一、Modulation of lung inflammation by surfactant and nitric oxide in E coli-induced septic acute lung injury in piglets（论文文献综述）
蒲小燕[1]（2021）在《医学地理视角下高海拔环境对机体肺损伤机制的研究》文中研究指明青海省五分之四以上的地区为高原,高海拔低氧环境是引发高原肺水肿的重要地理环境因素。仅从医学角度分析肺水肿的发生过程,不利于明确地理环境对该疾病的影响;而仅从地理学角度分析肺水肿的诱发因素,又无法深入明确高原肺水肿的发病机制。因此,利用医学研究的相关技术和方法,从医学地理角度分析高原肺水肿的发病机制以及地理环境因子对其的影响,有针对性地找到治疗和预防高原肺水肿的有效药物,是更好地解决高原肺水肿的途径之一。为了明确不同海拔地理环境因子对机体肺功能的影响及其分子机制,并根据肺损伤的分子机制,准确地选择有效的预防药物,本文通过分析青海省海拔相差1 000 m的三个旅游胜地（西宁、门源、玛多）地理环境因子的相关性;以SPF级雄性SD大鼠为研究对象,分析了三个地区的气温、降水量、归一化植被指数、氧含量和海拔等地理环境因子与大鼠动脉血氧分压、氧饱和度、肺动脉压和肺组织含水量的相关性;在4 200 m低氧胁迫不同时间后,应用转录组学方法,筛选差异表达的基因,并进行了验证;应用分子生物学等实验方法,检测了不同海拔各组大鼠肺组织中内质网应激相关蛋白、炎症因子和肺组织细胞凋亡因子的表达;通过构建Fdft 1沉默的sh-Fdft 1腺病毒载体和阴性对照载体,利用腺病毒载体和维生素D3对大鼠进行预处理后,研究低氧对它们的血氧分压、血氧饱和度和肺动脉压、肺组织含水量变化以及肺组织细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。研究结果表明,（1）大气中氧浓度与温度、归一化植被指数呈强正相关性（r值分别为0.967,1.000）,与海拔呈强负相关性（r=-0.994）,海拔每上升1 000m,气压下降10 Kpa,氧浓度下降约28 g/m3。（2）在4 200 m低氧环境中,持续低氧胁迫导致肺动脉压极显着升高（P<0.01）,和氧饱和度极显着下降（P<0.01）,肺组织中抗氧化酶（GSH-Px和SOD）活力极显着下降（P<0.01）,丙二醛含量极显着升高（P<0.01）,肺组织含水量极显着升高（P<0.01）,肺组织病理形态损伤明显,大量炎症因子浸润,随着胁迫时间的延长,损伤明显加重;在3 200 m海拔环境中,持续低氧胁迫造成大鼠上述生理和形态学指标轻度改变,损伤较轻;在2 200 m海拔环境中,大鼠以上指标变化不显着（P>0.05）。（3）环境地理因素中,海拔与血氧饱和度呈显着负相关（P<0.05）,海拔与肺含水量和肺动脉压显着正相关（P<0.05）,而空气氧浓度与血氧饱和度显着正相关（P<0.05）,空气中的氧浓度与肺含水量和肺动脉压显着负相关（P<0.05）。（4）转录组测序分析发现,4 200 m低氧损伤的大鼠肺组织差异基因主要富集在免疫、炎症和代谢相关通路中,其中NOD样受体及下游相关信号通路关键基因和类固醇激素合成通路的Fdft 1等基因极显着高表达（P<0.01）;在低氧损伤的大鼠肺组织中,NOD样受体下游p38 MAPK/NF-κB信号通路中的CARD9、MYD88、p-p38 MAPK和p-p65蛋白,以及内质网应激调控蛋白GRP78、PERK、IRE1、ATF6、CHOP和Caspase-12的表达水平显着或极显着升高（P<0.05或P<0.01）;低氧损伤的大鼠肺组织中细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达显着或极显着升高（P<0.05或P<0.01）。（5）沉默Fdft 1后,低氧胁迫导致大鼠血氧分压和血氧饱和度极显着下降（P<0.01）,肺动脉压和肺组织含水量极显着升高（P<0.01）,肺组织中Bcl-2蛋白表达极显着降低（P<0.01）,而PCNA、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达极显着增加（P<0.01）。（6）维生素D3能极显着提高低氧胁迫组和Fdft 1沉默组大鼠血氧分压和饱和度,极显着抑制肺动脉压和肺组织含水量的增加以及肺中PCNA和凋亡相关蛋白表达水平（P<0.01）。上述结果提示,大气中氧浓度与归一化植被指数和温度呈正相关性,与海拔高度呈负相关性,海拔是影响大气氧浓度的最主要因素。随着海拔的升高,大鼠肺组织损伤逐步加重,当海拔升高到4 200 m时可导致大鼠肺动脉高压和高原肺水肿的发生。地理环境因素中,海拔高度是影响肺功能的主要因子。在高海拔环境中,大鼠肺组织中p38 MAPK/NF-κB通路和内质网应激介导的肺上皮细胞凋亡和炎症反应导致高原肺水肿的发生。沉默维生素D3合成过程中的关键基因（Fdft 1）可加剧大鼠低氧性肺动脉高压和高原肺水肿的发生。外源性补充维生素D3对缺氧性肺损伤的发生发展具有显着的预防和保护作用。
王强,林飞,胡召锟,林锦源,黄冰,潘灵辉[2]（2021）在《MaR1治疗脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的效果和机制》文中提出目的探讨Maresin-1（MaR1）治疗脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠的效果和机制。方法将雄性SPF级BALB/c小鼠45只随机分为3组。对照组经口气管插管滴入3 mg/kg生理盐水。LPS组经口气管插管滴入3 mg/kg LPS。MaR1组经口气管插管滴入3 mg/kg LPS,1 h后尾静脉注射1 ng/只MaR1。对比分析3组小鼠肺组织损伤评分、免疫印迹分析小鼠肺组织MAPKs、核因子-κB（NF-κB）蛋白表达,以及氧化应激标记分析3组小鼠肺组织核因子-E2相关因子2（Nrf-2）表达和抗氧化酶的情况。结果与LPS组比较,MaR1组能改善LPS诱导的ALI小鼠肺组织损伤评分（P=0.000）;MaR1组能显着抑制LPS诱导的ALI小鼠MAPKs和p65NF-κB的磷酸化,两组间差异均有统计学意义（P<0.05）;MaR1组通过上调抗氧化酶增加Nrf-2的核转运,两组间差异均有统计学意义（P<0.05）;MaR1组抑制了LPS诱导的ALI模型肺组织中活性氧介导的氧化应激反应,两组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 MaR1治疗小鼠ALI机制可能是通过抑制MAPK和NF-κB的磷酸化,同时活化多种抗氧化酶保护肺组织有关。
徐海博[3]（2021）在《杨梅素对脓毒症相关急性肺损伤保护作用与机制的研究》文中提出
唐欣[4]（2021）在《细胞色素P450 1A1对巨噬细胞中一氧化氮生成的影响》文中研究表明目的:研究细胞色素P450 1A1（CYP1A1）对脂多糖（LPS）诱导的活化巨噬细胞中一氧化氮的生成的影响。方法:1.取10只野生型C57BL/6小鼠,提取并体外培养其原代腹腔巨噬细胞（Peritoneal Macrophages,PMs）,分为LPS 0h对照组、LPS 2h组、LPS 6h组、LPS 12h组（LPS终浓度为10mg/L）,采用实时荧光定量PCR（Real Time quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR）检测PMs中CYP1A1的基因表达情况,采用蛋白质印迹法（Western blot,WB）检测PMs中CYP1A1蛋白的表达情况。探究CYP1A1在LPS诱导的炎性巨噬细胞中的变化。2.构建CYP1A1过表达、表达阴性对照载体的RAW264.7细胞株,分为CYP1A1/RAW组及NC/RAW组,通过倒置荧光显微镜检测增强绿色荧光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP）的表达情况,采用RT-q PCR和WB法验证CYP1A1基因及蛋白是否过表达。3.体外培养CYP1A1过表达、表达阴性对照载体的小鼠巨噬细胞株RAW264.7（分别简写为CYP1A1/RAW、NC/RAW）,分为CYP1A1/RAW+LPS组、NC/RAW+LPS组、CYP1A1/RAW+PBS组、NC/RAW+PBS组,分别用LPS（LPS终浓度为10mg/L）及等体积PBS刺激上述细胞,采用RT-q PCR检测上述细胞中i NOS的基因表达情况,采用Griess法检测细胞培养上清中一氧化氮（Nitric Oxide,NO）的水平,采用WB检测诱导型一氧化氮合酶（inducible Nitric Oxide Synthase,i NOS）蛋白表达以及激活蛋白-1（Activator Protein-1,AP-1）磷酸化水平情况。