）。与对照组比较,肝豆灵低、中、高剂量组呈现浓度依赖性的抑制HUVECs的PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白表达（P<0.05,P<0.01）,特异性e IF2α磷酸酶抑制剂Salubrinal（30?mol/l）可以显着抑制HUVECs的p-e IF2α、CHOP蛋白表达（P<0.01）,但对PERK蛋白表达没有干预作用（P>0.05）。（4）比色法观察caspase-3活性:与正常组相比较,对照组为模拟铜负荷情况下培养HUVECs 24h显着增加HUVECs的caspase-3的活性（P<0.01）。与对照组比较,肝豆灵低、中、高剂量组呈现浓度依赖性的抑制HUVECs的caspase-3的活性（P<0.05,P<0.01）,特异性e IF2α磷酸酶抑制剂Salubrinal（30?mol/l）可以显着抑制HUVECs的caspase-3的活性（P<0.01）。结论体内实验:（1）肝豆状核变性模型TX小鼠脑血管存在损伤,血管内皮细胞病理形态发生改变,光镜下内皮细胞不同程度变性及坏死,超微结构发生改变,血管内皮细胞肿胀,同时导致血清中血管损伤因子（v WF、TM、ACA）水平的升高;免疫组化显示血管内皮细胞的损伤因子VCAM-1、ICAM-1表达水平增加。（2）肝豆状核变性模型TX小鼠脑血管存在损伤,血管内皮细胞发生凋亡,并且激活了内质网应激信号通路关键蛋白GRP78的表达。（3）肝豆状核变性模型TX小鼠脑血管内皮细胞凋亡明显增加,内皮细胞中的PERK、p-e IF2α、CHOP、caspase-12、caspase-3蛋白的表达明显增加,提示脑血管内皮细胞的凋亡可能是通过PERK/e IF2α/CHOP凋亡信号通路介导的。（4）肝豆灵能够改善TX小鼠的脑血管损伤,减轻内皮细胞肿胀,降低血清血管损伤因子（v WF、TM、ACA）水平,减少血管内皮细胞中血管损伤因子VCAM-1、ICAM-1)的表达,减少脑血管内皮细胞的凋亡,减少血管内皮细胞中PERK、p-e IF2α、CHOP、caspase-12、caspase-3蛋白的表达,提示肝豆灵是通过干预内质网应激PERK/e IF2α/CHOP凋亡信号通路对肝豆状核变性模型TX小鼠的脑血管起保护作用的。体外实验:（1）铜负荷可使HUVECs产生损伤,使HUVECs发生凋亡,肝豆灵可降低HUVECs的凋亡率,足量浓度的肝豆灵疗效更佳,对HUVECs的保护作用也更明显。（2）铜负荷诱导的HUVECs的凋亡率明显增加,HUVECs内PERK、p-e IF2α、CHOP m RNA的表达及PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表达、caspase-3活性明显增加,因此HUVECs的凋亡可能通过PERK/e IF2α/CHOP内质网应激信号通路介导。（3）肝豆灵能改善铜负荷诱导的HUVECs损伤,降低HUVECs中PERK、p-e IF2α、CHOP m RNA的表达及PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表达,降低caspase-3的活性,提示肝豆灵可能是通过PERK/e IF2α/CHOP内质网应激信号通路抑制血管内皮细胞的凋亡,从而发挥对脑血管内皮细胞的保护作用。
周洁,赵启韬[6]（2014）在《中药保护血管内皮活性成分及作用机制研究》文中指出内皮功能的损伤是多种心血管疾病的始动和关键环节。多种中药成分可明显改善血管内皮功能。黄酮类、生物碱、多酚类等中药成分通过抑制血管内皮细胞凋亡、调节该细胞的氧化应激状态与白细胞的黏附性、调节血管紧张度及血液凝集状态等发挥对血管内皮功能的保护作用。该文总结了近5年来中药保护血管内皮细胞的活性成分及研究进展,期望对该领域的研究提供新思路。
邱丽君[7]（2011）在《大鼠急性血管内皮损伤中PECAM-1与HIF-LA的表达及中药姜黄对其影响》文中认为目的:探讨姜黄煎对大鼠急性血管内膜损伤后早期血清中PECAM-1与HIF-la的表达影响意义,研究血管内皮细胞的损伤及姜黄煎调控内皮细胞凋亡的机制,寻找防治PCI术后“再狭窄”的依据材料与方法:模拟血管内膜损伤术造成大鼠急性血管内膜损伤,术后用姜黄煎对大鼠灌胃治疗,其中姜黄煎干预组36只,生理盐水干预组36只,并与36只假手术组和36只正常组共144只分四组作为对照。组织形态学镜下观察3,7,14天模拟大鼠急性血管内膜损伤后姜黄煎组和各组大鼠血管内膜结构的变化,电镜下观察细胞凋亡情况。应用ELISA法检测144只大鼠血清中PECAM-1与HIF-l的含量进行统计分析。结果:1.姜黄煎组,生理盐水组,假手术组,PECAM-1与HIF-la含量与正常对照组比较差异明显（P﹤0.05）;2.假手术组PECAM-1与HIF-1a水平含量接近于正常对照组,差异不明显（P﹥0.05）;3.