探究CYP1A1对LPS诱导巨噬细胞生成NO的影响作用。4.取小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞传代培养,分为单独LPS刺激组（LPS终浓度为10mg/L）、单独12（S）-羟基二十碳四烯酸[12（S）-Hydroxyeicosatetraenoic acid,12（S）-HETE]刺激组[12（S）-HETE终浓度为100 nmol/L]、LPS+12（S）-HETE刺激组以及空白对照组,采用RT-q PCR检测上述组别细胞中i NOS的m RNA表达,采用Griess法检测细胞培养上清中NO含量,观察CYP1A1对LPS诱导巨噬细胞生成NO的影响是否与12（S）-HETE有关。5.构建并鉴定过表达CYP1A1基因且突变CYP1A1羟化酶活性位点的RAW264.7细胞株（CYP1A1mutant/RAW简写为CYP1A1m/RAW）。体外培养CYP1A1/RAW及CYP1A1m/RAW细胞,将其分为CYP1A1m/RAW+LPS组、CYP1A1/RAW+LPS组、CYP1A1m/RAW空白组、CYP1A1/RAW空白组,分别给予或不给予LPS（LPS终浓度为10mg/L）刺激,完毕后检测细胞中i NOS的m RNA表达及细胞培养上清中NO含量。观察CYP1A1羟化酶活性是否参与其对LPS诱导巨噬细胞中NO生成的调控。结果:1.与LPS 0h对照组比较,LPS 6h及12h组PMs细胞中CYP1A1 m RNA表达显着升高,CYP1A1的蛋白水平也相应增强,说明LPS诱导的活化巨噬细胞中CYP1A1表达水平明显上调。2.获得稳定过表达CYP1A1的RAW264.7细胞株后,用倒置荧光显微镜观察显示转染成功,同时RT-q PCR和WB的检测结果表明,在相同的时间点,与NC/RAW组细胞相比,CYP1A1/RAW组细胞的CYP1A1 m RNA和蛋白水平均显着升高。3.与NC/RAW+LPS组相比,CYP1A1/RAW+LPS组细胞中i NOS m RNA的表达水平及NO的生成水平均显着增加,与此同时,细胞中AP-1磷酸化水平和i NOS蛋白水平也显着增强,提示CYP1A1可能通过活化AP-1/i NOS通路以促进NO的生成。4.单独给予LPS或LPS联合12（S）-HETE刺激RAW264.7细胞株后,与单独LPS刺激组相比,LPS+12（S）-HETE刺激组细胞中i NOS的m RNA表达和NO的生成并无统计学差异,说明CYP1A1对巨噬细胞生成NO的调控作用与其致炎代谢产物12（S）-HETE无关。5.CYP1A1m/RAW细胞较CYP1A1/RAW细胞中CYP1A1羟化酶活性显着降低,与CYP1A1/RAW+LPS组相比,CYP1A1m/RAW+LPS组中i NOS的m RNA表达及NO的生成无显着差异,说明CYP1A1对NO的调控也不是通过其羟化酶活性而实现。结论:1.LPS可使巨噬细胞中CYP1A1表达水平显着上调。2.CYP1A1过表达可能通过AP-1/i NOS通路促进LPS诱导时巨噬细胞中NO的生成。3.CYP1A1对于巨噬细胞生成NO的调控作用与CYP1A1羟化酶活性及其致炎代谢产物12（S）-HETE无关。
孔德峰[5]（2021）在《miR-34a-5p调控网络在急性肺损伤巨噬细胞极化中的作用机制》文中研究指明
蓝嘉欣[6]（2021）在《宣肺调肠方改善脓毒症ARDS患者毛细血管渗漏指数的疗效观察》文中研究说明
郑璐[7]（2021）在《扶芳藤提取物及主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤的作用及机制研究》文中研究表明研究背景:本课题组前期对扶芳藤进行粗提并对其抗炎能力进行初步筛选,结果显示,在体外LPS诱导的RAW264.7细胞实验中,粗提的扶芳藤能够抑制各种炎性因子,具有明显的抗炎活性;在体内二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀实验中,粗提的扶芳藤对小鼠耳肿胀也有一定的抑制作用,表明扶芳藤粗提物体内体外有一定的抗炎作用。本文在前期实验结论的基础上进一步研究扶芳藤粗提物对抗LPS诱导的急性肺损伤活性,并对扶芳藤进行不同极性萃取,深入探寻其抗急性肺损伤的活性成分和作用机制。目的:本课题旨在从体内和体外评价扶芳藤提取物的主要抗炎活性成分对巨噬细胞和A549细胞的影响,并初步探讨扶芳藤主要有效活性单体调控巨噬细胞和A549细胞的潜在作用机制。方法:第一部分中药扶芳藤提取物、主要活性成分以及各萃取物对炎症反应的影响1.建立小鼠急性肺损伤模型测定扶芳藤乙醇提取物高、中、低剂量组对LPS所致小鼠急性肺损伤的影响。2.MTT法检测扶芳藤乙醇提取物以及乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物对RAW264.7细胞活力的影响。3.Griess法检测扶芳藤乙醇提取物以及乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO产量的影响。4.ELISA法测定扶芳藤乙醇提取物以及正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物和石油醚提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌IL-6和TNF-α的影响。5.高效液相色谱法检测正丁醇提取物所含的主要活性成分,以及所含主要活性成分的含量。第二部分中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞的影响及机制探究1.MTT法检测甜醇对RAW264.7细胞活力的影响。2.Griess法检测甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌NO的影响。3.ELISA法测定甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌IL-6和TNF-α的影响4.RT-PCR检测甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞Myd88、TLR4、TRIF、NF-κB p65、iNOS、COX-2、IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达的影响。5.Western-blot检测甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞分泌TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白表达的影响。6.免疫荧光法检测甜醇对LPS诱导的RAW264.7细胞NF-κB p65核转位的影响。第三部分中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的A549细胞的影响及机制探究1.MTT法检测甜醇对LPS诱导的A549细胞活力的影响。2.Griess法检测甜醇对LPS诱导的A549细胞分泌NO产量的影响。3.RT-PCR检测甜醇对LPS诱导的A549细胞Myd88、TLR4、TRIF、NF-κB p65、iNOS、COX-2、IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA表达的影响。4.Western-blot检测甜醇对LPS诱导的A549细胞分泌TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白表达的影响。5.免疫荧光法检测甜醇对LPS诱导的A549细胞NF-κB p65核转位的影响。第四部分中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤中的抗炎作用及其作用机制研究1.ELISA法检测甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响。2.肺湿质量/干质量（W/D）比值检测甜醇对LPS诱导的小鼠急性肺损伤肺组织干湿比的影响。