姜黄煎组PECAM-1与HIF-la与生理盐水干预组,假手术组比较有明显差异（P﹤0.05）;与正常对照组比较差异不明显（P﹥0.05）。4.光镜观察血管内皮形态改变,可见大鼠动脉球囊损伤后内膜增生在术后早期（3-7天）就已达到高峰,姜黄煎组可抑制内膜增厚。电镜观察姜黄煎组减少细胞凋亡。结论:1.姜黄煎可上调大鼠HIF-1a表达,使PECAM-1的表达明显下降,说明HIF-1a过量表达,PECAM-1/HIF-1a的比值增大,能抑制内皮细胞过度凋亡。二者的比例是决定细胞是否发生凋亡的重要调控因素。2.PECAM-1与HIF-la参与了再狭窄的病理生理变化。3.检测患者血清PECAM-1与HIF-la含量的异常变化,可能有助于评估血管损伤后凋亡因子对血管内皮功能和结构的影响。4.光镜电镜观察模拟血管内膜损伤术后早期大鼠内皮细胞结构的变化,说明姜黄煎对血管内皮有保护作用。
唐丹丽[8]（2009）在《温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注损伤NF-κB信号转导通路调控机制研究》文中指出近年来研究表明,心肌缺血再灌注损伤的主要机制之一是过度的炎症反应,在心肌缺血再灌注损伤的过程中炎性细胞因子大量释放并发挥重要的作用。而NF-κB信号转导通路参与介导细胞增殖、炎症、凋亡等多种生理过程,对于心肌缺血再灌注损伤的发生、发展具有关键作用。因此,本研究以心肌缺血再灌注损伤中炎症反应过程为研究主线,NF-κB信号转导通路为切入点,以温阳益心活血化痰法为干预手段,从细胞及分子生物学水平揭示温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注损伤的抗炎效应及作用靶点,为优化治疗方案,提高临床疗效提供实验依据。目的:探讨温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注后NF-κB信号转导通路的干预作用,明确本法对心肌缺血再灌注炎症损伤的具体作用靶点,阐明其抗炎作用机理。方法:通过结扎大鼠心脏左前降支动脉建立心肌缺血再灌注损伤动物模型,运用透射电镜观察心肌组织超微结构改变;全自动分析仪连续监测法检测大鼠血清LDH-L、CK水平;免疫印迹（western-blot）法检测心肌NIK、IKKβ、IκBα蛋白表达;采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）及免疫组化法检测心肌NF-κBp65mRNA及蛋白表达;酶联免疫吸试验（ELISA）测定血清IL-1β、IL-6及IL-10的含量;利用免疫组化方法观察心肌TNF-α和ICAM-1蛋白表达。结果:①温阳益心活血化痰法指导下创立的温心方可以显着改善心肌超微结构损伤,抑制LDH-L、CK的生成和释放,降低再灌注后心律失常发生率,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用;②温心方能够抑制再灌注后心肌NIK、IKKβ表达,并同时上调IκBα蛋白表达,与模型组比较有显着性差异（P＜0.01）;③温心方能明显抑制心肌NF-κBp65mRNA及蛋白表达,阻止其核移位,与模型组相比统计学有显着性差异（P＜0.01）;④温心方能显着降低NF-κB调控的下游炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α、ICAM-1的含量,并促进抑炎因子IL-10的表达,各项指标与模型组相比均有显着性差异（P＜0.01）,且低剂量组明显优于高剂量组。结论:温阳益心活血化痰法能够抑制血清心肌酶CK、LDH的生成和释放、降低再灌注后心律失常发生率、减轻心肌超微结构损伤,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。而其所具备良好的抗再灌注后炎症损伤作用,可能是通过抑制NF-κB信号转导通路上游激酶的活化,从而阻止NF-κB核移位,下调其转录调控的炎性因子表达,同时促进抑炎因子释放而实现的。
吴士珍[9]（2009）在《通心络对动物缺氧耐受力及血管内皮功能影响的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:缺氧是临床上许多疾病所共有的一个基本病理过程,是心脑血管疾病最常见的损伤因素,宗气由自然界之清气和脾胃运化的水谷精气相结合而成,长期吸入天之清气（氧气）不足可以导致宗气虚证的发生。本研究从缺氧与中医宗气虚相关性切入,探讨益气通络方通心络对急、慢性缺氧动物机体耐受力及血管内皮功能的影响,并初步阐明其作用机制,为其有效防治缺氧及以缺氧为病理基础的循环系统疾病提供实验依据。方法:1通心络对急性和慢性缺氧动物耐受力的影响1.1实验一通心络对急性缺氧小鼠存活时间的影响。健康KM种小鼠40只按体重随机分为急性缺氧组（对照组）、通心络大、中、小剂量组,每组10只。