3.BCA及细胞计数法检测甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤BALF中总蛋白浓度和细胞渗出数的影响。4.HE染色检测甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠的肺部组织炎症反应影响。5.Western-blot法检测甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠肺组织细胞中TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白表达的影响。6.免疫荧光法检测甜醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠NF-κB p65核转位的影响。结果:1.中药扶芳藤提取物可显着降低LPS诱导小鼠急性肺损伤肺组织匀浆中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平;可显着降低LPS诱导RAW264.7细胞NO及IL-6的分泌。2.中药扶芳藤中单体甜醇、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物在0～50μmol·L-1浓度下对RAW264.7细胞无明显毒性（P﹤0.05）;甜醇在1～25μmol·L-1时,对A549细胞无明显毒性（P﹤0.05）。因此,RAW264.7细胞选用的浓度为10μmol·L-1、25μmol·L-1和50μmol·L-1;A549细胞选用的浓度为1μmol·L-1、10μmol·L-1和25μmol·L-1。3.扶芳藤乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌的NO、IL-6和TNF-α有显着的抑制作用。4.HPLC表明扶芳藤中甜醇的含量为2.915%,甜醇在乙酸乙酯提取物含量为2.6%,在正丁醇提取物含量为4.6%。在正丁醇提取物中含量最高,与正丁醇提取物抗LPS诱导的急性肺损伤效果最显着相呼应,推测甜醇是主要活性的成分之一。5.甜醇抑制LPS诱导的RAW264.7和A549细胞分泌NO。6.甜醇抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白的表达。7.甜醇抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β、TRIF、TLR4、Myd88和NF-κB p65的mRNA的表达。8.甜醇抑制LPS诱导的A549细胞iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β、TRIF、TLR4、Myd88和NF-κB p65 mRNA的表达;同时,甜醇抑制细胞对TLR4、Myd88、TRIF和NF-κB p65蛋白的表达。9.扶芳藤中主要活性成分甜醇从病理学角度上明显改善LPS诱导的急性肺损伤小鼠的肺组织的炎性浸润,显着减轻了小鼠肺组织病理状态,改善组织充血的现象,还可以减轻小鼠肺组织渗出物的分泌,肺泡中出血状态减轻,红色变异区域也随之减少,表明小鼠的急性肺损伤状况得到改善,炎症区域普遍缩小,抑制炎症的发生发展,甜醇起到了明显改善小鼠急性肺损伤的作用。结论:1.扶芳藤粗提物高中低剂量在体外实验中,对炎症反应有显着的抑制作用;扶芳藤乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物均对炎症反应有显着的抑制作用,且正丁醇提取物活性最高。2.扶芳藤不同提取物均含有甜醇,且正丁醇提取物中甜醇含量最高,证明甜醇是扶芳藤中主要抗炎活性成分之一。3.甜醇对LPS诱导的RAW264.7和A549细胞的炎症反应有显着的抑制作用。4.甜醇抑制RAW264.7和A549细胞的TLR4-NF-κB p65信号通路。5.扶芳藤中主要活性成分甜醇通过抑制TLR4-NF-κB p65通路发挥抗炎作用,从而对LPS诱导的急性肺损伤小鼠具有保护作用。
贺思诺[8]（2021）在《基于TLR4/NF-κB通路探讨SDR9C7基因在急性肺损伤模型中作用机制》文中提出研究目的:为研究急性肺损伤模型小鼠肺组织Sdr9c7基因在急性肺损伤中的作用,我们利用脂多糖诱导C57BL/6小鼠（SPF级）建立急性肺损伤模型,检测了急性肺损伤模型小鼠肺组织Sdr9c7基因、炎症因子及TLR4/NF-κB通路表达差异。利用A549细胞验证敲低SDR9C7基因表达对炎症因子及TLR4/NF-κB通路表达的影响,初步探讨它们之间的联系及作用机制,为阐明SDR9C7参与急性肺损伤发病机制提供一定参考。研究方法:选取9只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、第3天组和第7天组,每组3只。第3天组和第7天组小鼠用LPS诱导急性肺损伤模型,第3天组于LPS诱导的第3天终止实验,第7天组于LPS诱导的第7天终止实验,空白组经鼻腔滴注PBS溶液作对照实验。采用HE染色观察小鼠肺组织形态学,并评估病理评分;用Western Blot检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白相对表达量;用RT-qPCR检测肺组织IL-1β、TNF-a、IL-6和SDR9C7基因相对表达量。利用A549细胞转染SDR9C7-siRNA,RT-qPCR检测SDR9C7基因相对表达量,验证SDR9C7-siRNA敲低SDR9C7基因表达的效果。SDR9C7-siRNA转染A549细胞为敲低组,脂多糖诱导A549细胞为诱导组,SDR9C7-siRNA转染和脂多糖诱导A549细胞分联合组,设立对照组,采用Western Blot检测A549细胞TLR4、MyD88、NF-κB蛋白相对表达量;用RT-qPCR检测A549细胞IL-1β、TNF-a、IL-6和SDR9C7基因相对表达量。研究结果:（1）HE染色结果显示,LPS诱导的ALI模型小鼠表现出明显的病理损伤,与空白组比较,第3天组和第7天组肺水肿评分、炎症评分以及总病理评分升高;与第3天组比较,第7天组炎症评分和总病理评分降低,差异均有统计学意义（均P<0.05）。（2）与空白组比较,第3天组和第7天组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白相对表达量均明显升高,且第3天组高于第7天组,差异均有统计学意义（均P<0.01）。（3）与空白组比较,第3天组和第7天组SDR9C7、IL-1β、TNF-a和IL-6基因相对表达量均明显升高,第3天组SDR9C7、IL-1β、TNF-a基因相对表达量高于第7天组,第3天组IL-6基因相对表达量低于第7天组,差异均有统计学意义（均P<0.01）。（4）小鼠肺组织SDR9C7基因相对表达量与病理评分呈正相关（r=0.964,P<0.01）。（5）SDR9C7基因表达在空白对照、SDR9C7-siRNA1、SDR9C7-siRNA2和SDR9C7-siRNA3中依次降低,SDR9C7-siRNA3敲低SDR9C7基因表达效果更明显。（6）与对照组比较,诱导组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白相对表达量升高（均P<0.05）,敲低组和联合组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白相对表达量下降（均P<0.05）,且敲低组低于联合组（均P<0.05）。（7）与对照组比较,诱导组IL-1β、TNF-a、IL-6、SDR9C7基因相对表达量升高（均P<0.05）,敲低组和联合组IL-1β、TNF-a、IL-6、SDR9C7基因相对表达量下降（均P<0.05）,且敲低组低于联合组（均P<0.05）。结论:本研究发现ALI模型小鼠肺组织SDR9C7基因、炎症因子及TLR4/NF-κB通路异常表达,SDR9C7-siRNA3有效敲低A549细胞SDR9C7基因表达,降低IL-1β、TNF-a、IL-6基因及TLR4/NF-κB通路的表达。LPS诱导小鼠ALI机制可能与SDR9C7基因高表达促进炎症反应作用及活化TLR4/NF-κB通路相关。