通心络各用药组小鼠按0.1ml/10g体重分别给予通心络超微粉（分别为1.52、0.76、0.38g生药/kg）连续灌胃给药3天;急性缺氧组小鼠则灌胃等体积生理盐水。于末次灌胃给药后1h后,将小鼠放入盛有5g钠石灰的广口瓶,闭密瓶口,记录小鼠存活时间。1.2实验二通心络对慢性缺氧大鼠血气分析指标的影响。清洁级雄性Wistar大鼠40只按体重随机分为空白对照组、缺氧模型组、通心络大、小剂量组,每组10只。缺氧模型组大鼠置于自制常压低氧舱内,舱内氧体积分数维持在（10.0±0.5）%,每天7h,每周6天。通心络各用药组在缺氧模型组的基础上,于实验开始按1ml/100g体重给予通心络超微粉混悬液灌胃（分别为1.2g生药/kg和0.6g生药/kg）。实验共计5周。实验结束后,应用血气分析仪测定各组大鼠动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、氧分压（PaO2）及血氧饱和度（SaO2）。2缺氧大鼠血管内皮功能的变化及通心络的干预作用实验动物、分组、造模方法同实验二,实验结束后光镜观察胸主动脉内膜病理学变化,透射电镜观察主动脉组织内皮细胞（EC）超微结构变化;放免法检测血浆内皮素（ET）,硝酸还原酶法间接检测血清一氧化氮（NO）,双抗夹心ELISA法测定血管性假性血友病因子（vWF）。3缺氧大鼠NEI网络相关指标的变化及通心络的干预作用实验动物、分组、造模方法同实验二,实验结束后检测NEI网络中相关指标的变化:（1）下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴:放免法检测下丘脑组织促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、血清皮质酮（CORT）;（2）交感-肾上腺髓质系统:ELISA法检测血清去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）。应用典型相关分析方法观察NEI网络相关指标与血管内皮功能指标之间的关系,并观察通心络的干预作用。结果:1通心络对急性和慢性缺氧动物耐受力的影响1.1一般状况观察刚放入缺氧瓶时小鼠表现很活跃,随着时间延长,小鼠出现躁动不安,呼吸频率加快,随着缺氧程度加深小鼠皮肤变白,唇色发绀,突然间出现惊跳,四肢抽搐,有呼吸暂停的惊厥现象,最后呼吸停止死亡。1.2通心络对急性缺氧小鼠存活时间的影响急性缺氧组、通心络大、中、小剂量组小鼠的存活时间（min）分别为34.61±4.64、47.83±4.74、43.67±9.36、44.14±7.66。与急性缺氧组比较,通心络各用药组小鼠存活时间明显延长（P<0.01）,但各组间比较无显着差异（P>0.05）。1.3通心络对慢性缺氧大鼠动脉血气分析指标的影响与空白对照组比较,缺氧模型组大鼠动脉PaO2显着下降,统计学有显着性差异（P<0.05）PaCO2和SaO2与空白对照组比较无显着性差异（P>0.05）。与缺氧模型组比较,通心络各用药组PaO2明显升高（P<0.05）,PaCO2和SaO2与缺氧模型组比较无明显变化（P>0.05）。2缺氧大鼠血管内皮功能的变化及通心络的干预作用2.1光镜显示空白对照组:内膜、中膜、外膜形态基本正常,结构完整。缺氧模型组:内皮细胞肿胀、分布不均匀、密度增加或减少,内膜增厚、内膜内有炎细胞浸润、内弹力板有断裂;平滑肌细胞排列紊乱、水肿,弹力纤维变薄。通心络大剂量组:内皮细胞肿胀,内弹力板基本完整;平滑肌细胞轻度水肿,弹力纤维变薄。通心络小剂量组:内皮细胞形态基本正常、密度增加或减少,内弹力板基本完整;平滑肌细胞排列紊乱、水肿,弹力纤维变薄。2.2电镜显示空白对照组:内皮细胞形态规则,连接紧密,基底膜完整,细胞核及细胞器存在,线粒体结构无异常。缺氧模型组:线粒体大部分嵴和少部分膜融合、消失,粗面内质网有脱颗粒现象,吞饮小泡数量减少。通心络大剂量组:线粒体部分嵴和膜融合消失,粗面内质网有脱颗粒现象。通心络小剂量组:线粒体部分嵴和膜融合、消失,有脱颗粒现象,吞饮小泡数量减少。2.3血管内皮相关生化指标的变化与空白对照组比较,缺氧模型组大鼠血浆ET-1与vWF明显增加,血清NO含量显着下降,具有显着性差异（P<0.01）;与缺氧模型组比较,通心络大、小剂量组大鼠血浆ET-1与vWF明显降低（P<0.01）;通心络大、小剂量组大鼠血清NO明显升高（P<0.01或P<0.05）。3缺氧大鼠NEI网络相关指标的变化及通心络的干预作用3.1下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的变化与空白对照组比较,缺氧模型组大鼠下丘脑组织中CRH含量明显减少（P<0.01）;血浆ACTH及血清CORT含量明显升高（P<0.01）。与缺氧模型组比较,通心络大、小剂量组CRH含量明显升高（P<0.01）;血浆ACTH和血清CORT含量显着降低（P<0.01或P<0.05）。