贾珊珊[9]（2021）在《基于整合大数据的热毒宁注射液治疗病毒感染性疾病上市后评价研究》文中提出研究背景及目的热毒宁注射液是由青蒿、金银花、栀子三味中药提取精制的中药注射剂,具有疏风、清热、解毒之功,临床主要用于上呼吸道感染的治疗。目前关于热毒宁注射液治疗上呼吸道感染的临床研究较多,但存在样本量小,结局指标不统一等问题。热毒宁注射液临床还被用来治疗流感、手足口病,对新型冠状病毒肺炎,热毒宁注射液也具有一定疗效。然而由于其多成分、多靶点的特点,它的作用的分子机制尚不明确。故本研究应用Meta分析的方法对在常规治疗基础上使用热毒宁注射液与利巴韦林治疗上呼吸道感染的临床疗效以及安全性进行了评价,以为临床应用提供更为稳定的循证医学证据;应用芯片分析方法对甲型H3N2流感有症状感染患者对比健康状态的差异基因进行了分析,并通过网络药理学方法对热毒宁注射液治疗流感及其甲型H3N2分型、新型冠状病毒肺炎、手足口病的分子机制进行预测,利用分子对接对结果进行初步检验,以期为之后的机制研究试验提供方向。研究方法1.Meta分析全面、系统的检索中国知网、万方数据库、维普数据库、SinoMed、PubMed、Embase、the Cochrane Library与Web of Science数据库的热毒宁注射液对比利巴韦林治疗上呼吸道感染的随机对照试验。根据纳入排除标准严格筛选文献并提取纳入文献信息,结局指标包括临床疗效、平均退热时间、疱疹消失时间、鼻塞流涕消失时间、咽部充血消失时间、咳嗽停止时间。应用Cochrane Handbook5.1推荐的“偏倚风险评估”工具对文献进行质量评估,运用RevMan 5.3和Stata 13.0对纳入数据进行分析,绘制森林图并进行敏感性与漏斗图及发表偏倚分析,对不良反应信息进行记录总结。2.芯片分析方法从GEO数据库中检索并下载甲型H3N2流感感染患者基因表达谱芯片数据集。对基因进行感染前后有无症状分组,使用R软件的limma包分析各组差异基因,绘制韦恩图以观察各组间关系。对有症状感染患者与健康人的差异基因进行相关性分析,将差异基因导入STRING网站或HINT网站进行蛋白互作分析,将结果导入Cytoscape软件作图,通过MCODE与cytoHubba插件对蛋白互相网络图进行模块分析与核心基因分析,并采用R软件的clusterProfiler包对蛋白互作网络中差异基因进行GO与KEGG分析。之后利用网络药理学方法对热毒宁注射液对差异基因以及甲型H3N2流感相关其他基因的作用进行进一步预测。3.网络药理学方法系统、全面检索关于热毒宁注射液的化学成分的中英文文献,获取热毒宁注射液化学成分。通过检索文献、SwissTargetPrediction、STITCH与SuperPred以获得化合物靶点,检索DisGeNET、GeneCards、DiGSeE以获得与疾病相关的基因。运用Cytoscape进行“化合物-靶点”网络图、“疾病-靶点”网络图的绘制。利用Merge插件对化合物以及疾病的靶点进行取交集以获得潜在靶点。通过STRING数据库获取蛋白之间相互作用关系。通过Cytoscape的MCODE以及cytoHubba插件对蛋白互作网络进行模块分析以及核心基因分析,得到热毒宁注射液可能作用于疾病的核心基因。采用DAVID及R软件的clusterProfiler对蛋白互作网络与潜在靶点进行GO与KEGG富集分析以及疾病聚类分析以获取热毒宁注射液治疗疾病的潜在途径。应用AutoDock Vina软件对关键化合物以及靶点进行分子对接分析,对化合物以及靶点的结合能力进行评估与验证,通过PyMOL软件进行可视化。研究结果1.热毒宁注射液治疗急性上呼吸道感染的Meta分析共纳入118篇研究,包括15461名患者。Meta分析结果显示,常规治疗基础上使用热毒宁注射液在临床疗效、平均退热时间、疱疹消失时间、鼻塞流涕消失时间、咽部充血消失时间、咳嗽停止时间六个结局指标的疗效均优于使用利巴韦林,差异具有统计学意义（P<0.00001）。安全性分析结果显示热毒宁注射液不良反应发生率更低（P<0.00001）,且症状较轻。2.基于网络药理学的热毒宁注射液治疗流感机制研究对“化合物-靶点”网络图与“疾病-靶点”网络图进行合并取交集共得到8个热毒宁可能作用于流感的潜在靶点,CXCL10、CCL2、IL6、STAT1、PTPN11、TNF、BRAF和MMP9。GO富集分析结果显示潜在靶点主要富集于生物过程“ERK1和ERK2级联正调控”和“细胞对脂多糖的反应”。KEGG结果表明潜在靶点主要通过“TNF信号通路”、“甲型流感”和“单纯疱疹病毒感染”三条通路。分子对接结果显示,所有化合物与靶点均有良好的对接能力。3.基于网络药理学的热毒宁注射液治疗甲型H3N2流感机制研究对GSE30550芯片进行分析,有症状感染组对比健康组差异存在48个上调基因,其中,XAF1、IFI44L、RSAD2、OAS1、MX1、IFIT2、OAS2、IFIT3、IFIT1 和 IFI44 为差异基因PPI网络中的核心基因,明显富集于甲型流感通路。共得到热毒宁注射液可能作用于甲型H3N2流感的潜在靶点8个,分别为LPO、IL1B、EGFR、CCL2、CXCL10、LAP3、PTPN11与CSF2。分子对接结果显示热毒宁注射液相应化合物与靶点结合能力均较好,其中,EGFR与芦丁的结合能力最佳。4.基于网络药理学的热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎作用机制研究热毒宁注射液的化合物靶点中,26个与细胞因子风暴相关,5个与发热相关,251个靶点与ACE2共表达。度值最高的三个靶点分别是CA2、CA12和CA1。在化合物靶点PPI网络中HSP90AB1有着最高的度值。GO富集共得到FDR<1×10-6的条目1491项,KEGG富集分析得到FDR<1×10-6的通路113条,包括18条信号转导通路、12条免疫系统通路、6条细胞生长与死亡相关通路和10条病毒感染性疾病通路。疾病聚类分析的结果中,富集水平最高的聚类7个项目中,3个与肺部疾病相关。富集分析得到3542条GO功能条目和147条KEGG通路。分子对接结果显示热毒宁注射液化合物与新型冠状病毒肺炎靶点PLP、ACE2、Mpro有着较好的结合能力。5.基于网络药理学的热毒宁注射液治疗手足口病作用机制研究共得到130个热毒宁可能作用于手足口病的潜在靶点,热毒宁注射液的化合物作用于 MMP2、CA6、MMP13、ELANE、MMP1、MMP9、EGFR、TYR、ABCB1 和 APP 这十个靶点的化合物较多。但 AKT1、MAPK1、VEGFA、IL6、STAT3、TP53、IGF1、EGFR、HRAS和TNF这十个靶点在靶点的蛋白互作网络中有着核心作用。分子对接结果显示热毒宁注射液与对应的靶点都具有良好的结合能力。研究结论Meta分析结果表明,在常规治疗基础上使用热毒宁注射液对于上呼吸道感染的治疗效果较利巴韦林更好,安全性更高。基于芯片分析以及网络药理学的热毒宁注射液的机制研究结果表明,热毒宁注射液能够通过多个活性成分协同调控多种靶点,对于感染类疾病能调节细胞因子风暴,并通过对于发热相关细胞因子调控达到解热的目的,调节多个靶点与通路共同达到治疗流感、手足口病、新型冠状病毒肺炎的目的。本研究为热毒宁注射液治疗上呼吸道感染提供了大样本的循证医学证据,以供临床借鉴,并为进一步的热毒宁注射液治疗流感、手足口病以及新型冠状病毒肺炎的机制研究提供思路与参考。
董兵[10]（2021）在《人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗严重激素抵抗性哮喘的作用与机制研究》文中研究表明背景:严重激素抵抗性哮喘（Severe steroid-resistant asthma,SSRA）是临床哮喘管理中一个严峻的问题。受影响的患者临床症状严重,生活质量恶化,且对哮喘一线治疗药物类固醇治疗无效,人们迫切需要行而有效的治疗方案。因此深入探讨与了解SSRA的发病机制,将有助于寻找到有效的治疗方案。气道炎症反应是SSRA发病的重要病理表现之一,也是介导疾病发生发展的关键因素。因此减轻气道炎症是控制哮喘症状的核心关键,免疫细胞及其相关的细胞因子在调节气道炎症和气道重塑过程中发挥着重要作用,其中巨噬细胞作为肺组织中最丰富的免疫细胞,参与气道炎症反应的过程。研究显示在不同的条件下,巨噬细胞又可极化为两种类型,即促进炎症反应的M1型,以及主要参与组织损伤修复的M2型。不同极化状态的巨噬细胞将影响气道炎症反应的进展与转归,因此调节巨噬细胞的极化表型可以作为SSRA新的治疗选择。间充质干细胞治疗作为一种可行有效的生物疗法,在免疫调节和组织损伤修复等方面具有显着的作用,其在治疗免疫相关性疾病方向上具有广阔的应用前景。目前研究认为,间充质干细胞的免疫调节作用主要归因于其旁分泌机制。间充质干细胞外泌体（MSC-Exo）作为重要的旁分泌因子,具有其分泌细胞相似的免疫调节功能。