3.2交感-肾上腺髓质系统的变化与空白对照组比较,缺氧模型组大鼠血清肾上腺素（E）及去甲肾上腺素（NE）水平明显升高（P<0.01或P<0.05）。与缺氧模型组比较,通心络大剂量组血清肾上腺素（E）水平显着下降（P<0.01）,但通心络小剂量组无明显变化;通心络大、小剂量组血清去甲肾上腺素（NE）水平显着下降,统计学有显着性差异（P<0.01）。结论:1通心络可明显延长急性缺氧条件下小鼠的存活时间,提高慢性缺氧条件下大鼠的血氧分压,表明通心络可提高动物的缺氧耐受力。2缺氧可明显导致大鼠血管内皮损伤与功能障碍,通心络可显着改善受损的血管内皮功能。3缺氧状态下存在机体全身性NEI网络稳态机制失调,主要表现在交感-肾上腺髓质系统和下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能亢进。典型相关分析显示缺氧大鼠血管内皮功能相关生化指标与NEI网络相关因子密切相关,提示NEI网络功能紊乱可能是缺氧状态下血管内皮损伤的机制之一。4通心络改善缺氧状态下血管内皮功能作用机制与调节下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴以及交感-肾上腺髓质系统失衡有关。
朱海燕[10]（2008）在《黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤粘附分子表达及调控的研究》文中提出背景心肌缺血再灌注损伤是临床上冠心病急性心肌梗死再灌注治疗中的难题。目前认为,心肌缺血再灌注损伤属于类炎症反应,白细胞与血管内皮细胞之间的粘附是造成再灌注后心脏微血管“无复流现象”及心肌损伤发生的主要原因。动物实验发现,黄芪多糖具有较好的抗心肌缺血再灌注损伤的作用,但有关其对心脏再灌注损伤过程中细胞粘附分子表达及白细胞与内皮细胞粘附的影响未见报道。目的从细胞粘附分子的蛋白、基因表达及其转录调控的角度,观察黄芪多糖对心脏微血管内皮与中性粒细胞（PMN）的粘附作用,探讨黄芪多糖抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法1人心脏微血管内皮细胞（HCMEC）的培养:经过对HCMEC的复苏、培养、传代,建立稳定的细胞实验平台。2黄芪多糖对正常培养的HCMEC的细胞增殖实验:通过MTT法检测细胞活性变化,观察正常培养下的HCMEC经不同浓度、不同时间的黄芪多糖处理后细胞的增殖情况,以确定安全有效的实验用药浓度。3 HCMEC缺血再灌注损伤模型的建立:以缺氧缺糖模拟缺血,复氧复糖模拟再灌注,通过MTT法比较HCMEC在几种无糖培养基中不同缺氧时间下的存活变化,初步确定HCMEC在此方法下缺氧及再灌注的损伤时间,建立体外HCMEC缺血再灌注损伤模型。4黄芪多糖对缺血再灌注损伤HCMEC与PMN粘附作用的影响:在体外培养的HCMEC缺血再灌注损伤模型的基础上,通过虎红染色法测定粘附的PMN的数量,观察黄芪多糖对上述两种细胞间粘附的影响。5黄芪多糖对HCMEC再灌注损伤ICAM-1、VCAM-1蛋白及基因表达的影响:以免疫细胞化学染色法观察ICAM-1和VCAM-1蛋白表达的变化,并以荧光实时定量PCR法测定ICAM-1和VCAM-1mRNA含量的改变。6黄芪多糖对HCMEC再灌注损伤NF-κB蛋白及基因表达的影响:采用免疫细胞化学染色法观察NF-κB活化时阳性表达核移位的改变;荧光实时定量PCR法定量测定NF-κBmRNA水平的改变。结果1复苏后的HCMEC胞体肥厚、透明,呈菱形或多角形,核小而圆,细胞单层生长,呈铺路石样生长,符合内皮细胞的特征。2 HCMEC经四种不同的无糖造模液培养并缺氧4h、6h、8h后,出现明显损伤（P<0.01）,且缺氧时间越长,OD值越小;再灌16h的D-Hank’s液组和Earle液组,细胞OD值有进一步下降的趋势。3经黄芪多糖干预24h,浓度≥5000μg·mL-1,对正常培养的HCMEC生长具有抑制作用（P<0.05或0.01）;2500μg·mL-1时,对HCMEC的增殖无影响;18.78μg·mL-1～1250μg·mL-1,黄芪多糖可明显促进HCMEC的增殖（P<0.05或0.01）。用25、50、100μg·mL-1的黄芪多糖处理HCMEC4h、6h、8h后,细胞增殖无显着性增加。4 HCMEC单纯缺氧1h、2h,与PMN的粘附有所增加,再灌后6h粘附增加明显,与对照组相比差异显着（P<0.05）;单纯缺氧3h和缺氧3h再灌后6h模型组,内皮细胞与PMN的粘附均降低（P<0.05）。黄芪多糖能降低缺血再灌注损伤后内皮细胞与PMN之间的粘附,其高、中剂量组与模型组比较差异显着（P<0.01）。5黄芪多糖各剂量组均可明显抑制VCAM-1的蛋白表达（P<0.01）,高剂量组还可显着降低ICAM-1的蛋白表达（P<0.05）;黄芪多糖干预后与模型组比,除低剂量组抑制ICAM-1mRNA表达的作用不明显外,其余各组对ICAM-1、VCAM-1基因转录均有明显的抑制作用（P<0.05或0.01）。