并且MSC-Exo比间充质干细胞更适用于临床应用,因为纳米级的外泌体不会出现阻塞肺血管床以及免疫排斥等问题。MSC-Exo通过其强大的免疫调节作用已成为肺部炎性疾病最具有吸引力的治疗候选药物。然而,MSC-Exo如何发挥调节肺部炎症反应的作用,是否可以通过调节巨噬细胞极化从而发挥对SSRA的治疗作用尚不清楚。因此,阐明SSRA的内在免疫病理学机制,并为其临床治疗提供新的医疗策略具有重要的意义。目的:本研究拟探讨MSC-Exo是否能通过调节巨噬细胞极化表型的转变,减轻SSRA肺部炎症反应,并对可能的分子机制进行探究,为其转化应用于临床治疗提供理论支持与实验依据。方法:（1）利用Qiagen exo Easy Maxi Kit从人源脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cell,HUCMSC）培养基上清液中分离出外泌体,并采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和流式细胞术对其进行鉴定。（2）构建OVA/CFA诱导的SSRA小鼠动物模型,进行支气管原位注射MSC-Exo治疗,通过对SSRA小鼠气道肺功能、肺组织病理学以及巨噬细胞极化相关细胞因子水平的检测,评估MSC-Exo对SSRA的治疗作用。（3）通过腹腔注射氯膦酸盐脂质体系统性清除小鼠体内的巨噬细胞,流式细胞术对清除效果进行鉴定,并进一步评估巨噬细胞清除后,MSC-Exo的治疗作用是否被减弱。（4）建立LPS刺激的RAW 264.7细胞的体外炎症模型,与MSC-Exo进行共培养,采用q RT-PCR、ELISA、Western blot、细胞免疫荧光和流式细胞术对M1和M2型巨噬细胞标志物进行检测,进一步探讨了MSC-Exo对巨噬细胞极化的调控作用及其相关机制。（5）采用串联质谱标签（Tandem Mass Tags,TMT）标记的定量蛋白质组学测序技术,检测MSC-Exo调控巨噬细胞极化过程中的蛋白表达谱的变化。（6）通过Western blot对蛋白质组学测序筛选得到的关键蛋白进行验证,并利用si RNA和过表达质粒转染技术进一步验证MSC-Exo作用的关键蛋白在巨噬细胞极化过程中的作用。结果:（1）成功从HUCMSC中分离得到颗粒直径集中于50-150nm之间,表面高表达特异性标志蛋白CD63和CD81,具有典型外泌体特征的圆形脂质双子层结构的碟状囊泡。（2）通过气管内给予MSC-Exo治疗可以有效改善SSRA小鼠的肺功能,减轻肺组织炎症细胞浸润,抑制气道粘液高分泌以及降低肺组织中炎症因子水平。（3）巨噬细胞的系统性清除削弱了MSC-Exo的治疗效果,提示巨噬细胞可能是MSC-Exo发挥免疫调节作用的靶点。（4）在LPS刺激的RAW264.7细胞的体外炎症模型中,发现MSC-Exo能抑制M1型巨噬细胞极化,促进了M2型巨噬细胞极化。（5）通过TMT标记的定量蛋白质组学测序分析,发现肿瘤坏死因子受体相关因子1（tumor necrosis factor receptor–associated factor 1,TRAF1）可能是MSC-Exo调控巨噬细胞极化的关键蛋白,并在体内体外模型中分别进行了验证,实验结果与蛋白质组学测序结果相一致。（6）在LPS刺激的RAW 264.7细胞的体外炎症模型中,利用TRAF1 si RNA和过表达质粒分别转染RAW 264.7细胞,并对相关蛋白通路进行验证,发现MSC-Exo对调控巨噬细胞极化的NF-κB和PI3K/AKT信号通路的影响依赖于TRAF1。结论:1.MSC-Exo能够减轻OVA/CFA诱导的SSRA小鼠模型的肺部炎症反应。2.MSC-Exo是通过巨噬细胞发挥对OVA/CFA诱导的SSRA小鼠肺部炎症反应的抑制作用。3.MSC-Exo可能通过抑制TRAF1调节NF-κB和PI3K/AKT信号通路抑制巨噬细胞向M1型极化,促进其向M2型极化。创新性:1.本研究首次发现MSC-Exo对OVA/CFA诱导的SSRA小鼠模型的治疗作用,补充了MSC-Exo作为SSRA候选治疗药物的开发价值,为制定新型有效的SSRA治疗策略提供了理论基础。2.本研究首次明确了巨噬细胞在MSC-Exo对OVA/CFA诱导的SSRA小鼠模型治疗过程中的重要作用。3.本研究首次明确了MSC-Exo通过抑制TRAF1调节巨噬细胞极化治疗SSRA的分子机制。
二、Modulation of lung inflammation by surfactant and nitric oxide in E coli-induced septic acute lung injury in piglets（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Modulation of lung inflammation by surfactant and nitric oxide in E coli-induced septic acute lung injury in piglets（论文提纲范文）
（1）医学地理视角下高海拔环境对机体肺损伤机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要符号表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 选题背景及意义 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.2.1 医学地理学研究现状 |
| 1.2.2 地理环境对健康的影响研究现状 |
| 1.2.2.1 气候对人体健康的影响 |
| 1.2.2.2 湿度对人体健康的影响 |
| 1.2.2.3 太阳辐射对人体健康的影响 |
| 1.2.2.4 气压对人体健康的影响 |
| 1.2.2.5 年降水量对人体健康的影响 |
| 1.2.3 高原低氧环境对健康的影响研究现状 |
| 1.2.3.1 HAPE临床症状的研究现状 |
| 1.2.3.2 HAPE的发病机制研究现状 |
| 1.2.3.3 HAPE的防治措施研究现状 |
| 1.3 国内外研究中存在问题 |
| 1.4 研究内容 |
| 1.5 技术路线图 |
| 1.6 研究目标及特色创新点 |
| 1.6.1 研究目标 |
| 1.6.2 研究特色创新点 |
| 第二章 研究区自然地理概况及各地理环境因子的相关性 |
| 2.1 青海省地理概况 |
| 2.1.1 气温 |
| 2.1.2 NDVI |
| 2.1.3 降水量 |
| 2.2 研究区环境因素的相关性 |
| 2.2.1 地理因素数据收集 |
| 2.2.2 数据统计与分析 |
| 2.2.3 结果 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.3 小结 |
| 第三章 不同海拔低氧对机体肺功能影响的差异 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.1.1 实验动物 |
| 3.1.1.2 实验试剂 |
| 3.1.1.3 实验仪器 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.1.2.1 动物分组 |
| 3.1.2.2 肺动脉压检测 |
| 3.1.2.3 腹主动脉血氧分压及血氧饱和度检测 |
| 3.1.2.4 肺组织含水量检测 |
| 3.1.2.5 HE染色 |
| 3.1.2.6 透射电镜 |
| 3.1.2.7 肺组织中氧化应激指标检测 |
| 3.1.2.8 数据统计与分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同海拔低氧胁迫大鼠生理指标的差异 |
| 3.2.2 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织含水量的差异 |
| 3.2.3 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织病理形态学差异 |
| 3.2.4 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织超微结构差异 |
| 3.2.5 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织中氧化应激因子的差异 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 大鼠肺损伤与地理环境因子相关性分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 动物分组 |
| 4.1.2 地理环境因子数据收集 |
| 4.1.3 数据统计与分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 腹主动脉氧分压与地理环境因子相关性分析 |
| 4.2.2 氧饱和度与地理环境因子相关性分析 |
| 4.2.3 肺动脉压与地理环境因子相关性分析 |
| 4.2.4 肺组织含水量与地理环境因子相关性分析 |
| 4.2.5 低氧胁迫SD大鼠各项生理指标相关性分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 不同海拔低氧胁迫导致肺损伤的分子机制 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.1.1 实验动物 |
| 5.1.1.2 实验试剂 |
| 5.1.1.3 实验仪器 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.1.2.1 动物分组和建模 |
| 5.1.2.2 组织总RNA提取 |
| 5.1.2.3 转录组测序 |
| 5.1.2.4 差异基因功能注释和分析 |
| 5.1.2.5 RT-PCR实验对差异基因准确性进行验证 |
| 5.1.2.6 蛋白免疫印迹法(Western Blot)对差异蛋白准确性进行验证 |
| 5.1.2.7 原位末端标记法(TUNEL)染色方法 |
| 5.1.2.8 数据统计与分析 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 肺损伤大鼠模型肺组织转录组测序数据 |
| 5.2.1.1 测序数据质量 |
| 5.2.1.2 差异基因筛选 |
| 5.2.1.3 差异基因GO功能注释 |
| 5.2.1.4 差异基因KEGG信号通路富集分析 |
| 5.2.2 关键通路关键节点基因的筛选及验证 |
| 5.2.3 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织p38 MAPK/NF-κB表达差异 |
| 5.2.4 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织炎症因子表达量的差异 |
| 5.2.5 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织内质网应激的差异 |
| 5.2.6 不同海拔低氧胁迫大鼠肺组织细胞凋亡的差异 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 维生素D_3对缺氧性肺损伤的预防效果 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.1.1 实验动物 |
| 6.1.1.2 实验主要试剂 |
| 6.1.1.3 实验仪器 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.1.2.1 构建Fdft 1沉默腺病毒载体 |
| 6.1.2.2 实验分组 |
| 6.1.2.3 肺动脉压检测 |
| 6.1.2.4 腹主动脉血氧分压及血氧饱和度检测 |
| 6.1.2.5 HE染色 |
| 6.1.2.6 透射电镜 |
| 6.1.2.7 免疫组化染色 |
| 6.1.2.8 RT-PCR方法 |
| 6.1.2.9 Western Blot方法 |
| 6.1.2.10 数据统计与分析 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 腺病毒sh-Fdft 1在H9C2细胞中的转染效率 |
| 6.2.2 Fdft 1在大鼠体内表达水平检测 |
| 6.2.3 Fdft 1和VD_3对低氧胁迫大鼠肺动脉压、血氧饱和度、血氧分压的影响 |
| 6.2.4 Fdft 1和VD_3对低氧胁迫大鼠肺组织含水量的影响 |
| 6.2.5 Fdft 1和VD_3对低氧胁迫大鼠肺组织病理形态的影响 |
| 6.2.6 Fdft 1和VD_3对低氧胁迫大鼠肺组织超微结构变化的影响 |
| 6.2.7 Fdft 1和VD_3对低氧胁迫后大鼠肺组织PCNA蛋白表达的影响 |
| 6.2.8 Fdft 1和VD_3对高原低氧胁迫大鼠肺组织中凋亡相关蛋白表达的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 小结 |
| 第七章 结论与展望 |
| 7.1 主要结论 |
| 7.2 对进入高原人群的防护建议 |
| 7.3 展望与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间科研成果 |
（2）MaR1治疗脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的效果和机制（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 ALI模型制备 |
| 1.2 小鼠肺组织病理学 |
| 1.3 免疫印迹 |
| 1.4 氧化应激标记分析 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组小鼠肺组织损伤评分比较 |
| 2.2 各组小鼠肺组织MAPKs、NF-κB和炎症介质活化比较 |
| 2.3 各组小鼠肺组织Nrf2、抗氧化酶表达和TBARS GSH比较 |
| 3 讨论 |
（4）细胞色素P450 1A1对巨噬细胞中一氧化氮生成的影响（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 细胞色素P4501A1在感染和炎症中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）扶芳藤提取物及主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 中药扶芳藤提取物、主要活性成分以及各萃取部位对炎症反应的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 扶芳藤提取物对LPS所致小鼠急性肺损伤的影响 |
| 2.2 MTT法测定扶芳藤提取物对RAW264.7细胞活力的影响 |
| 2.3 Griess法检测扶芳藤提取物对LPS诱导RAW264.7细胞分泌NO的影响 |
| 2.4 ELISA法检测细胞上清液中TNF-α、IL-6炎性因子分泌的影响 |
| 2.5 HPLC法测定正丁醇提取物的主要活性成分及含量 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞的影响及机制探究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 甜醇对RAW264.7细胞活力的影响 |
| 2.2 醇对LPS诱导RAW264.7细胞分泌NO的影响 |
| 2.3 甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α和IL-6的影响 |
| 2.4 醇对LPS诱导的RAW264.7细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65、COX-2、iNOs、IL-6、IL-1β和TNF-α RNA表达的影响 |
| 2.5 甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65、蛋白表达的影响 |
| 2.6 甜醇对LPS诱导RAW264.7细胞NF-κB p65核转位的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分 中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的A549细胞的影响及机制的探究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 甜醇对A549 细胞活力的影响 |
| 2.2 醇对LPS诱导A549细胞分泌NO的影响 |