6光镜下观察,黄芪多糖可显着减少NF-κB的转核活化;荧光实时定量PCR分析,黄芪多糖中剂量组NF-κBp65 mRNA表达量与模型组比较降低明显（P<0.05）。结论1黄芪多糖在一定剂量范围内可适当促进正常培养下的HCMEC增殖,但作用起效较慢。2黄芪多糖对再灌注早期及晚期的细胞粘附都有抑制作用,只是在剂量与效果上有所差异。3黄芪多糖可降低ICAM-1、VCAM-1蛋白和mRNA表达,其中对VCAM-1表达的抑制作用较强。4黄芪多糖可明显减少NF-κB的转核活化,并有效降低NF-κB的基因表达。通过本研究,进一步验证了先前在整体动物研究中得出的黄芪多糖具有抗心肌缺血再灌注损伤的结论,证实黄芪多糖在一定剂量范围内,对体外培养的原代HCMEC缺血再灌注损伤具有保护作用。其作用机制与促进HCMEC的增殖、抑制HCMEC的NF-κB表达及活化,下调ICAM-1、VCAM-1基因和蛋白表达,进而减少与PMN的粘附有关。
二、姜黄素对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、姜黄素对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响（论文提纲范文）
（1）“醒脑开窍”针法对脑缺血损伤血脑屏障通透性的调控作用及对ICAM-1、MMPs-9表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物及饲养条件 |
| 1.2 实验药物及给药方法 |
| 1.3 主要仪器、试剂及其配制方法 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 干预方法 |
| 2.3 实验模型的制备 |
| 2.4 模型评定标准 |
| 2.5 脑组织病理标本的制作 |
| 2.6 指标检测 |
| 2.7 统计处理 |
| 2.8 技术路线图 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 大鼠神经功能缺损评分 |
| 3.2 大鼠EB定量结果分析 |
| 3.3 RT-qPCR检测不同时相ICAM-1mRNA、MMPs-9mRNA的实验结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中医病名及发病机制 |
| 4.2 西医发病机制 |
| 4.3 血脑屏障的生理病理变化 |
| 4.4 .针刺对血脑屏障的调控作用 |
| 4.5 醒脑开窍针法在治疗缺血性脑卒中的作用 |
| 4.6 中风膏对治疗缺血性脑卒中的作用 |
| 4.7 实验结果分析 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 文献综述 缺血性脑卒中时血脑屏障变化及其影响因素 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间获得的科研成果 |
（2）搜风祛痰中药对Hcy诱导的心肌微血管内皮细胞损伤的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 基于网络药理学探讨搜风祛痰中药治疗冠心病的机制研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 搜风祛痰中药含药血清对Hcy诱导的心肌微血管内皮细胞损伤保护作用的量效关系研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的心肌微血管内皮细胞PI3K/Akt信号通路的调控作用研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文四 搜风祛痰中药含药血清对Hcy损伤的心肌微血管内皮细胞IKK/NF-k B信号通路的调控作用研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一:冠状动脉微血管功能障碍研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二:中医学对冠状动脉微血管功能障碍的认识 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（3）搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤血管内皮功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤血管内皮炎症因子的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注血管内皮细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（4）双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠NF-κB信号通路影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠心功能的保护作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 