| 2.3 甜醇对LPS诱导A549细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65、COX-2、iNOs、IL-6、IL-1β和TNF-α RNA表达的影响 |
| 2.4 甜醇对LPS诱导A549细胞TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65蛋白表达的影响 |
| 2.5 甜醇对LPS诱导A549 细胞NF-κBp65核转位的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第四部分 中药扶芳藤主要活性成分甜醇对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎作用及其作用机制探究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 甜醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺湿质量/干质量比值的影响 |
| 2.2 甜醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺匀浆中IL-1β、TNF-α和IL-6含量的影响 |
| 2.3 甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠的肺组织病理学影响的影响 |
| 2.4 甜醇对LPS诱导急性肺损伤小鼠BALF中总蛋白浓度和细胞渗出数的影响 |
| 2.5 甜醇对肺组织细胞中的TLR4、Myd88、TRIF、NF-κB p65蛋白表达的影响 |
| 2.6 甜醇对肺组织细胞NF-κB p65核转位的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 炎症及其机制与急性肺损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（8）基于TLR4/NF-κB通路探讨SDR9C7基因在急性肺损伤模型中作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 引言 |
| 1.1 急性肺损伤概述 |
| 1.1.1 急性肺损伤流行病学 |
| 1.1.2 急性肺损伤定义 |
| 1.1.3 急性肺损伤发病机理 |
| 1.2 脂多糖诱导的急性肺损伤机制研究进展 |
| 1.2.1 肺细胞中LPS信号转导机制 |
| 1.2.2 肺泡上皮I型细胞 |
| 1.2.2.1 ATI细胞功能简述 |
| 1.2.2.2 ATI细胞与LPS的相互作用 |
| 1.2.3 肺泡上皮II型细胞 |
| 1.2.3.1 ATII细胞功能简述 |
| 1.2.3.2 ATII细胞与LPS的相互作用 |
| 1.2.3.3 肺表面活性剂与LPS的相互作用 |
| 1.2.4 内皮细胞 |
| 1.2.5 肺泡巨噬细胞(AM) |
| 1.2.5.1 肺泡巨噬细胞功能 |
| 1.2.5.2 肺泡巨噬细胞与脂多糖的相互作用 |
| 1.2.6 肺成纤维细胞 |
| 1.3 TLR4/NF-κB通路概述 |
| 1.3.1 TLR4 研究进展 |
| 1.3.2 NFκB研究进展 |
| 1.3.3 Toll/ TLR信号通路 |
| 1.4 SDR9C7 的研究概况 |
| 1.4.1 SDR9C7 简介 |
| 1.4.2 SDR9C7是ARCI的一个致病分子 |
| 1.4.3 SDR9C7 与其他分子的相互作用 |
| 1.4.4 缺乏SDR9C7 的患者皮肤感染的风险更高 |
| 1.4.5 SDR9C7 患者角质层特有的神经酰胺成分 |
| 1.4.6 Sdr9c7 基因敲除小鼠的建立及鉴定 |
| 1.4.7 SDR9C7 在皮肤屏障形成中的重要作用 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 供试动物及细胞 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 脂多糖诱导ALI模型 |
| 2.2.2 HE染色观察小鼠肺组织形态学 |
| 2.2.2.1 制作小鼠肺组织石蜡切片 |
| 2.2.2.2 HE染色 |
| 2.2.2.3 肺组织病理评分 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测IL-1β、TNF-a、IL-6和SDR9C7 基因的表达情况 |
| 2.2.4 Western Blot检测小鼠肺组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达 |
| 2.2.5 细胞实验 |
| 2.2.5.1 SDR9C7-小干扰RNA(SmallinterferingRNA,siRNA)抑制效果验证 |
| 2.2.5.2 RT-PCR检测A549 细胞IL-1βm RNA、TNF-am RNA、IL-6m RNA和SDR9C7m RNA表达 |
| 2.2.5.3 Western Blot检测A549 细胞TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达 |
| 2.3 统计学方法 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 ALI模型小鼠肺组织形态学观察及病理评分 |
| 3.2 ALI模型小鼠肺组织TLR4/NF-κB通路表达 |
| 3.3 SDR9C7、IL-1β、TNF-a和 IL-6 基因在ALI模型小鼠肺组织中表达 |
| 3.4 ALI模型小鼠肺组织SDR9C7 基因表达与病理评分相关性分析 |
| 3.5 敲低SDR9C7 基因表达验证结果 |
| 3.6 敲低SDR9C7 基因对LPS诱导A549 细胞TLR4/NF-κB通路的影响 |
| 3.7 敲低SDR9C7 基因对LPS诱导A549 细胞IL-1β、TNF-α、IL-6、SDR9C7 基因表达的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 主要英文缩略语索引 |
| 硕士攻读期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（9）基于整合大数据的热毒宁注射液治疗病毒感染性疾病上市后评价研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 热毒宁注射液及其组方成分药理作用及临床研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 热毒宁注射液治疗急性上呼吸道感染的Meta分析 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 基于网络药理学的热毒宁注射液作用机制研究 |
| 第一节 基于网络药理学的热毒宁注射液治疗流感机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二节 基于网络药理学的热毒宁注射液治疗甲型H3N2流感机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第三节 基于网络药理学的热毒宁注射液治疗新型冠状病毒肺炎作用机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第四节 基于网络药理学的热毒宁注射液治疗手足口病作用机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 结语 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（10）人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗严重激素抵抗性哮喘的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 严重激素抵抗性哮喘 |
| 1.1.1 严重激素抵抗性哮喘的定义 |
| 1.1.2 严重激素抵抗性哮喘的发病机制 |
| 1.1.3 严重激素抵抗性哮喘发病的分子机制 |
| 1.2 巨噬细胞与严重激素抵抗性哮喘 |
| 1.2.1 巨噬细胞的表型和功能 |
| 1.2.2 巨噬细胞在严重激素抵抗性哮喘中的作用 |
| 1.3 间充质干细胞治疗肺部疾病的作用 |