双参通脉颗粒通过NF-κB信号通路对心功能的保护作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 双参通脉颗粒含药血清对乳大鼠心肌细胞模型NF-κB信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（5）基于PERK/eIF2α/CHOP信号通路探讨肝豆灵对WD模型TX小鼠脑血管的保护及对HUVECs铜负荷损伤模型保护机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 肝豆灵片通过PERK/eIF2α/CHOP内质网应激信号通路保护WD模型TX小鼠脑血管损伤 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 检测方法及实验指标 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 实验动物模型及对照药物的选择 |
| 4.2 主要指标的选择意义 |
| 4.3 肝豆灵对TX小鼠脑血管保护的疗效及机制分析 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 肝豆灵片通过PERK/eIF2α/CHOP内质网应激信号通路对铜负荷HUVECs凋亡的抑制作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要实验试剂及仪器 |
| 2.2 细胞株的生物特性及其培养 |
| 2.3 肝豆灵含药血清及硫酸铜培养基的制备 |
| 2.4 实验的设计及分组方法 |
| 2.5 RT-qPCR观察HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP m RNA表达水平 |
| 2.6 Western Blot法观察HUVECs内 PERK、p-e IF2α、CHOP蛋白的表达量 |
| 2.7 比色法进行HUVECs内 caspase-3 活性 |
| 2.8 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs凋亡的影响 |
| 3.2 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP mRNA表达的影响 |
| 3.3 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 PERK、p-eIF2α、CHOP蛋白表达的影响 |
| 3.4 肝豆灵对铜负荷诱导的HUVECs内 caspase-3 活性的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 实验对照药物的选择 |
| 4.2 内质网应激PERK信号通路相关指标选择的意义 |
| 4.3 肝豆灵抑制铜负荷HUVECs凋亡的疗效分析 |
| 4.4 肝豆灵抑制铜负荷HUVECs凋亡的机制分析 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述一 PERK在内质网应激中的作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 脑血管内膜损伤及保护机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（6）中药保护血管内皮活性成分及作用机制研究（论文提纲范文）
| 1 对血管内皮细胞有保护作用的中药活性成分 |
| 1.1 黄酮类 |
| 1.2 多酚类 |
| 1.3 皂苷类 |
| 1.4 生物碱类 |
| 1.5 多糖类 |
| 1.6 苷类 |
| 1.7 苯丙素类 |
| 2 活性成分调节血管内皮细胞功能的作用及机制 |
| 2.1 调节血管细胞的生存能力 |
| 2.2 调节血管内皮细胞炎症因子的表达 |
| 2.3 调节血管的紧张度 |
| 2.4 调节血液凝集状态 |
| 2.5 调节细胞氧化应激状态 |
| 3 小结 |
（7）大鼠急性血管内皮损伤中PECAM-1与HIF-LA的表达及中药姜黄对其影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.细胞上表达及其基因调控 |