| 1.3.1 间充质干细胞的功能 |
| 1.3.2 间充质干细胞来源外泌体的生物学特性 |
| 1.3.3 间充质干细胞来源外泌体治疗肺部炎症疾病的研究现状 |
| 第2章 脐带间充质干细胞外泌体的分离与鉴定 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 实验细胞 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 主要实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 脐带间充质干细胞稳定细胞系的建立 |
| 2.3.2 脐带间充质干细胞的鉴定 |
| 2.3.3 脐带间充质干细胞外泌体的分离 |
| 2.3.4 脐带间充质干细胞外泌体的鉴定 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 脐带间充质干细胞的形态 |
| 2.4.2 脐带间充质干细胞的鉴定 |
| 2.4.3 透射电镜下脐带间充质干细胞外泌体的形态与结构 |
| 2.4.4 NTA粒径分析外泌体颗粒直径 |
| 2.4.5 流式细胞仪鉴定人脐带间充质干细胞外泌体表面标志蛋白 |
| 2.5 讨论 |
| 第3章 MSC-Exo对 OVA/CFA诱导的SSRA小鼠的治疗作用 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 主要实验仪器 |
| 3.3 主要实验方法 |
| 3.3.1 严重激素抵抗性哮喘(SSRA)模型的构建与实验分组 |
| 3.3.2 小鼠气道高反应性(AHR)检测 |
| 3.3.3 小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)的采集 |
| 3.3.4 小鼠肺组织的取样与处理 |
| 3.3.5 流式细胞仪检测肺泡灌洗液BALF中性粒细胞比例 |
| 3.3.6 小鼠肺组织HE染色 |
| 3.3.7 小鼠肺组织PAS染色 |
| 3.3.8 小鼠肺组织免疫组化 |
| 3.3.9 小鼠肺组织总RNA提取 |
| 3.3.10 qRT-PCR实验检测肺组织中细胞因子的mRNA表达水平 |
| 3.3.11 ELISA检测小鼠肺组织匀浆上清样本中细胞因子水平 |
| 3.3.12 统计学处理 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 MSC-Exo对 SSRA小鼠AHR的影响 |
| 3.4.2 MSC-Exo对 SSRA小鼠气道中性粒细胞炎症的影响 |
| 3.4.3 MSC-Exo对 SSRA小鼠肺部炎症的影响 |
| 3.4.4 MSC-Exo对 SSRA小鼠气道粘液高分泌的影响 |
| 3.4.5 MSC-Exo对 SSRA小鼠肺组织中细胞因子表达水平的影响 |
| 3.5 讨论 |
| 第4章 MSC-Exo通过调节巨噬细胞极化治疗SSRA |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验细胞 |
| 4.2.3 实验试剂 |
| 4.2.4 主要试剂的配制 |
| 4.2.5 主要实验仪器 |
| 4.3 主要实验方法 |
| 4.3.1 SSRA小鼠模型的构建、治疗及巨噬细胞清除实验 |
| 4.3.2 小鼠肺组织单细胞悬液的制备 |
| 4.3.3 小鼠腹腔灌洗液的制备 |
| 4.3.4 小鼠脾脏单细胞悬液的制备 |
| 4.3.5 流式细胞术检测小鼠体内巨噬细胞清除效果 |
| 4.3.6 巨噬细胞清除后小鼠AHR的检测 |
| 4.3.7 巨噬细胞清除后小鼠肺组织HE染色 |
| 4.3.8 小鼠肺组织总RNA提取 |
| 4.3.9 RAW264.7 细胞炎症模型的构建与处理 |
| 4.3.10 ELISA检测RAW264.7 细胞炎症模型的细胞因子表达水平 |
| 4.3.11 RAW264.7 细胞总RNA提取 |
| 4.3.12 qRT-PCR检测RAW264.7 细胞因子与极化标志分子mRNA水平 |
| 4.3.13 细胞免疫荧光检测RAW264.7 细胞极化标志物表达情况 |
| 4.3.14 小鼠肺组织与RAW264.7 细胞总蛋白提取 |
| 4.3.15 蛋白浓度测定 |
| 4.3.16 Western blot实验 |
| 4.3.17 统计学处理 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 氯膦酸盐脂质体对小鼠体内巨噬细胞的清除效率 |
| 4.4.2 巨噬细胞细胞清除后MSC-Exo对 SSRA小鼠AHR的影响 |
| 4.4.3 巨噬细胞细胞清除后MSC-Exo对 SSRA小鼠肺部炎症的影响 |
| 4.4.4 MSC-Exo对 SSRA小鼠肺组织中巨噬细胞极化相关分子表达的影响 |
| 4.4.5 MSC-Exo对 RAW264.7 巨噬细胞极化的影响 |
| 4.5 讨论 |
| 第5章 MSC-Exo通过抑制TRAF1 调节巨噬细胞极化及机制研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.2.1 实验动物 |
| 5.2.2 实验细胞 |
| 5.2.3 实验试剂 |
| 5.2.4 主要试剂的配制 |
| 5.2.5 主要实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 RAW264.7 细胞炎症模型的构建与处理 |
| 5.3.2 TMT标记定量蛋白组测序样本的分组与准备 |
| 5.3.3 TMT标记定量蛋白组测序实验 |
| 5.3.4 TMT标记定量蛋白组测序结果分析 |
| 5.3.5 RAW264.7 细胞TRAF1 siRNA转染 |
| 5.3.6 RAW264.7 细胞TRAF1 过表达质粒转染 |
| 5.3.7 RAW264.7 细胞总蛋白提取 |
| 5.3.8 Western blot实验 |
| 5.3.9 统计学处理 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 MSC-Exo对 LPS刺激的RAW264.7 细胞蛋白表达谱的影响 |
| 5.4.2 MSC-Exo通过抑制TRAF1 表达调节巨噬细胞极化 |
| 5.4.3 MSC-Exo通过抑制TRAF1 调控极化相关信号通路NF-κB和PI3K/AKT |
| 5.5 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
四、Modulation of lung inflammation by surfactant and nitric oxide in E coli-induced septic acute lung injury in piglets（论文参考文献）
- [1]医学地理视角下高海拔环境对机体肺损伤机制的研究[D]. 蒲小燕. 青海师范大学, 2021
- [2]MaR1治疗脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的效果和机制[J]. 王强,林飞,胡召锟,林锦源,黄冰,潘灵辉. 广东医学, 2021(08)
- [3]杨梅素对脓毒症相关急性肺损伤保护作用与机制的研究[D]. 徐海博. 河北医科大学, 2021
- [4]细胞色素P450 1A1对巨噬细胞中一氧化氮生成的影响[D]. 唐欣. 遵义医科大学, 2021(01)
- [5]miR-34a-5p调控网络在急性肺损伤巨噬细胞极化中的作用机制[D]. 孔德峰. 长江大学, 2021
- [6]宣肺调肠方改善脓毒症ARDS患者毛细血管渗漏指数的疗效观察[D]. 蓝嘉欣. 广州中医药大学, 2021
- [7]扶芳藤提取物及主要活性成分甜醇对LPS诱导小鼠急性肺损伤的作用及机制研究[D]. 郑璐. 山西医科大学, 2021(01)
- [8]基于TLR4/NF-κB通路探讨SDR9C7基因在急性肺损伤模型中作用机制[D]. 贺思诺. 广西师范大学, 2021(09)
- [9]基于整合大数据的热毒宁注射液治疗病毒感染性疾病上市后评价研究[D]. 贾珊珊. 北京中医药大学, 2021
- [10]人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗严重激素抵抗性哮喘的作用与机制研究[D]. 董兵. 吉林大学, 2021(01)