| 2.中医基础理论与细胞凋亡 |
| 3.中医对细胞凋亡的作用的研究现状 |
| 4.评价和展望 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 分析讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注损伤NF-κB信号转导通路调控机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 心肌缺血再灌注炎症损伤机制及其防治研究进展 |
| 综述二 心肌缺血再灌注损伤与细胞信号转导 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 第一部分 温阳益心活血化痰法对心肌超微结构的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 第二部分 温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注心律失常发生率及心肌酶学的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 第三部分 温阳益心活血化痰法对NF-κB信号转导通路的影响 |
| 一、温阳益心活血化痰法对NF-κB上游激酶NIK、IKKβ、IκBα的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 二、温阳益心活血化痰法对NF-κB基因及蛋白表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 第四部分 温阳益心活血化痰法对NF-κB调控炎症因子表达的影响 |
| 一、温阳益心活血化痰法对血清IL-1β、IL-6及IL-10的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 二、温阳益心活血化痰法对心肌TNF-α及ICAM-1的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 讨论 |
| 1 温阳益心活血化痰法是治疗心肌缺血再灌注损伤的基本治法之一 |
| 1.1 心阳不足,痰瘀互结是心肌缺血再灌注损伤的主要病机 |
| 1.2 温阳益心活血化痰法的临床应用 |
| 1.3 温阳益心活血化痰复方的组方依据 |
| 2 温阳益心活血化痰法防治缺血再灌注损伤的作用机理 |
| 2.1 心肌缺血再灌注损伤动物模型评价 |
| 2.2 温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注损伤心肌的保护作用 |
| 2.3 温阳益心活血化痰法对MI/RI炎症反应的影响 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
（9）通心络对动物缺氧耐受力及血管内皮功能影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 研究论文 通心络对动物缺氧力及血管内皮功能影响的实验研究 |
| 引言 |
| 第一部分 通心络对急性和慢性缺氧动物耐受力的影响 |
| 前言 |
| 实验一 通心络对急性缺氧小鼠存活时间的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 实验二 通心络对慢性缺氧大鼠血气分析指标的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 缺氧大鼠血管内皮功能的变化及通心络的干预作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 缺氧大鼠NEI 网络相关指标的变化及通心络的干预作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 中药抗缺氧损伤作用的研究进展 |
| 综述二 缺氧与血管内皮损伤的研究进展 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤粘附分子表达及调控的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文对照表 |
| 上篇文献综述 |
| 综述一 粘附分子与心肌缺血再灌注损伤 |
| 参考文献 |
| 综述二 中药治疗心肌缺血再灌注损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 下篇 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 人心脏微血管内皮细胞的培养 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 黄芪多糖对正常培养的人心脏微血管内皮细胞的细胞增殖实验 |
| 第一部分 不同浓度黄芪多糖对正常培养的人心脏微血管内皮细胞增殖的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 第二部分 黄芪多糖干预不同时间对正常培养的人心脏 微血管内皮细胞增殖的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 人心脏微血管内皮细胞缺血再灌注损伤模型的建立 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 黄芪多糖对缺血再灌注损伤人心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞粘附作用的影响 |
| 第一部分 缺血和缺血再灌注损伤对人心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞粘附作用的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 第二部分 黄芪多糖对缺血再灌注损伤人心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞粘附作用的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验五 黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤ICAM-1、VCAM-1蛋白及基因表达的影响 |
| 第一部分 黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤 ICAM-1、VCAM-1 蛋白表达的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 第二部分 黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验六 黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤NF-κB蛋白及基因表达的影响 |
| 第一部分 黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤NF-κB蛋白表达的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 第二部分 黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤NF-κB基因表达的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、姜黄素对缺氧再给氧大鼠心脏微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响（论文参考文献）
- [1]“醒脑开窍”针法对脑缺血损伤血脑屏障通透性的调控作用及对ICAM-1、MMPs-9表达的影响[D]. 康晓文. 甘肃中医药大学, 2021(01)
- [2]搜风祛痰中药对Hcy诱导的心肌微血管内皮细胞损伤的作用机制研究[D]. 肖福龙. 辽宁中医药大学, 2020(01)
- [3]搜风祛痰中药对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的实验研究[D]. 姜丹. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [4]双参通脉颗粒对心肌缺血再灌注大鼠NF-κB信号通路影响的实验研究[D]. 陈卓. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [5]基于PERK/eIF2α/CHOP信号通路探讨肝豆灵对WD模型TX小鼠脑血管的保护及对HUVECs铜负荷损伤模型保护机制[D]. 陈永华. 安徽中医药大学, 2019(02)
- [6]中药保护血管内皮活性成分及作用机制研究[J]. 周洁,赵启韬. 辽宁中医药大学学报, 2014(05)
- [7]大鼠急性血管内皮损伤中PECAM-1与HIF-LA的表达及中药姜黄对其影响[D]. 邱丽君. 辽宁中医药大学, 2011(01)
- [8]温阳益心活血化痰法对心肌缺血再灌注损伤NF-κB信号转导通路调控机制研究[D]. 唐丹丽. 中国中医科学院, 2009(11)
- [9]通心络对动物缺氧耐受力及血管内皮功能影响的实验研究[D]. 吴士珍. 河北医科大学, 2009(10)
- [10]黄芪多糖对人心脏微血管内皮细胞再灌注损伤粘附分子表达及调控的研究[D]. 朱海燕. 北京中医药大学, 2008(01)